 |
Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | |
Факторы контактной фазы свертывания
|
|
К факторам контактной фазы свертывания относят фактор XII (Хагемана), фактор XI, и прекалликреин, поскольку для активации этих проферментов в условиях in vitro требуется контакт с отрицательно заряженной поверхностью, на которой эти белки легко сорбируются. Для активации фактора XI и прекалликреина необходим также белковый кофактор – высокомолекулярный кининоген (ВМК).
Фактор XII – гликопротеин (Мr 78кDa), содержащий 6 доменов (Рис 1). На аминоконце молекулы фактора XII локализованы блоки типа II и типа I, структурно подобные доменам фибронектина (FN-2 и FN-1), связывающим коллаген и фибрин, соответственно. Между этими блоками расположен домен 2, подобный домену эпидермального фактора роста(EGF).За доменом3 типа I фибронектина (FN-1) следует еще один домен EGF и далее один крингл домен(5 домен), который через связывающий участок соединен с каталитическим (протеазным) шестым доменом, локализованным на С-конце молекулы.
Фактор XI циркулирует в кровотоке в нековалентном комплексе с высокомолекулярным кининогеном (ВМК). Молекула фактора XI – крупный гомодимер(Мr 143кDa), состоит из двух идентичных полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями (Рис). В структуре каждой из двух цепей фактора XI обнаружены четыре домена повторяющихся последовательностей с высокой степенью гомологии и каталитический домен на С-конце молекулы. Триада каталитического центра фактора XI образована остатками His 413, Asp462 и Ser557. Все повторяющиеся домены по структуре подобны яблоку (apple- домены), содержат 6 высококонсервативных остатков цистеина, образующих три дисульфидные связи, и имеют высокую степень гомологии соответствующим доменам прекалликреина. Аpple - домены повторяющихся последовательностей отвечают за связывание фактора XI с кофактором - высокомолекулярным кининогеном.
Высокомолекулярный кининоген (ВМК)- крупная молекула(120кDa), состоит из 6 доменов.На N –конце ВМК в домене1 локализован сайт связывания ионов кальция,в доменах2 и3 обнаружен консервативный мотив QVVAG, ответственный за ингибиторную активность ВМК в отношении цистеиновых протеиназ(кальпаина,катепсинов В и H, папаина). В доменах 3 и 5 локализованы сайты связывания с поверхностью клеток(тромбоцитов,эндотелиальных клеток,нейтрофилов), присутствием которых могут быть обусловлены антиадгезивные свойства ВМК.В домене 5 обнаружен участок, содержащий положительно заряженные остатки Lys,His, а также Gly, который несет ответственность за связывание с отрицательно заряженной поверхностью активированных клеток и формирование ансамбля факторов контактной фазы свертывания. В домене 4 локализована структура брадикинина, который выщепляется из ВМК калликреином и подобными ему ферментами. С-концевой домен 6 имеет протяженные участки связывания фактора XI и прекалликреина.
Кофакторы: факторы свертывания
Кофакторы - факторы V и VIII свертывания крови, крупные молекулы (Таблица 4, Рис 3), имеющие значительную гомологию структур. Оба белка содержат три разных типа доменов в последовательности А1-А2-В-А3-С1-С2. Три А домена имеют высокую степень гомологии доменам церулоплазмина. Два подобных друг другу С домена (F5/8-C –домены) гомологичны доменам дискоидина. Большой центральный B домен называют связывающей областью, поскольку он локализован между тяжелой цепью, состоящей из двух А доменов и легкой цепью, образуемой одним А доменом и двумя С доменами. Существенные различия между факторами V и VIII обнаружены в структуре связывающей области, которая отщепляется при активации факторов и функционирует как пептид активации.
Тромбин расщепляет фактор V по остаткам Arg709, Arg1018 и Arg1545. Активированная тромбином форма фактора V- фактор Vа, гетеродимер (А1-А2/А3-С1-С2), состоит из тяжелой и легкой цепей, стабилизированных ионами Са. Фактор Vа – кофактор фактора Xa, активатора протромбина. Участки связывания протромбина, фактора Xa и протеина S, кофактора активированного протеина С (АРС), локализованы в тяжелой цепи фактора Va, а за связывание фосфолипидов мембраны клеток и АРС отвечают участки легкой цепи.
Фактор VIII секретируется как гетеродимер вследствие расщепления по крайней мере двух связей в В домене. В циркуляции белок стабилизирован фон Виллебранда фактором и имеет время полужизни около 10 часов. Тромбин гидролизует фактор VIII по остаткам Arg372, Arg740 и Arg1689, выщепляя В домен и расщепляя один из высокоаффинных участков связывания фон Виллебранда фактора. Фактор VIII превращается в фактор VIIIа, гетеротример (А1/А2/А3-С1-С2), субъединицы которого стабилизированы ионами Са. Фактор VIIIа – эффективный кофактор фактора IXa, активатора фактора X. Инактивация фактор VIIIа происходит вследствие диссоциации двух А доменов тяжелой цепи или специфического расщепления связи между А1 и А2 доменами активированным протеином С. Фон Виллебранда фактор повышает стабильность фактора VIII и защищает его от инактивации АРС. Контроль активации фактора X является критическим событием гемостаза и тромбоза.
Дата публикования: 2015-01-23; Прочитано: 468 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!
