Практическая работа №1. Определение концентрации гемоглобина в крови с помощью гемометра Сали

Ход работы и интерпретация результатов. В среднюю пробирку гемометра Сали приливают 0,1 N раствор HCl до метки «5» (нижнее кольцо). С помощью градуированного капилляра Сали набирают 0,02 мл крови и, удалив сухим ватным тампоном ее избыток с кончика капилляра, выдувают кровь на дно пробирки. Не вынимая пипетки, ополаскивают ее соляной кислотой из верхнего слоя. Ударами указательного пальца по дну пробирки жидкость перемешивают и на 5 мин помещают в среднее гнездо гемометра. В течение этого времени гемоглобин, соединяясь с соляной кислотой, превращается в соляно-кислый гематин, и цвет раствора из красного становится коричневым. Затем по каплям добавляют дистиллированную воду. Жидкость перемешивают стеклянной палочкой и постепенно, следя за цветом раствора, достигают совпадения цветности раствора со стандартом.

По шкале на пробирке определяют деление, соответствую­щее нижнему мениску жидкости. Цифра деления шкалы выражает количество гемоглобина в процентах, т. е. в граммах на 100 мл крови. Для перевода этого значения в СИ, т. е. грамм на литр, надо полученное число умножить на 10.

Основные погрешности метода Сали связаны с влиянием белков плазмы на реакцию между гемог­лобином и соляной кислотой, интерференцией со стороны билирубина, неустойчивостью окраски под действием света, изменением со временем стан­дартных растворов гематина. В результате суммар­ная ошибка метода Сали при определении гемогло­бина достигает 30 %. Согласно современным требо­ваниям (Приказ МЗ РФ № 45 от 7.02.2000) предель­но допустимое значение коэффициента общей ана­литической вариации при определении гемоглобина не должен превышать 5%. Поэтому метод Сали не пригоден для использования в клинико-диагностических лабораториях.