Изучение антагонистических свойств штаммов L. plantarum FK20 и В. Subtilis F7

В связи с тем, что целью нашей работы являлось исследование микробиологических свойств комплексных пробиотических бактерий, для получения комплекса мы использовали штамм Вacillus Subtilis F7, полученный из музея кафедры «Биотехнология».

Высокая антагонистическая активность лактобактерий в отношении патогенных и условно- патогенных бактерий может быть вызвано не только продуцированием органических кислот, но и образованием антагонистических веществ. Во всех случаях изучаемые лактобактерии полностью подавляли рост и развития указанных тест-культур.

Защитные свойства лактобактерий во многом определяются их адгезивностью. Именно это свойство позволяет лактобактериям присутствовать в микрофлоре стенки кишечника, стать составной частью экологического барьера, блокиравать рецепторы клеток слизистых адгезинов патогенных микроорганизмов [43].

Успешная конкурентоспособность микроорганизмов на этапе колонизации биологических поверхностей обеспечивается не только их адгезивностью, но и выраженной антагонистической активностью.

Мы изучали анатгонистическую активность штаммов L. plantarum FK20 и В. Subtilis F7по отношению к Е. соli.

Е. соli является представителем грамположительных бактерий. Этот микроорганизм чаще всего выделяется из кишечника животных, проявивших клинику гастроэнтерита или дисбактериоза и отстающих в росте, а также применяются в лабораторных исследованиях в случаях изыскания и изучения антибиотиков и их продуцентов.

В своих исследованиях мы не касались природы выделяемых антибиотических веществ и ограничились только качественной стороной способности исследуемых микроорганизмов подавлять развитие других видов.

На начальном этапе изучали антагонистические свойства бактерий с помощью штрихов, однако среда, пригодная для развития тест – микроба, оказалась непригодной для культивирования ацидофильной палочки и бифидобактерий.

Чтобы устранить этот недостаток, в дальнейшем использовали метод агаровых блочков.

Об антагонистической активности изучаемых микроорганизмов судили по диаметру воды задержания роста тест – микроба вокруг агаровых блочков. Метод агаровых блочков дал возможность использовать оптимальные среды и температуры культивирования для тест – микробов и микробов – антагонистов. Кроме того, благодаря этому методу, удалось проследить накопление антибиотика в процессе развития микроба – антагонист. В таблицах 5 отражены полученные результаты.

Таблица 6 - Угнетение роста тест – микробов штаммом L. plantarum FK20

Тест – микроб	Диаметр зоны задержки роста тест – микроба, мм
3-х дневная культура штамма L. plantarum FK20	4-х дневная культура штамма L. plantarum FK20	5-ти дневная культура штамма L. plantarum FK20	6-ти дневная культура штамма L. plantarum FK20
Е. соli	Нет зоны
Р. vulgaris
S. enteritidis

Как видно из таблицы 5, выраженность антагонистической активности штамма FK20 зависит от возраста культуры и вида тест – микроба.

Наибольшее накопление антибиотического вещества происходило на шестые сутки культивирования. К его предельной концентрации в среде наиболее чувствительны Р. vulgaris и B. subtilis, зона задержки роста которых составила 20-22 мм в диаметре. Причем, уже в течение трех суток культивирования ацидофильной палочки в агаре накапливалось достаточное количество антибиотического вещества, губительно действующего на эти тест – микробы. Вокруг агарового блочка с трехдневной культурой штамм МD-1 зона задержки роста Р. vulgaris и B. subtilis составила 13-25 мм, вокруг 6-ти дневной 20-22 мм.

Менее чувствительным к антибиотическому веществу ацидофильной палочки оказался вид S. еnteritidis. Вокруг трехдневной культуры штамма МD-1 образовалась зона задержки его роста диаметром 7 мм, вокруг шестидневной – 18 мм.

Наибольшую устойчивость проявили клетки Е. соli. Трехдневная культура L. plantarum FK20 вообще не подавляла их развитие. При культивировании ацидофильной палочки в течение шести дней в агаре накапливалось достаточное количество антибиотического вещества для подавления Е. соli, однако диаметр задержки роста составлял 12 мм.

В результате установлено, что исследуемые штаммы не оказывают взаимоподавляющего действия друг на друга, поскольку вокруг агаровых блочков не было зон отсутствия роста микроорганизмов.

Таким образом, в опытах установлено, что штамм L. plantarum FK20 выделяет антибиотическое вещество или вещества, губительно действующие как на грамположительную, так и на грамотрицательную микрофлору. Результаты изучения антагонистической активности B. subtilis F7 отражены в таблице.

Таблица 7 - Угнетение роста тест – микробов штаммом B. subtilis F7