Приложение 2. Ответы на задачи 289
областью ДНК. Если за доминантную суперрепрессию ответственны главным образом тетрамеры Is4, то смещение относительного содержания различных гомо- и гетеротетрамеров в сторону значительного преобладания тетрамеров типа I+4 по сравнению с Is4 должно повлиять на уровень репрессии с восстановлением чувствительности к индукции. Эту гипотезу можно проверить с помощью введения в клетку гена lacI + с суперпродукцией репрессора и последующей проверки оперона на индуцибельность. 15.11. У фага λ поздние гены, включая ген R, находятся под контролем продукта гена Q, который обеспечивает возможность продления синтеза (при участии полимеразы хозя-
| ина) молекул мРНК, индуцированных на p'R. Фаги 434 и λ обладают целым рядом общих генов, за исключением генов иммунитета и att -сайта. Инфекция лизогена по фагу 434 фагом λR– будет сопровождаться наработкой продукта гена Q фага λR –. Благодаря этому окажется возможной экспрессия гена R + фага 434 за счет включения транскрипции поздних генов, которая инициируется на гомологичном промоторе p'R профага 434. Это явление было названо «трансактивацией». Достоверность интерпретации можно проверить с помощью инфекции фагом λR– штамма, лизогенного по фагу 434, также несущему мутантный ген R –. В этом случае лизис не должен наблюдаться.
|
Глава 16
|
|
16.1. Приводим перечисление основных этапов. Каждый из них под влиянием различных мутаций может претерпевать разного рода изменения. Определенные мутации могут полностью блокировать данный этап, а другие - лишь снижать эффективность образования конечного продукта - ß-глобулина.
| 16.5. В пользу этой гипотезы свидетельствует наблюдение об участии определенной последовательности ДНК, локализованной со. стороны 5' от гена hsp70 Drosophila, в ответе на тепловой шок в клетках млекопитающих, а также, вероятно, и в собственных клетках Drosophila. По-видимому, клетки млекопитаю-
|
| щих располагают особыми регуляторными молекулами, которые активируются при тепловом шоке и могут узнавать данную последовательность ДНК. Существование такого рода общего регуляторного механизма можно рассматривать как свидетельство происхождения от общего эволюционного предшественника. 16.7. Трудности, связанные с использованием простого делеционного анализа для уяснения влияния данной последовательности ДНК на экспрессию прилегающего к ней гена, заключаются в том, что удаление определенной последовательности фактически приводит к ее замещению на другую, граничащую с ней последовательность. Эта последняя сама по себе может содержать участки, способные оказывать определенное влияние на экспрессию искомого гена. Ввиду этого интерпретация истинной роли делетированной последо-
|
16.3. Отчетливо наследуемый характер могут иметь лишь те механизмы регуляции экспрессии генов, которые связаны с изменением структуры ДНК. Известны два таких механизма: метилирование оснований и структурные перестройки последовательности ДНК.
| вательности может оказаться весьма неоднозначной. Метод линкерного сканирования не полностью свободен от вышеупомянутого ограничения. В то же время для уяснения функциональной роли замещаемой последовательности этот метод следует признать более адекватным, поскольку он основан на замене природных последовательностей на стандартный фрагмент ДНК того же размера.
|