Лекарственные вещества. Общие методы изолирования

ЛВ (официально ЛП и наркотические средства)

1) Кислотного характера (производные барбитуровой кислоты, салициловой кислоты, некоторые снотворные).

2) Вещества нейтрального или слабокислого характера (производные п-аминофенола, СГ).

3) Вещества слабоосновного и основного характера (алкалоиды, синтетические производные ПАБК, новокаин).

Стадии изолирования:

1. Настаивание биоматериала с полярными растворителями.

Факторы, влияющие на эффективность:

а) Характер биоматериала (паренхимный орган, кости). Свежесть биоматерила. Для высокой степени и. применяют измельчение: ручное (ножницы), мельницы, гомогенизаторы, лиофильная сушка или замораживание.

б) Способ настаивания. Температура, перемешивание (режим), повышенное осмотическое давление (высаливание), применение приборов.

в) Физико-химические свойства растворителя. Общие методы – этанол 96° или вода. Разрабатываются новые методы (ацетон, ацетонитрил). Растворитель должен проникать в биоматериал, растворять ТВ и комплексы ТВ с белками (либо осаждать белки).

г) Физико-химические свойства ТВ. Гидро-/липофильность, способность образовывать комплексы с белками, прочность комплексов. Степень растворимости ТВ в растворителе.

д) рН растворителя. Создается рН=2-3, т.к. ТВ с биоматериале образует комплекс с белками за счет ионных и водородных связей, карбоксильных и аминогрупп белковых молекул. При значении рН=2-3 белок становится электронейтральным (ЧЭТ белка), связи разрушаются, ТВ высвобождается, белок остается в биоматериале или выпадает в осадок.

2. Очистка извлечения.

Очищают от пептидов, полипептидов, жиров, пигментов и т.д.

Эти вещества мешают дальнейшему исследованию.

а) Механические методы: фильтрование, процеживание, центрифугирование.

б) Физико-химические методы. Осаждение белковым молекул при температуре (40-50°С), осаждение 96° этанолом, действие высаливающих агентов (дегидратация белка понижает его растворимость), диализ, электродиализ, экстракция, реэкстракция.

3. Жидкость-жидкость экстракция. Различные неполярные (органические) растворители в зависимости от природы ТВ: хлороформ, диэтиловый эфир.

Факторы, влияющие на эффективность жидкость-жидкость экстракции:

а) Природа ТВ и растворителя. Подобное растворяется в подобном. Степень экстракции R рассчитывается по формуле:

, , где

Ро – константа распределения ТВ между органической и водной фазами.

Vв – объем водной фазы

Vo – объем органической фазы.

б) Значение рН водной фазы. Органические растворители хорошо экстрагируют недиссоциированные молекулы, поэтому при кислых значениях рН водной фазы в органический растворитель будут переходить вещества кислотного характера, а при щелочном значении рН – основного.

Оптимальные значения рН

Для веществ основного характера: рН = рКа + 2

Для веществ кислого характера: рН = рКа – 2

в) Температура. При изменении температуры может меняться растворимость в воде и органическом растворителе.

г) Наличие в водной фазе электролитов. Они повышают осмотическое давление, экстрагируемое вещество хуже растворяется.

д) Объем водной и органической фаз. Отношение объемов водной и органической фаз называется кратностью экстракции.