![]() |
Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | |
|
Для определения концентрации гемоглобина в крови используются:
- унифицированный гемиглобинцианидный метод;
- гемихромный метод – новый колориметрический метод, не содержащий в составе реагентов ядовитых цианистых соединений;
- гематологические анализаторы.
Распространенный в прошлом метод определения гемоглобина по Сали недостаточно точный и в настоящее время не применяется.
Определение концентрации гемоглобина крови унифицированным гемиглобинцианидным методом
Принцип. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красной кровяной солью) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином соединение красного цвета – гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина.
Реактивы.
1. Трансформирующий раствор: ацетонциангидрин – 0,5мг; калий железосинеродистый – 0,2г; натрия гидрокарбонат – 1,0г; дистиллированная вода - до 1л. Раствор стабилен при комнатной температуре в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла. При обесцвечивании и появлении осадка непригоден.
2. Калибровочный раствор гемиглобинцианида – для построения калибровочного графика (при использовании ФЭКа). В настоящее время для определения гемоглобина крови в большинстве клинико-диагностических лабораторий пользуются готовыми наборами реактивов, выпускаемыми рядом фирм.
Специальное оборудование: ФЭК или МИНИГЕМ-540.
Ход определения. В пробирку с помощью градуированной пипетки или автоматического дозатора наливают точно 5мл трансформирующего раствора и вносят в него 0,02мл (капилляр Сали) крови, промывая капилляр 2-3 раза трансформирующим раствором. Тщательно перемешивают содержимое пробирки. При этом получается разведение крови в 251 раз. Колориметрируют содержимое пробирки через 20 минут на МИНИГЕМе-540 или на ФЭКе при условиях: светофильтр зеленый (длина волны 520-560 нм), кювета 10мм; против трансформирующего раствора. При использовании ФЭКа содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику.
Дата публикования: 2014-11-02; Прочитано: 9542 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!