![]() |
Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | |
|
Генетическая инженерия состоит из двух разделов — генной и геномной инженерии (таблицы 1и 2).
Таблица 1- Генная инженерия
Содержание | Этапы | Инструментарий | Методы переноса генов |
Конструирование организмов с несвойственными данному виду характеристиками | In vivo: извлечение генов, их перенос и закрепление в новом генетическом окружении, экспрессия генов In vitro: синтез или выделение генов; их модификация, замена промоторов и терминаторов; локальный мутагенез; присоединение генов к векторным молекулам, введение их в клетки, клонирование и экспрессия | Вирусы, плазмиды и транспозоны Рестриктазы и др. нуклеазы, ДНК-лигаза, обратная транскриптаза и др. ферменты. Векторы, адаптеры, полилинкеры, зонды и др. | Трансдукция, конъюгация, транспозиция, слияние протопластов Трансформация, электропорация, микроинъекция в ядра эукариот |
Генная инженерия методами in vivo и in vitro решает задачи введения в геном реципиентной клетки одного или нескольких (обычно чужеродных) генов либо создания в геноме новых типов регуляторных связей. В таких случаях видовая принадлежность реципиентных организмов не меняется, но появляются несвойственные им признаки.
Таблица 2 - Геномная инженерия
Содержание | Объект | Методы конструирования |
Конструирование организмов новых видов | Вирусы Клетки прокариот Клетки эукариот | Рекомбинация in vivo и in vitro Межвидовая конъюгация и слияние протопластов Слияние растительных протопластов и животных клеток; введение изолированных метафазных хромосом в клетки; микроинъекция хромосом в ядра; перенос изолированных митохондрий и хлоропластов |
Перед геномной инженерией стоят задачи более глубокого вмешательства в геном, вплоть до создания новых видов организмов. Методы решения таких задач различны для вирусов и для про- и эукариотических клеток.
Часто генетическую инженерию сводят лишь к операциям с молекулами ДНК методами in vitro. Такое сужение области генетической инженерии вряд ли оправдано, поскольку ее конечным результатом является конструирование рекомбинантных молекул ДНК и метод здесь не имеет значения. Нет, например, никакой принципиальной разницы между трансдуцирующими фагами, полученными методами in vivo и in vitro: в обоих случаях целенаправленно конструируются или отбираются фаги с заданными свойствами. Во многих экспериментах с клетками высших эукариот результат достигается только последовательными операциями in vivo и in vitro.
Методы генетической инженерии успешно применяются для решения фундаментальных проблем. Решающее значение они имеют для исследования молекулярной структуры геномов и генов, а также молекулярных механизмов регулирования их экспрессии. Уже на начальных этапах их применения удалось достигнуть существенного прогресса при изучении эукариотических организмов. Был установлен факт прерывного строения генов, выявлены мобильные элементы, выяснены генетические причины злокачественного перерождения клеток и т.д. Генетическая инженерия способствовала становлению новых научных направлений, составляющих базу молекулярной медицины: молекулярной вирусологии, молекулярной онкологии, молекулярной нейрофизиологии и т. д.
Существенных успехов генетическая инженерия достигла и при решении прикладных задач, дав толчок зарождению молекулярной биотехнологии. В первые годы основными объектами генно-инженерных экспериментов были клетки Escherichia coli К-12, а также ее плазмиды и бактериофаги, так как именно они были наиболее полно изучены генетически. Это позволяло целенаправленно конструировать новые типы векторных молекул и штаммы – реципиенты, а также прогнозировать свойства рекомбинантных молекул ДНК и проводить их анализ. Но со временем были разработаны системы клонирования для различных промышленно важных микроорганизмов, а также для клеток растений и животных. В настоящее время можно получать растения и животных, содержащих в своем геноме любой избранный ген. Успех работы зависит только от суммы вложенных в нее средств.
По достигаемому конечному результату можно выделить следующие области генетической инженерии (молекулярной биотехнологии):
1. Генетическая инженерия микробиологических систем (создание штаммов - продуцентов лекарственных препаратов, вакцин, ферментов для сельского хозяйства, антибиотиков, аминокислот и др. коммерческих продуктов, препаратов для очистки окружающей среды, биоудобрений, инсектицидов и т.д.)
2. Генетическая инженерия эукариотических систем (создание трансгенных растений и животных).
Дата публикования: 2015-10-09; Прочитано: 4137 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!