Определение размеров клеток

Клетки микроорганизмов отличаются широким разнообразием линейных размеров. У одних микроорганизмов размеры клетки могут составлять сотые доли микрометров (мкм), у других - несколько сотен микрометров. Для измерения линейных размеров мик­роскопических объектов служит окулярный винтовой микрометр MOB-1-15^х- Он является принадлежностью микроскопа и состоит из компенсационного окуляра с диоптрийной наводкой в пределах ±5 диоптрий и отсчетного механизма.

В фокальной плоскости окуляра микрометра расположена неподвижная стеклянная пластинка, на которой нанесена сетка с шкалой от 0 до 8 мм и с ценой деления 1 мм. В этой же плоскости расположена и подвижная стеклянная пластинка, на которой изображена сетка с перекрестием и индексом в виде рисок. Подвижная сетка перемещается микрометрическим винтом таким образом что перекрестие и риски перемещаются в поле зрения окуляра относительно неподвижной шкалы.

Шаг винта равен 1 мм. Таким образом, при повороте барабана винта на один оборот, риски и перекрестие в поле зрения окуляра переместятся на одно деление шкалы. Поэтому неподвижная шкала показывает количество полных оборотов барабана, т.е. отсчитывает целые миллиметры.

Так как барабан винта разделен на 100 частей, то поворот барабана на одно деление соответствует перемещению перекрестия на 0,01 мм. Следовательно, сотые доли миллиметра отсчитываются по барабану микрометрического винта.

Полный отсчет по шкалам окулярного микрометра складывается из отсчета по неподвижной шкале и отсчета по барабану микрометрического винта. Отсчет по неподвижной шкале в поле зрения определяется положением рисок, т.е. подсчитывается, на сколько полных делений шкалы переместились риски, начиная с нулевого деления шкалы.

Отсчет по барабану микрометрического винта производится путем определения, какое деление его шкалы находится против индекса, расположенного на неподвижном патрубке винта. Например, риски в поле зрения расположены между делениями «5» и «6» шкалы в поле зрения окуляра, а индекс барабана прихо­дится против деления «35» шкалы барабана. Тогда в поле зрения по шкале окуляра отсчитывают целые миллиметры и отмечают поло­жение рисок. В виду того, что риски не дошли до деления «6», отсчет будет равен 5,00 мм.

Так как цена одного деления шкалы барабана равна 0,01 мм, то отсчет по барабану будет равен 0,35 мм (0,01 (35). Полный отсчет по шкалам окуляра будет равен: 5,00 + 0,35 = 5,35 мм.

Для определения линейного размера рассматриваемого объекта необходимо знать линейное увеличение объектива микроскопа. Для этого применяется объект-микрометр, который устанавливается на столик микроскопа. Окулярный микрометр МОВ-1-15^х (рис. 35) надевают на окулярную трубку тубуса микроскопа до упора и закрепляют на ней винтом (4). После этого, вращая окуляр (3) за накатанную часть, устанавливают его на резкость изображения перекрестия. Затем фокусируют тубус на резкость изображения шкалы микрометра и приступают к измерению увеличения объектива.

Рис 35. Окулярный микрометр 1 - корпус, 2 - отсчетный барабан, 3 - окуляр с диоптрийной наводкой,

4 - винт для крепления на тубусе микроскопа, 5 - вид под микроскопом.

По шкале микрометра учитывают некоторое число делений, укладывающихся в 2/3 поля зрения окуляра. Использовать все поле зрения окуляра не рекомендуется, т.к. на краю поля качество изоб­ражения несколько хуже, чем в центральной части.

Для удобства измерения нулевой штрих шкалы объект-микрометра устанавливают на расстоянии 1/3 радиуса поля зрения от края. После этого, наблюдая в окуляр, вращением барабана по часовой стрелке подводят центр перекрестия окуляра на совмещение с изображением нулевого штриха шкалы объект микрометра и производят отсчет по шкалам окулярного микрометра.

Наблюдая в окуляр, вращением барабана по часовой стрелке совмещают центр перекрестия с изображением штриха, который расположен на расстоянии 1/3 радиуса поля зрения от края, и делают второй отсчет по шкалам окулярного микрометра. Затем подсчиты­вают принятое при измерении число делений шкалы объект-микрометра, вычисляют разность отсчетов по шкалам окулярного микрометра и определяют линейное увеличение объектива по формуле:

где: β - линейное увеличение объектива;

II-I - разность двух отсчетов по шкалам окулярного микрометра;

X - принятое при измерении число делений объект-микромета.

Y - цена деления шкалы объект-микрометра.

Пример. Первый отсчет по окулярному микрометру равен 2,50 мм, второй отсчет - 6,35 мм; X = 25; Y = 0,01 мм.

Следовательно, линейное увеличение объектива равно 15,4^х.

Зная линейное увеличение объектива, приступают к измерению объекта, рассматриваемого в микроскоп. Для этого на столик микроскопа вместо объект-микрометра помещают измеряемый объект и фокусируют его на резкость изображения. Наблюдая в окуляр и вращая барабан по часовой стрелке, подводят центр перекрестия на совмещение с краем объекта и делают первый отсчет по шкалам микрометра. Таким же образом перекрестие совмещают с другим краем объекта и делают второй отсчет по шкалам микрометра.

Для определения величины объекта (L) делают вычисления по формуле:

где: II - I - разность двух отсчетов по шкалам окулярного микрометра; β - линейное увеличение объектива.