Лекция № 12. Тема: “Серологическая диагностика сифилиса

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Диагностика:

1. Под микроскопом(в темном поле)

2. Серологическая

Приказ 11.61 от 2 сентября 1985 года

Чуствительность теста = количество лиц с данным заболеванием / с положительными результатами,

Специфичность теста = без данного заболевания / с отрицательными реакциями

группа. Отборочные реакции не дают право поставить диагноз. Реакции микропреципитации передложил Овчиников - осадочная реакция с плазмой. Плазма + кардиолипиновые АГ Þ преципитат. Исследуются все больные соматического стационара, работники пищеблока, работники дошкольных учреждений, группы риска.

Аналог ВДРЛ, РПР (быстрые плазменные реагены)

3. Диагностические реакции:

a) КСР (комплексные серологические реакции)

i) РСК (в термостате и на холоде)

ii) МОР с инактивированной сывороткой

b) реакция Кана

КСР используется для

i) диагностики всех форм сифилиса

ii) контроля эффективности лечения

iii) обследования половых контактов

iv) обследование больных психиатрических и неврологических стационаров

v) все доноры

vi) беременные, и направляющиеся на аборт

РСК (Вассермана). (Предложили Борде и Жангу). В 1906 году Вассерман, Нессер и Брук применили для диагностики сифилиса реакцию основанную на феномене бактериолиза и гемолиза. Исследовалась сыворотка + печень плода больного сифилисом.

В чистом виде Вассерман не используется ее модифицировал в 1951 году Пэнгборн, разработав кардиолипиновый антиген

компоненты:

a) исследуемая сыворотка (5-6 мл взятые на тощак)

b) АГ

(1) КАГ

(2) ультраозвученный трепонематозный АГ (УТАГ)

c) комплемент морской свинки (в человеческой крови мало комплемента и он быстро инактивируется)

d) гемолитическая сыворотка кролика (иммунизированного эритроцитами барана, содержащая гемолизин)

e) эритроциты барана

исследуемая + сыворотка	КАГ + УТАГ	комплемент +	гемолитическая + сыворотка	эритроциты барана
Интерпритация данных	нет гемолиза 4+ - резко ”+” 3+ - положительный 2+ - слабо “+” 1+ - сомнительно (при этом комплемент связывает гемолизин и происходит задержка гемолиза)	есть гемолиз (лаковая кровь) результат отрицательный

В 1909 году Боас предложил количественную модификацию реакции, при этом сыворотка разбавлялась.

Титр - max разведение сыворотки при которой наблюдается полная (4+) задержка гемолиза (1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320,).

Реакция Кана - ускоренная осадочная реакция с АГ Кана

3. Специфические реакции.

+ результаты диагностических реакций при отсутствии клиники

a) РИТ реакция иммобилизации трепонем(TPI). Предложили в 1949 году Нельсон, Майер. Оснрована на том,что патогеннные тканевые трепонемы в присутствии комплемента теряют подвижность.

исследуемая сыворотка + взвесь патологической ткани взятой у кролика больного сифилитическим орхитом + комплемент

интерпритация результатов по % обездвиженных трепонем

51- 100 % “+”

31-50 % слабо “+”

21-30 % сомнительный

0-20 % “-”

b) РИФ- реакция иммунофлоресценции

Исследуемая сыворотка + взвесь убитых патогенных трепонем (АГ) = иммунный комплекс (ИК)

антивидовая сыворотка (антитела к IgM и IgG) меченная флуорисцином (ФИТЦ) = АТ.

ИК + АТ = Образуется новый иммунный комплекс, который дает свечение в люминисцентном микроскопе (оценка по 4+, 3+, 2+, 1+).

Разновидности РИФ:

i) РИФабс сыворотка разводится в 5 раз становится положительной на 3-5 день после появления шанкра.

ii) РИФ200 сыворотка разводится в 200 раз (более специфична).

iii) РИФц - цельная спинномозговая жидкость.

РИФабс является стандартом при первичном сифилисе специфичность достигает 70-100 %

c) РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

1932 год Блюменталь, 1965 год Ратпев.

i) АГ насаживают на носитель (эритроциты барана предварительно обработанные танином или формалином)

ii) АГ - смесь бледной трепонемы

iii) исследуемая сыворотка

не используется для критериев излеченности, но производится у доноров.

i) + ii) = (если есть АТ) аглютинация эритроцитов и осаждение их в виде зонтиков

d) ИФА (иммуноферментный анализ) принцип такой же как и при РПГА

Используемые компоненты: УТАГ, исследуемая сыворотка, антивидовая сыворотка(фАТ к IgM[показателям свежего процесса] и IgG) меченая ферментом, специфический субстрат (S).

УТАГ + исследуемая сыворотка = новый иммунный комплекс (ИК)

(ИК + фАТ) + S = окрашивание

Серорезистентность.

Если в течение года после окончания лечения позитивность и титры не уменьшаются, то назначается дополнительное лечение. Если в течении года наблюдается замедленная серонегативация, то это говорит о некачественном лечении. Неспецифические реакции ложноположительные т. к. бледные трепонемы расщепляют ткани больных с образованием липидных фракций.

При острых заболеваниях (до 6 месяцев) при беременности, инфаркте миокарда, гриппе, аденовирусной инфекции, малерии.

При хронических заболеваниях: лепра, коллагенозы, ревматизм, злокачественные новообразования, злокачественная гипертония, атеросклероз.

Неспецифичные реакции: при беременности до 16 %,при менструации, состоянии до и после родов, у людей старше 60 лет, наркоманов, алкоголиков.

О неспецифичности свидетельствует:

· чаще слабоположительные (2-3 +), низкие титры 1:5, 1: 10.

· Изолированноположительные (в одном тесте +, в других -)

· Колебание результатов при повторе (то +, то -)

· Возраст старше 60 лет.

· Соматическая отягощенность, наркомания.

· Отсутствие порочащих связей.

Лечение.

Раньше использовались препараты висмута, ртути, мышьяка.

Препараты висмута используются с 1820 года. Бийохинол, бистоверол по 1,5 мл 2 раза в неделю (до 20 мл) Þ 1 мл - 0,05 г до 10 г на курс.

Осложнения:

1. Висмутовая койма по зубному концу десен.

2. Жировая эмболия.

3. Стоматиты, гингивиты.

4. Нефропатия (висмут в моче)

5. Анемии, астении.

Rp: Kalii jodidi 100

Aqua destilatae 150 ml

S. По 1 столовой ложке 3 раза в день после еды, запив молоком (3 г).

Таким образом за 20 дней - 60 грамм.

Побочные эффекты:

1. Конъюнктивит.

2. Насморк - ринит.

3. Отек языка, гортани.

4. Расстройство желудочно-кишечного тракта.

5. Йодистые угри.

Антибиотикотерапия.

· Превентивное лечение.

· Специфическое лечение.

Профилактическое (если мать болела во время беременности). Если за 1 год до беременности получены отрицательные результаты реакций, то профилактического лечения не проводят.

Если во время беременности получены положительные результаты реакций,то проводят специфическое лечение матери и профилактическое лечение плода. Если женщина заболела на поздних сроках беременности проводят специфическое и профилактическое лечение. В качестве профилактики через 6-7 мес. Калиевая и натриевая соль бензилпенициллина через 3 часа. Новокаиновая соль 3 раза в сутки. Пенициллин 1 раз по 1,2 млн.; 3 раза по 1,8 млн.; 5 раз по 1,5 млн. В 0,25 % новокаина 2 раза в неделю.