Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Цель работы: ознакомится с методикой определения количества гемоглобина в крови у человека.
Определение гемоглобина в крови производится колориметрическим способом. Этот способ основан на сравнении окраски водного раствора исследуемой крови с определенным раствором химически чистого гемоглобина или с каким-либо другим красящим веществом, окраска которого соответствует определенной концентрации гемоглобина. Для определения количества гемоглобина имеются специальные приборы гемометры. Чаще используется гемометр Сали.
Гемометр Сали состоит из трех пробирок одинакового диаметра, помещенных в штативе, задняя стенка которого сделана из стекла молочного цвета. Одна из пробирок (средняя) пустая, градуированная, предназначена для исследуемой крови. Две другие (боковые) запаяны и наполнены стандартным раствором солянокислого гематина, имеющего коричневую окраску, интенсивность которой соответствует 16,7% содержания гемоглобина по отношению к высшему пределу нормы, что принимается за 100%. К гемометру приложена капиллярная пипетка емкостью (до метки) в 20 мм3.
Оборудование: гемометр Сали; пипетка для взятия воды и соляной кислоты; игла скарификатор; 0,1% раствор соляной кислоты; спирт; эфир; вата; йод; дистиллированная вода.
Ход исследования. Определение количества гемоглобина производится следующим образом. В градуированную пробирку наливают децинормальный раствор соляной кислоты до метки 10. Делают укол пальца скарификатором. К выступившей (второй) капле крови подводят отверстие капиллярной пипетки, которая вследствие капиллярности наполняется кровью. Кровь набирают до метки (20 мм3) и выдувают ее на дно пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты остался прозрачным. После этого жидкость тщательно перемешивают стеклянной палочкой и оставляют в штативе на 5 мин. За это время полностью произойдет превращение гемоглобина в солянокислый гематин и жидкость примет бурый цвет.
Далее, пипеткой, приложенной к гемометру, прибавляют в пробирку с исследуемой кровью дистиллированную воду до тех пор, пока цвет ее раствора не будет одинаков с цветом жидкости стандартных пробирок. Теперь процент гематина, а, следовательно, и гемоглобина, будет одинаков и в стандартном растворе, и в исследуемой крови. Цифра, стоящая на уровне полученной жидкости, показывает процентное содержание гемоглобина в исследуемой крови по сравнению со стандартной или сразу абсолютное количество гемоглобина в граммах в 100 г крови.
Если гемометр показывает процентное содержание гемоглобина, то можно вычислить и абсолютное содержание гемоглобина в крови. Метка 100% по шкале градуированной пробирки в приборе Сали соответствует 16,7 г гемоглобина. Отсюда абсолютное содержание гемоглобина в исследуемой крови - (Х) может быть вычислено, исходя из пропорции:
100% - 16,7 г
А% - Х тогда Х=А х 16,7 / 100;
где А — найденный процент по прибору Сали. В норме абсолютное содержание гемоглобина составляет у мужчин 13,3 — 15,6%, у женщин 12,1—13,8%, что составляет по прибору Сали от 70 до 90%.
Дата публикования: 2015-01-04; Прочитано: 345 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!