Робота 5. Стерилізація бульб, коренеплодів і кореневищ

Для отримання експлантатів використовують здорові бульби, коренеплоди або кореневища.

Мета роботи: оволодіти методикою стерилізації обпалюванням бульб, коренеплодів і кореневищ, отримати первинний калюс.

Матеріали і обладнання: бульби картоплі, мильний розчин, чашки Петрі з калюсним середовищем №1 (табл.8), пінцети, скальпелі, пробкові свердла, спирт, спиртівка, ламінар-бокс, парафілм.

ХІД РОБОТИ

1. Бульби вимити проточною водою.

2. Обчистити бульби від шкірки.

3. Бульби вимити у мильному розчині, а потім ополоснути дистилятом.

4. У боксі бульбу на кілька секунд занурити у спирт, дати йому стекти і обпалити бульбу у полум’ї спиртівки.

5. Покласти обпалену бульбу у стерильну чашку Петрі.

6. Притримуючи картоплину стерильним пінцетом, скальпелем відрізати частину бульби.

7. Стерильним пробковим свердлом вичленити циліндр з бульби.

8. Циліндр тканини порізати скальпелем на диски, які помістити на середовище для калюсогенезу. Два крайні диски відкинути.

9. Чашки Петрі підписати і закрити парафілмом.

10. Чашки з експлантатами культивувати у термостаті без освітлення при 25⁰ + 1⁰С.

Як рослинний матеріал в даній роботі можна використати бульби топінамбура, коренеплоди моркви, кореневища женьшеню.