Реакция на дезоксикортикостерон

Ход работы. В пробирке смешивают 1 каплю масляного раствора дезоксикортикостерон-ацетата, 3-4 капли 96%-го этанола и 3-4 капли концентрированной серной кислоты. Смесь нагревают до кипения, охлаждают, добавляют еще 15 капель концентрированной серной кислоты и снова нагревают до кипения. Появляется синяя окраска.

3. Качественная реакция на 17-кетостероиды в моче

(реакция Циммермана)

17-кетостероиды являются конечным продуктом обмена гормонов коры надпочечников и половых гормонов. Они характеризуются наличием кетогруппы при 17-м углеродном атоме циклопентанпергидрофенантренового ядра. Различные 17-кетостероиды отличаются наличием или отсутствием функциональных групп у 11-го атома углерода, либо ароматич-ной структурой кольца А. Общая химическая формула 17-кето-стероида:

В моче 17-кетостероиды находятся в основном в виде глюкуронидов. Содержание 17-кетостероидов в суточной моче здоровых людей зависит от возраста и пола. Так, у детей до 6 лет оно равно 3-4 мг/сутки, а с 6 до 12 лет – 5-10 мг/сутки. Суточная моча женщин детородного возраста содержит 6-15 мг 17-кетостероидов, а мужчин – 15-25 мг.

Количество 17-кетостероидов в моче меняется при гипер- и гипофункции надпочечников, аденогипофиза, семенников.

Так, при болезни Аддисона оно составляет 1/5-1/3 нормы, а при болезни Симмондса почти равно нулю. Содержание 17-кетостероидов в моче также понижено при гипотиреозе, циррозе печени, гипофизарной карликовости, недостаточной функции семенников.

Количество 17-кетостероидов в моче повышено при акроме-галии, синдроме Иценко–Кушинга, андрогенитальном синдро-ме, опухолях семенников и надпочечников. Так, при опухолях семенников оно достигает 1500 мг/сутки, а при опухолях надпо-чечников – 2000 мг/сутки.

Реакция Циммермана основана на взаимодействии в щелоч-ной среде 17-кетостероидов с мета-динитробензолом с образова-нием продуктов конденсации вишнево-красного или розово-фиолетового цвета.

Ход работы. В сухую пробирку вносят 5 капель мочи, 5 капель 2%-го спиртового раствора мета-динитробензола и 5 капель 30%-го раствора гидроксида натрия, перемешивают. Через 2-3 минуты появляется вишнево-красное окрашивание, характерное для 17-кетостероидов.

Эту же реакцию можно сделать иначе: пробирку с 20 каплями мочи наклоняют под углом 45^о и медленно, осторожно по стенке добавляют 30 капель 2%-го спиртового раствора мета-динитробензола. Затем также по стенке прибавляют 6 капель 24%-го спиртового раствора гидроксида натрия. Верхний слой окрашивается в розово-фиолетовый цвет

Оформление работы

Результаты качественных реакций на каждый гормон оформите в виде таблицы:

Основные характеристики	Название гормона
Место синтеза
Химическая природа гормона
Качественная реакция
Употребляемые реактивы
Наблюдаемое окрашивание
Механизм реакции

Техника безопасности

· Осторожно обращайтесь с концентрированными кислотами и щелочами.

· Соблюдайте правила техники безопасности, пользуясь электронагревательными приборами и спиртовкой.

Список рекомендуемой литературы

1. Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии / Под ред. Т. Г. Березова. М: Медицина, 1976. 294 с.

2. Кушманова О. Л., Ивченко Г. М. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. М: Медицина, 1983. 272 с.

3. Методические указания к лабораторным занятиям по биохимии / Под ред. В. В. Рудакова. Л., 1986. 54 с.

4. Кучеренко Н. Е., Бабенюк Ю. Д., Васильев А. Н. Биохимия: Практикум. Киев: Вища школа, 1988. 128с.

5. Алейникова Т. Л., Рубцова Г. В. Руководство к практическим занятиям по биохимии. М.: Высшая школа, 1988. 239 с.
содержание

Предисловие………………………………………………….. 3

РАБОТА 1. Ознакомление с действием некоторых ферментов ………………………...…………... 4

РАБОТА 2. Специфичность действия ферментов ……..….. 6

РАБОТА 3. Зависимость каталитической активности ферментов от температуры и реакции среды.. 8

РАБОТА 4. Количественное определение активности каталазы в крови по методу Баха

и Зубковой ……………..……………………... 11

РАБОТА 5. Качественные реакции на витамины ………... 13

РАБОТА 6. Количественное определение аскорбиновой кислоты методом Тильманса ……..………… 30

РАБОТА 7. Определение количества глюкозы в крови ортотолуидиновым методом …………………35

РАБОТА 8. Глюкозооксидазный метод определения

глюкозы в биологических жидкостях ……..... 38

РАБОТА 9. Влияние физической нагрузки на содержание глюкозы в крови ……………………………... 40

РАБОТА 10. Влияние сахарной нагрузки на содержание глюкозы в крови …………….. ………...…….. 41

РАБОТА 11. Влияние инсулина на содержание сахара

в крови ………………………………………... 43

РАБОТА 12. Влияние адреналина на содержание сахара

в крови ……..……………………….………….. 46

РАБОТА 13. Количественное определение пировино-градной кислоты в крови модифицированным методом Умбрайта …………….……………... 47

Работа 14. Количественное определение общих липидов

в сыворотке крови ……………………...……. 50

работа 15. Определение количества общего холестерола

в сыворотке крови методом Илька …………. 53

работа 16. Определение содержания липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови

по методу Бурштейна ……………………….. 57

РАБОТА 17. Определение концентрации общего

холестерола в сыворотке крови

энзиматическим методом …………………….59

РАБОТА 18. Количественное определение холестерола липопротеинов высокой плотности в сыворотке крови энзиматическим методом \…………... 61

работа 19. Анализ желудочного сока ……..………….... 62

работа 20. Контрольные задачи на исследование желудочного сока..………………………..…. 70

работа 21. Количественное определение активности аминотрансфераз в крови по методу Кинга.. 71

работа 22. Качественные реакции на некоторые

гормоны ………………….………….……..…. 73

Список рекомендуемой литературы ………………..…….. 85

Составители

Яковлева Муза Николаевна

Осташкова Валентина Викторовна

ОБМЕН ВЕЩЕСТВ

Методические указания к лабораторным занятиям по биологической химии для студентов 2-го курса медицинского факультета

Редактор Л. П. Соколова

ЛРИД № 02969 от 06.10.2000 г.

Гигиенический сертификат № 10.КЦ.34.953. П00136.03.99 от 05.03.99.

Подписано в печать 05.02.02

Формат 60 х 84 1/16. Бумага газетная.

Офсетная печать. Н 5,6 уч.-изд. л.

24 усл. кр. - отт. Тираж 600 экз. Изд. № 3

Петрозаводский государственный университет

Типография издательства Петрозаводского государственного университета

185640, г. Петрозаводск, пр. Ленина, 33