Герпесвирусы

Хотя эти ДНК-вирусы выделены от змей и ящериц, они представляют наибольшую проблему у пресноводных, морских и сухопутных черепах. Герпесвирусная инфекция у черепах, как и у высших позвоночных, связана с деструкцией клеток, лизисом и пролиферацией или преимущественно пролиферацией. Функциональные изменения клеток, за исключением структурных, не выяснены ни в одном из этих случаев.

Клеточный лизис, вызванный герпесвирусами, известен у пресноводных черепах, погибших с выраженным некрозом печени. При этом были обнаружены внутриядерные включения, сходные с таковыми же у птиц и млекопитающих. Электронная микроскопия (ЭМ) показала, что эти включения состояли из вирусных частиц, морфология и механизм репликации которых соответствуют критериям семейства герпесвирусов. Хотя поражение печени явилось вероятной причиной смерти, включения были обнаружены и в других тканях, в том числе – легких и почках.

У нескольких видов черепах сильный некротизирующий стоматит и фарингит также связаны с герпесвирусной инфекцией. Это проблемное заболевание у черепах рода Testudo и Agryonemys в Европейских коллекциях. Внутриядерные включения обычно обнаруживают не только в некротических очагах ротовой полости или эпителии носового синуса, но и в трахее, капиллярах гломерул и нейронах головного мозга. Смерть, по-видимому, наступает из-за кахексии вследствие длительного голодания и системных изменений, приводящих к дисфункции многих органов.

У зеленых морских черепах моложе одного года, вирусы с морфологией герпесвируса считаются причиной серо-пятнистой болезни панциря. Изменения проявляются как мелкие папулы, в дальнейшем принимая форму серых пятен с грубой поверхностью, поражающих кожу и надкостницу панциря. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, обычно видны амфофильные или базофильные внутриядерные включения. Изменения вначале носят пролиферативный характер, но после того, как клетки подвергаются гипертрофии и гиперплазии, наступает их лизис. Потеря значительных участков интегумента и нарушение барьерных функций эпителия, по-видимому, вызывает сильные электролитные нарушения. Впрочем, данные биохимии и электролитов крови у инфицированных черепах пока не были получены. Смертность при этой эпизоотии, возможно, связана с генерализованной иммуносупрессией и вторичным бактериальным заражением.

Болезнь, характеризующаяся пневмонией, трахеитом, конъюнктивитом описана у зеленых черепах, старше одного года. Гистологически эпителий трахеи и легких содержит амфофильные внутриядерные включения, с некрозом эпителия трахеи и пролиферацией бронхиального эпителия. Некротический клеточный материал может аккумулироваться в трахее, вызывая ее обструкцию. Герпесвирусы были выделены из тканей больных черепах и обнаружены на срезах под ЭМ.

У черепах описано очень мало опухолей, за исключением фибропапилломатоза, обычного у диких зеленых морских черепах. Кожные изменения выражаются от минимальной до умеренной пролиферации эпидермиса и от умеренной до сильной пролиферации фибробластов в дерме. Также могут присутствовать внутренние опухоли, состоящие из фибробластов. У некоторых черепах отмечается почти полная метаплазия паренхимы почек с пролиферацией фибробластов и с исходом в почечную недостаточность. Герпесвирусные включения обнаружили в фибропапилломах у диких черепах. Инокуляция здоровым черепахам размороженного экстракта опухоли, очищенной от клеток вызвала развитие типичной фибропапилломы. Хотя вирус был обнаружен в опухоли, он не был изолирован, и до сих пор не доказано его прямое этиологическое значение при образовании опухоли. Эксперимент лишь доказывает, что фибропапилломатоз является заразным заболеванием, вызываемым субклеточным агентом, возможно, вирусом. (Herbst, Jacobson, 1995).

О герпесвирусной инфекции сообщалось у обыкновенного удава с некрозом печени, подобно такому же у пресноводных черепах. У зеленых ящериц папилломатоз также связывают с герпесвирусом и, по-видимому, с паповавирусами. Эта болезнь носит преимущественно пролиферативный характер, и изменения могут захватывать до 50% поверхности тела. Болеют зеленые ящерицы, Lacerta viridis и, возможно, некоторые близкие виды, хотя сам я наблюдал папилломатоз исключительно у L.viridis. Папилломы локализуются в области крестца, основания хвоста и «загривка», в основном у самок. Болезнь связывают с травмированием кожи самок во время спариваний.

У клинически здоровых зеленых игуан герпес-подобные вирусные частицы выделяли из печени, селезенки, почек, сердца и легких (Clark, Karson, 1972). В культуре клеток игуаны наблюдали цитотоксический эффект при инокуляции материала взятого из этих органов и содержавшего эозинофильные внутриядерные включения. Инкубацию проводили при 30-36°С. Несмотря на то, что цитотоксический эффект был получен in vitro, воспроизвести его на живых животных так и не удалось. В последнее время у зеленой игуаны и чакваллы Sauromalus varius, погибших от гепатита, в гепатоцитах обнаружили внутриядерные включения. Исследования с помощью ТЭМ показало наличие вирусных частиц, по морфологии напоминающих герпесвирус. Парафиновые срезы исследовали с помощью ПЦР, праймеры для которой выделили из герпесвирусной ДНК-зависимой ДНК-полимеразы. Нуклеотидные последовательности в продуктах ПЦР оказались уникальными для ящериц и были классифицированы как вирусы из подсемейства Alphaherpesvirinae (Wellehan, Jarchow, et al, 2003). Они получили название IH-1 и 2 соответственно (Iguanid Herpesvirus 1, 2). Во время моих исследований на индонезийской ферме, занимавшейся разведением хамелеонов, я в нескольких случаях обнаружил характерные внутриядерные включения в препаратах печени павших животных. В местной лаборатории в Богоре согласились, что включения напоминают герпесвирусы. К сожалению, верифицировать эти случаи я не смог ни в Индонезии, ни пока в Москве.

С герпесвирусной этиологией ассоциируют также некоторые случаи стоматитов у ящериц. Так, характерные включения наблюдали в эпителиальных клетках из очагов стоматита у 2 геррозавров и смарагдового варана. В этих случаях также с помощью ПЦР удалось выделить и провести филогенетический анализ последовательностей вирусной ДНК (Wellehan, Johnson, et al, 2003). Анализ показал, что вирусы также относятся к подсемейству Alphaherpesvirinae и являются уникальными у всех исследованных ящериц. Вирусы получили номенклатурные названия GH-1-3 (Gerrosaurid Herpesvirus 1-3) и VH-1 (Varanid Herpesvirus 1).

Некоторые формы лимфоидных лейкозов у игуан и других ящериц связывают с герпесвирусной этиологией (Frye, 1995). Хотя в этих случаях вирус не был выделен, неоплазия в колониях ящериц иногда принимает характер эпизоотической вспышки, что подразумевает инфекционную этиологию опухолевого процесса (Guimesi, Garner, et al, 2003).