Специальное оборудование

Микроскоп ультрафиолетовый МУФ-3М или люминесцентный.

Ход определения

Кровь смешивают с акридиновым оранжевым в пробирке или смесителе в соотношении 1 часть крови и 10 частей краски (смесь можно хранить не более 5 часов). Смесь перемешивают в течение 2 минут, каплю смеси наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. При этом жидкость не должна выходить за пределы покровного стекла. Микроскопируют с помощью светофильтра ЖС-17. В препарате эритроциты имеют темно-зеленые очертания и не флюоресцируют, а в ретикулоцитах зернисто-сетчатая субстанция светится ярко-красным цветом, благодаря чему ретикулоциты легко подсчитать. Замечено, что в крови, стабилизированной гепарином или цитратом натрия, флюоресценции ретикулоцитов не наблюдается.

Подсчитывают 1000 клеток (эритроцитов и ретикулоцитов), подобно подсчету ретикулоцитов в мазках, после окраски специальными красителями. Результат выражают в процентах или промилле.

Морфология клеток моноцитарного ростка

Монобласт

Монобласт - родоначальная клетка моноцитарного ряда. Размер 12 - 20 мкм. Ядро большое, чаще круглое, нежносетчатое, светло-фиолетового цвета, содержит 2 - 3 ядрышка. Цитоплазма монобласта сравнительно небольшая, без зернистости, окрашена в голубоватые тона.

Промоноцит

Промоноцит - отличается от монобласта более грубым ядром и отсутствием четких нуклеол. Цитоплазма серовато-голубого, а иногда синего цвета, окружает ядро ободком, может содержать мелкую азурофильную зернистость.

Моноцит

Моноцит - зрелая клетка. Размер - 12 - 20 мкм. Ядро светло-фиолетового цвета, может иметь различную форму - круглую, овальную, подковообразную, кольцевидную, в виде петли, бабочки. гриба, иногда становится сегментированным. Структура хроматина крупно-сетчатая, петлистая. Ядро занимает большую или равную с цитоплазмой часть клетки. Цитоплазма серовато-голубая, дымчатая, нередко содержит пылевидную азурофильную зернистость и вакуоли.

В норме в периферической крови и костном мозге у взрослого человека из вышеперечисленных клеток встречаются только моноциты.

Моноциты проводят в кровотоке всего около 20 часов, а затем попадают в периферические ткани, где трансформируются в макрофаги ретикуло-эндотелиальной системы, поэтому их, крайне редко в норме и чаще при патологии, можно обнаружить в костном мозге.

Макрофаги

Как правило, макрофаги представляют собой крупные клетки (15 - 80 мкм) неправильной формы. Ядро чаще одно, овальное или продолговатое, хроматин неплотный. Цитоплазма обильная, без четких границ, голубая, иногда с азурофильными гранулами. В макрофагах можно обнаружить различные включения - обломки клеток, эритроциты, пигмент, капли жира, иногда бактерии и т. д. В зависимости от характера включений макрофаги можно разделить на эритрофаги, пигментофаги, липофаги, бактериофаги и др.

В нормальном костном мозге чаще других можно встретить следующие виды макрофагов:

Липофаг - макрофаги, цитоплазма которых заполнена бесцветными вакуолями (капли жира). Ядро клетки нередко оттеснено к периферии и редуцировано. При окраске суданом капли жира окрашиваются в оранжевый цвет.

Остеокласт - также относится к макрофагам. Остеокласты - гигантские многоядерные клетки. Количество ядер в клетках - от 3 до 20 и более. Это отростчатые клетки, длина и форма которых могут значительно варьировать. Некоторые остеокласты имеют короткие, как бы закругленные отростки, другие - более длинные и даже расщепляющиеся. Ядра светлые, одинаковой величины, в основном овальной формы; располагаются беспорядочно, чаще в центре клетки. В ядрах имеются единичные ядрышки. Цитоплазма остеокласта обильная, окрашивается в голубые тона, нередко с розоватым оттенком. В ней содержится мелкая ацидофильная зернистость, которая может густо заполнять всю цитоплазму и обусловливать ее красновато-розовый цвет. В ряде клеток зернистости мало, и она либо распределена по всей площади клеток, либо находится только в ее отростках.