Проведение анализа. Обследуемый принимает утром натощак амидопирин из расчета 6 мг/кг веса (Aобщ)

Обследуемый принимает утром натощак амидопирин из расчета 6 мг/кг веса (A_общ). Собирается 4 порции мочи в интервале соответственно от 1 до 6 часов, 6-12, 12-24 и 45-48 часов. Объем мочи измеряется. Не позже чем через 24 часа, моча центрифугируется или фильтруется.

Далее исследуется концентрация 4‑аминоантипирина (опыт 1) и N‑ацетил-4-аминоантипирина (опыт 2):

	Опыт 1, мл	Опыт 2, мл
Моча Аммиачный буфер Соляная кислота	1,5 0,3 0,3	1,5 –– 0,3
	Выдержать 15 минут при комнатной температуре	Закрыть пробкой. Выдержать 15 минут при 100°С
	Пробирки охлаждают и центрифугируют при 1500 об/мин
Аммиачный буфер	––	0,6
Вновь центрифугируют при 1500 об/мин
Надосадок Дистилл. вода ТХУ Раствор фенола Р-р K3[Fe(CN)6]	0,6 –– 0,5 2,0 0,1	0,8 0,2 –– 2,0 0,1
	Инкубируют 10 минут при 20-25°С. Не позднее чем через 60 минут измеряют оптическую плотность проб против воды при 510 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрацию продуктов биотрансформации амидопирина в моче (мг/л) определяют по калибровочному графику, построенному с использованием калибровочных растворов антипирина в диапазоне от 3 до 20 мг/л.

Количество 4-аминоантипирина (A₁, мг в порции мочи) находят, умножая его концентрацию (опыт 1) на соответствующий объем мочи (л).

Общее количество 4-аминоантипирина и N‑ацетил-4-аминоантипирина (A₁₊₂, мг в порции мочи) находят, умножая их концентрацию (опыт 2) на соответствующий объем мочи (л).

Количество N-ацетил-4-аминоантипирина (A₂), выделенного с мочой за сутки, находят по разности содержания в опыте 1 и опыте 2.

Монооксигеназную активность печени оценивают по формуле:

Активность монооксигеназ (%) = , где

A₁ – количество 4-аминоантипирина в порции мочи,
A_общ – количество введенного амидопирина.

Ацетилирующую активность ферментных систем печени находят по формуле:

Активность трансфераз (%) = , где

A₂ – количество N-ацетил-4-аминоантипирина в порции мочи,
A₁ – количество 4-аминоантипирина в порции мочи.

Общую обезвреживающую способность ферментных систем печени оценивают по формуле:

Общая активность (%) =

Клинико‑диагностическое значение

Изучение скорости метаболизма лекарственных веществ, поступающих в организм, позволяет оценивать активность ферментных систем печени, участвующих в биотрансформации ксенобиотиков.

Снижение скорости наблюдается при заболеваниях печени (цирроз, гепатит), с увеличением возраста.

Увеличение скорости наблюдается при регулярном приеме некоторых веществ – барбитураты, этанол.