Получение опытного материала, выделение и инкубирование образцов

Для инкубации брали изолированные образцы печени и мышц. После взвешивания (на электронных весах) либо сразу экстрагировали липиды (0ч, исходные значения), либо навески тканей помещались в 1 мл среды для инкубации в открытую пробирку. В качестве кислородной среды использовался физиологический раствор, насыщенный О₂, в качестве бескислородной среды физиологический раствор, предварительно прокипяченный с последующим остужением до комнатной температуры в стекле под полиэтиленовой крышкой, без доступа воздуха). Образцы тканей инкубировались в течение 1 ч и 24 ч при комнатной температуре. Один образец ткани анализировался через 1 ч и 24 ч экспозиции без изоляции, in situ.

Выбор указанных сроков был обусловлен следующими причинами:

а) 0 мин – приближенное к исходному на момент смерти состоянию тканей;

б) 1 ч - срок, недостаточный для насыщения среды инкубации диффузией из атмосферы; возможно переживание ткани в течение этого времени и сохранение некоторых функциональных свойств;

в) 24 ч – развитие глубоких деструктивных процессов в тканях, срок, достаточный для насыщения кислородом среды инкубации.

После инкубации в тканевых образцах определяли содержание общих липидов и отдельных липидных фракций.