Распределительная хроматография

Распределительная хроматография (РХ) основана на разнице в коэффициентах распределения разделяемых соединений (рис. 32). Коэффициенты распределения в свою очередь коррелируют с общей полярностью молекулы. Метод предназначен для разделения средне и сильнополярных веществ, в том числе и заряженных. Хорошо пригоден для разделения амфифильных соединений, таких как липиды.

В колоночной распределительной хроматографии низкого давления в качестве неподвижной фазы также применяют силикагель. При этом часто используют тройные системы, состоящие из неполярного компонента, воды и промежуточного растворителя, смешивающегося и с водой и с гидрофобным растворителем. Две наиболее часто используемых системы – это хлороформ-метанол-вода (ХМВ) и гексан-изопропанол-вода. При пропускании такого рода систем через силикагельную колонку на поверхности сорбента динамически создается слой неподвижной жидкой фазы, обогащенный водой (см. рис. 32), таким образом, мы имеем нормально-фазовую распределительную хроматографию.

Распределительная хроматография на силикагеле, аналогично адсорбционной, является плохо воспроизводимым методом и, как правило, используется для препаративных разделений на открытых колонках. При использовании вместо силикагеля модифицированных полярных фаз (см. выше) можно избежать этого эффекта.

Распределение аналитов происходит в растворе, поэтому распределительная хроматография отличается высокой нагрузочной способностью, примерно на порядок выше чем адсорбционная.

Рисунок 32. Механизм нормально-фазовой распределительной хроматографии.

Таблица 2. Особенности нормально-фазовой распределительной хроматографии.