Классификация патогенных эшерихий

Возбудители диареи	Серогруппы	Заболевания	Механизм патогенного действия
ЭПКП, ЕРЕС (энтеро- патогенные эшерихии)	Более 20 серогрупп: О18, О20, О25, О26, О33, О44, О55, O75, О86, О91, О111, О114, О119, О125, О126, О127, О128, О142, О146, О159 и др.	Колиэнтериты у детей 1-го года жизни	Адгезивность, размножение на поверхности энтероцитов, инвазивность, цитотоксическое действие
ЭИКП, EIEC (энтеро- инвазивные эшерихии)	серологических групп: О28, О32, О112, О124, О129, О135, О136, О143,О144, О15а, О164, О151, О301 и др.	Дизентериеподобные эшерихиозы у детей и взрослых	Адгезивность, разрушение микроворсинок, инвазивность, размножение в цитоплазме энтероцитов, продукция энтеротоксинов, заражение соседних энтероцитов, разрушение эпителия, воспаление
ЭТКП, ЕТЕС (энтеро- токсигенные эшерихии)	О6, О8, О154, О148, О149 и др.	Холероподобные эшерихиозы у детей и взрослых (диарейные заболевания с обезвоживанием организма)	Адгезивность, размножение на поверхности энтероцитов, продукция энтеротоксина (холерогена), который активирует аденилатциклазу, что ведет к увеличению ц-АМФ и соответственно к гиперсекреции солей, выходу из клеток воды и развитию диареи
ЭГКП, ЕНЕС (энтеро- геморрагические эшерихии)	О26, О111, О145, О157	Кратковременный водянистый стул, быстро сменяющийся гемодиареей (кровавый понос), болеют дети и взрослые	Продуцируют шигаподобные токсины, которые разрушают клетки эндотелия капилляров толстого кишечника (развитие кровотечения)

ШИГЕЛЛЫ

Бактериальная дизентерия (шигеллез) — кишечная антропонозная инфекция, вызываемая бактериями рода шигелла, протекающая с преимущественным поражением слизистой оболочки толстого кишечника, частым жидким стулом с примесью слизи и крови, общей интоксикацией.

Таксономия

Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Enterobacteriaceae;

Род: Schigella; Виды: S. dysenteriae; S. flexneri; S. boydii; S. sonnei.

Морфология и тинкториальные свойства (особенности)

Короткие, относительно толстые, с закругленными концами палочки.

Атрихи.

Биологические свойства

Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы, не требовательны к питательным средам и условиям культивирования.

Дифференциально-диагностические среды Плоскирева, Левина, Эндо. Не разлагающие лактозу шигеллы дают рост неокрашенных колоний. Элективно-дифференциальной для шигелл является среда Плоскирева. Содержит соли желчных кислот, угнетающих рост эшерихий. Среда накопления чистой культуры — агар Клиглера. Ферментирующие глюкозу и не ферментирующие лактозу шигеллы изменяют цвет среды только в столбике. Нет газообразования. Ферментативная активность

1. Шигеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа.

2. Все шигеллы лактозонегативны, за исключением S. sonnei,
ферментирующей лактозу через 24-48 часов.

3. Все шигеллы не образуют H₂S, не обладают уреазной активностью.

Антигены

Выделяют общие для семейства Enterobacteriaceae, родовые, видовые, групповые и типоспецифические О-антигены, а также К-антигены. Н-антигенов у них нет.

Факторы патогенности

1. Адгезия и колонизация слизистых оболочек желудочно-кишечного
тракта. Функцию адгезинов выполняют пили, белки наружной мембраны и

ЛПС.

2. Факторы инвазии. Обеспечивают проникновение шигелл в энтероциты и размножение в них с одновременным проявлением цитотоксического действия.

3. Эндотоксин. Обладает энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием.

4. Экзотоксин Шига — нейротоксин, цитотоксические свойства которого наиболее сильно выражены у S. dysenteriae.

5. Шигоподобные токсины (SLT-I, SLT-II). Синтез кодируется
плазмидными генами. Взаимодействуют с аденилатциклазной системой,
обладают диареегенным действием.

Эпидемиология, патогенез и клиника заболевания (особенности)

Источник инфекции — больной человек, носитель. Механизм передачи — фекально-оральный.

Патогенез (особенности): фекально-оральный путь поступления микроба в организм -> адгезия, инвазия, внутриклеточное размножение в эпителиоцитах -> разрушение клеток -> выход шигелл в просвет кишечника повторение цикла развитие клинической картины заболевания.

Клиника заболевания определяется видом возбудителя. При шигеллезе Зонне преобладают симптомы гастроэнтерита; шигеллезе Флекснера — колитический синдром; шигеллезе Григорьева-Шиги — колит с нейротоксикозом (тяжелая форма инфекции). Лабораторная диагностика

1. Бактериологический метод (основной).

Фекалии -> посев на среды Плоскирева, Левина, Эндо постановка РА на стекле бесцветных колоний со смесью шигеллезных сывороток -> откол агглютинабельных колоний на среду Олькеницкого (изменение цвета среды в столбике) -> определение серогруппы (серовара) в РА с группо- и типоспецифическими шигеллезными сыворотками на стекле и при положительном результате в пробирках -> проба на подвижность (-) -> определение биохимической активности -> антибиотикограмма циногенотипирование.

2. Серологический метод. Со второй недели заболевания постановка РА,
РНГА с сывороткой больного — определение титра антител или динамики
нарастания титра антител при повторной постановке реакций.

3. Экспресс-диагностика. Для выявления шигеллезных антигенов в
исследуемом материале могут быть использованы РИФ, ИФА.

САЛЬМОНЕЛЛЫ

Сальмонеллез — острая кишечная инфекция, вызываемая различными серотипами бактерий рода Salmonella, характеризуется разнообразными клиническими проявлениями от бессимптомного носительства до тяжелых септических форм. В большинстве случаев протекает с поражением органов пищеварительного тракта (гастроэнтериты, колиты). Возможны генерализованные формы инфекции.

Брюшной тиф — тяжелое острое инфекционное заболевание, характеризующееся глубокой общей интоксикацией, бактериемией, увеличением печени и селезенки, энтеритом и специфическим поражением лимфатического аппарата тонкого кишечника.

В Беларуси сальмонеллезы занимают первое место в структуре острых кишечных инфекций бактериальной этиологии.

Таксономия

Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Enterobacteriaceae; Род: Salmonella.

Род Salmonella включает два вида:

1. S. enterica, в пределах которого выделяют шесть подвидов:
1). S. enterica подвид enterica;

2). S. enterica подвид salamae; 3). S. enterica подвид arizonae; 4). S. enterica подвид diarizonae; 5). S. enterica подвид houtenae; 6). S. enterica подвид indica;

2. S. bongori.

Морфология и тинкториальные свойства — особенности. Перитрихи, обладают активной подвижностью.

Биологические свойства

Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы, не требовательны к питательным средам и условиям культивирования. Используются следующие типы питательных сред:

1. Простые — МПБ, МПА. Рост на МПБ в виде помутнения, на МПА образуются нежные круглые, гладкие, полупрозрачные колонии диаметром 2-4 мм (S-тип). В случае диссоциации на плотных средах вырастают колонии R-типа.

2. Среды обогащения: селенитовый бульон, среда Мюллера.

3. Дифференциально-диагностические среды — Левина, Эндо, висмут-сульфитный агар. Не разлагающие лактозу сальмонеллы на средах Левина, Эндо дают рост неокрашенных колоний. На висмут-сульфитном агаре — серо-черные колонии.

4. Среды накопления чистой культуры — агар Клиглера. Не
ферментирующие лактозу сальмонеллы изменяют цвет среды только в
столбике и дают почернение среды (H₂S+).

Ферментативная активность

Обладают меньшей ферментативной активностью по сравнению с E. coli. Не ферментируют лактозу и сахарозу. Ферментируют глюкозу, мальтозу, маннит с образованием кислоты и газа (КГ). Образуют сероводород, индолнегативны. Антигены. Классификация.

Имеют О- (соматический), Н- (жгутиковый) и К- (капсульный) антигены. На основании иммунореактивности O- антигена и H- антигена выделены серотипы сальмонелл.

Серологическая классификация сальмонелл по антигенным формулам приведена в схеме Кауффмана-Уайта.

По О-антигенам проводится разделение сальмонелл на серогруппы, по Н-антигенам — на серотипы.

В настоящее время описано более 2500 серотипов сальмонелл.

У S. Typhi помимо О- и Н-антигенов имеет еще один поверхностный

антиген, который они назвали антигеном вирулентности (Vi-антигеном).

Факторы патогенности сальмонелл:

1 факторы адгезии и колонизации;

2. факторы инвазии;

3. эндотоксин;

4. термолабильные и термостабильные энтеротоксины типов LT, ST и шигоподобный цитотоксин.

Экзотоксины выделяются лишь после разрушения бактериальных клеток. Заболевания, вызываемые сальмонеллами — брюшной тиф и сальмонеллезы.

Возбудитель брюшного тифа — S.Typhi, паратифов — S.Paratyphi A, S.Paratyphi B и S.Paratyphi C.

Брюшной тиф

Эпидемиология

Брюшной тиф относится к кишечным антропонозам. Единственным источником и резервуаром инфекции является человек. Источником инфекции чаще всего являются хронические бактерионосители возбудителя брюшного тифа, которые, оставаясь практически здоровыми, выделяют сальмонеллы в течение продолжительного времени (годы и даже десятки лет). Заражение людей происходит при употреблении инфицированной воды или пищи. Контактно-бытовой путь передачи S. Typhi наблюдается редко. Патогенез

В развитии болезни выявляются следующие стадии:

1) инкубационный период. Возбудитель через рот проникает в тонкий кишечник; через лимфатические пути сальмонеллы проникают в лимфоидные образования подслизистой оболочки тонкого кишечника (пейеровы бляшки и солитарные фолликулы), размножаются в них, вызывая воспаление;

2) бактериемия (1-я неделя) — выход возбудителя в большом количестве в кровь. Часть бактерий распадается под действием бактерицидных свойств крови, высвобождается эндотоксин (ЛПС), развивается интоксикация;

3) стадия паренхиматозной диффузии (2-я неделя). Из крови сальмонеллы поглощаются макрофагами костного мозга, селезенки, лимфатических узлов, печени и других органов. В большом количестве возбудитель брюшного тифа накапливается в желчных ходах печени и в желчном пузыре;

4) выделительно-аллергическая стадия (3-я неделя). По мере формирования иммунитета начинается процесс освобождения от возбудителя. Этот процесс осуществляют все железы: слюнные, кишечника, потовые, молочные (во время кормления ребенка), мочевыделительная система и особенно активно — печень и желчный пузырь. Выделяющиеся из желчного пузыря сальмонеллы опять поступают в тонкий кишечник, откуда часть их выделяется с испражнениями, а часть вторгается вновь в лимфатические узлы. Вторичное внедрение в уже сенсибилизированные узлы вызывает в них гиперергическую реакцию, которая проявляется в виде некроза и образования язв. Эта стадия опасна возможностью прободения стенки кишечника (язв), внутреннего кровотечения и развития перитонита;

5) стадия реконвалесценции (выздоровления) — (4-я неделя).

Клиника

Инкубационный период 12-14 дней. Заболевание начинается на стадии бактериемии. Характеризуется бредом, помрачением сознания, розеолезной сыпью. Тяжелыми осложнениями заболевания являются перитонит, кишечные кровотечения в результате некроза лимфатических образований тонкой кишки.

У людей, перенесших брюшной тиф, формируется напряженный, пожизненный иммунитет. Повторные заболевания наблюдаются редко. Методы диагностики — бактериологический и серологический.

Выделение гемокультуры

1. Посев крови на среду Раппопорт (в соотношении 1:10).

2. Высев со среды Раппопорт на среду Эндо.

3. Откол лактозонегативных колоний со среды Эндо на трехсахарный агар.

4. Учет биохимических свойств на трехсахарном агаре.

5. Серотипирование выделенной культуры в реакции агглютинации на стекле с поливалентными и монорецепторными О- и Н-сальмонеллезными сыворотками.

6. Биохимическая идентификация, определение антибиотикорезистентности.

Выделение копрокультуры (уринокультуры, биликультуры)

1. Посев на среду обогащения (Мюллера, селенитовый бульон).

2. Высев со среды обогащения на среды Эндо, Левина, висмут-сульфитный агар.

3. Реакция агглютинации на стекле лактозонегативных колоний с
сальмонеллезными агглютинирующими сыворотками.

Дальнейший ход исследования см. «Выделение гемокультуры».

Серодиагностика тифо-паратифозных заболеваний. Используются следующие реакции:

1. Реакция Видаля — реакция агглютинации (антитела появляются в конце
первой недели от начала заболевания). Реакция ставится с четырьмя
диагностикумами: О-брюшнотифозный монодиагностикум, Н-
брюшнотифозный монодиагностикум, ОН-паратифозный А диагностикум,
ОН-паратифозный В диагностикум. Диагностический титр реакции равен

1:200.

2. Реакция непрямой Vi-гемагглютинации для выявления Vi-антител в
сыворотке крови реконвалесцентов и бактерионосителей. Антиген —
эритроцитарный Vi-диагностикум (взвесь эритроцитов, обработанных
формалином и сенсибилизированных Vi-антигеном). Положительный
результат — эритроциты оседают в виде диска с неровными краями,
отрицательный — в виде "пуговки" с ровными краями.
Специфическая профилактика — вакцинация химической сорбированной
брюшнотифозной моновакциной.

Сальмонеллезы

Эпидемиология

Первичным источником сальмонелл являются животные: крупный рогатый скот, свиньи, водоплавающие птицы, куры, синантропные грызуны и большое число других животных. Дополнительным источником может быть человек (больной, носитель).

При внутрибольничном сальмонеллезе человек является основным источником инфекции.

Механизм передачи — фекально-оральный, контактно-бытовой (при внутрибольничном сальмонеллезе).

Современная эпидемиология сальмонеллезов характеризуется ростом заболеваемости людей и животных и преобладанием в этиологической структуре нескольких доминирующих серотипов (S.Enteritidis и S.Typhimurium), на долю которых приходится до 90% случаев заболеваний сальмонеллезами. Среди возбудителей преобладают штаммы с множественной устойчивостью к антибиотикам. Стадии патогенеза:

• попадание сальмонелл в ЖКТ с пищей;

• размножение и гибель;

• выделение факторов патогенности (эндотоксин, LT, ST энтеротоксины, цитотоксин);

• нарушение водно-солевого обмена;

• интоксикация (гастроинтестинальная форма).

• При нарушении барьерной функции лимфоидного аппарата кишечника развивается бактериемия с поражением внутренних органов

(генерализованная форма инфекции).

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, остатки пищевых продуктов. I. Бактериологический метод. Этапы метода:

1. Посев на среду обогащения (Мюллера, селенитовый бульон);

2. Высев со среды обогащения на среды Эндо, Левина, висмут-сульфитный агар;

3. Откол лактозонегативных колоний на трехсахарный агар;

4. Контроль чистоты выделенной культуры;

5. Учет биохимических свойств на трехсахарном агаре: глюкоза (КГ);
маннит (КГ), мальтоза (КГ); лактоза и сахароза — нет ферментации; H₂S+,
индол-.

6. Серотипирование выделенной культуры в РА на стекле с
поливалентными и монорецепторными О- и Н-сальмонеллезными
сыворотками.

7. Биохимическая идентификация.
Определение антибиотикорезистентности.
II. Серологический метод.

Со второй недели заболевания постановка РА, РНГА — определение титра антител или динамики нарастания титра антител при повторной постановке реакций.

Иммунитет

Постинфекционный иммунитет типоспецифический. Заболевание, вызванное одним сероваром сальмонелл, не создает иммунитета к другим. Возможно формирование микробоносительства.

Профилактика заболевания — неспецифическая (проведение комплекса ветеринарно-санитарных, медико-санитарных и противоэпидемических мероприятий).

Лечение

1. Восполнение потерь жидкости и электролитов.

2. Антибактериальные препараты применяют для лечения только
генерализованных форм инфекции.

ИЕРСИНИИ

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, род Yersinia

В настоящее время род Yersinia включает 10 видов.

Виды, имеющие медицинское значение: Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Y. pestis

Биологические свойства иерсиний отличаются от свойств других энтеробактерий. Для них характерен ряд температурозависимых признаков, которые по-разному проявляются при температуре 37° С и ниже 30° С.

Морфология и культуральные свойства Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis. Грамотрицательные палочки (или коккобактерии) длиной 1-3 мкм и шириной 0, 5-0, 8 мкм без спор и капсул. При температуре ниже 30°С (во внешней среде) подвижны (за счет перитрихиально расположенных жгутиков), при 37° С (в организме человека) жгутики не образуют и неподвижны.

Иерсинии — это гетеротрофные факультативно-анаэробные микроорганизмы с психрофильными и олиготрофными свойствами. Они растут на простых питательных средах. Через 24 ч образуют на агаре прозрачные или полупрозрачные колонии диаметром 0,1-1,0 мм. Температурный оптимум роста — 28-29° С (но могут расти в широком диапазоне температур — от 0°С до 45° С); оптимум рН — 7,6-7,9, диапазон рН — 4,6-9,0.

На среде Эндо через сутки колонии имеют диаметр 0,1-0,2 мм, круглые, выпуклые, блестящие, с ровными краями, бесцветны (не ферментируют лактозу), через несколько суток размер колоний 0,5-3 мм. Благодаря психрофильности иерсинии способны расти и активно размножаться при низких температурах (в том числе от 0°С до +4° С). Иерсинии — олиготрофные микроорганизмы: для роста и размножения достаточен минимум питательных веществ. Культуральные особенности иерсиний позволяют им накапливаться в воде, пищевых продуктах, сохраняемых в условиях бытового холодильника.

Биохимические и антигенные свойства. Оксидазоотрицательные, каталазоположительные. Ферментируют глюкозу и другие углеводы до кислоты без образования (или с небольшим количеством) газа. Фенотипические характеристики проявляются у культур, инкубированных

при 25-29° С, но не при 35-37° С.

Имеют О- и К-антигены, а при температуре инкубирования ниже 30°С — Н-антиген.

Y.pseudotuberculosis по О-антигенам разделяется на 8 групп и 20 серотипов.

Y.enterocolitica по О-антигенам разделяется на 34 серотипа. От больных иерсиниозом чаще всего выделяют штаммы серотипов О:3 и О:9.

Эколого-эпидемиологические особенности иерсиний

Главным резервуаром Y. pseudotuberculosis в природе являются грызуны (мыши, крысы, зайцы, кролики) и дикие птицы. Эти микробы могут длительно сохраняться в почве и речной воде. Микроорганизмы вида Y. enterocolitica выделяют от очень многих теплокровных животных (диких, домашних, сельскохозяйственных). Главным резервуаром патогенных для человека Y. enterocolitica серотипов О3 и О9 являются свиньи. Наиболее частыми путями заражения являются пищевой и водный (употребление овощных салатов, свинины, молочных продуктов, морепродуктов, инфицированной воды). Патогенез и клинические проявления иерсиниозной инфекции Проникнув в организм алиментарным путем, возбудители иерсиниоза колонизируют эпителиоциты кишечника, и могут в дальнейшем поражать его лимфоидный аппарат. Возбудитель захватывается фагоцитами (фагоцитоз незавершенный) и с макрофагами может распространяться по организму, формируя очаги инфекции в различных органах и тканях. У возбудителя имеются перекрестнореагирующие антигены, поэтому заболевание сопровождается инфекционно-аллергическими реакциями. Размножение иерсиний в мезентериальных лимфоузлах приводит к их воспалению, симптомы которого часто ошибочно расценивают как проявление аппендицита. Диарейный синдром при иерсиниозе связывают с действием на эпителиоциты термостабильного энтеротоксина возбудителя.

Инкубационный период при иерсиниозе составляет 4-7 дней. Основными клиническими формами иерсиниоза и псевдотуберкулеза являются энтероколит, острый мезентериальный лимфаденит, часто в сочетании с терминальным илеитом («псевдоаппендицит»).

Диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза

Микробиологический диагноз основан на обнаружении возбудителей иерсиниоза или псевдотуберкулеза в клиническом материале и на выявления антител к ним в сыворотке крови.

При бактериологическом методе исследуемый материал от больного (испражнения, кишечные биоптаты, лимфоузлы или ткань удаленного аппендикса, кровь, слизь из зева), а также подозрительные продукты или воду засевают на среды Эндо, Плоскирева, Серова (индикаторную и дифференциальную) и инкубируют при 37°С в течение 48-72 ч. Подозрительные колонии (мелкие бесцветные на средах Эндо и Плоскирева и окрашенные колонии двух различных форм на средах Серова) пересевают для получения чистых культур, которые идентифицируют по биохимическим признакам и окончательно типируют с помощью диагностических агглютинирующих сывороток. Для серологической диагностики псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза используют развернутую реакцию агглютинации (по типу реакции Видаля) с соответствующими диагностикумами или РНГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом из референсштаммов возбудителей актуальных серотипов (чаще всего О3 и О9). Положительными считают реакции при титре антител 1:400 и выше. Реакции рекомендуется ставить с парными сыворотками с интервалом в несколько дней. Нарастание титра антител свидетельствует о специфичности инфекционного процесса. Эти исследования имеют небольшую ценность ввиду накопления перекрестнореагирующих антител, латентного периода иммуногенеза, индивидуальных особенностей иммунного ответа. Более информативным может быть выявление антител (IgG, IgA, IgM) к «антигенам вирулентности» иерсиний, например, в ИФА или методом иммуноблотинга.

Для обнаружения патогенных иерсиний в клиническом материале или пищевых продуктах используются методы генодиагностики (ДНК-гибридизация, полимеразная цепная реакция).

Лечение и профилактика иерсиниоза

Возбудители иерсиниоза, как правило, проявляют чувствительность к большинству антибиотиков, используемых в отношении представителей семейства Enterobacteriaceae. Профилактические мероприятия направлены на предотвращении контаминации патогенными иерсиниями пищевых продуктов, особенно подлежащих длительному хранению.

Лекция 16

Особо опасные инфекции бактериальной этиологии. Этиология, патогенез, иммунитет, профилактика холеры, чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы.

К категории особо опасных инфекций бактериальной природы относятся чума, туляремия, бруцеллез, сибирская язва, холера.

Первые пять являются зооантропонозами, холерой болеют только люди. К особо опасным они относятся потому, что их возбудители:

1) обладают высокой заразностью в малых инфицирующих дозах;

2) передаются всевозможными механизмами передачи;

3) вызывают тяжело протекающие заболевания;

4) способны вызывать эпидемии и пандемии;

5) вызывают высокий процент летальных исходов.

При работе с материалом, содержащим возбудителей ООИ, требуется соблюдение строгого режима, исследования проводятся только хорошо обученным персоналом в специальных учреждениях. Медицинский персонал одевается в полную противочумную спецодежду: комбинезон с капюшоном, халат, сапоги кожаные или резиновые, респиратор, косынка, очки-консервы, плотные резиновые перчатки, нарукавники клеенчатые, фартук клеенчатый. Взятый материал для исследования собирают в стерильные широкогорлые банки с притертыми пробками. Необходимо также иметь достаточное количество дезинфицирующих растворов для обеззараживания рук и замачивании спецодежды.

ВИБРИОНЫ

Холера — острая антропонозная инфекционная болезнь, протекающая с развитием дегидратации и деминерализации в результате рвоты и водянистой диареи.

Таксономия и классификация

Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Vibrionaceae; Роды: Vibrio, Aeromonos, Plesiomonos, Photobacterium. Типовой род Vibrio, включает около 30 видов, из них 11 патогенных. Патогенные виды вызывают холеру (вид: Vibrio cholerae, биовары cholerae и eltor); их относят к О1 серогруппе (0139) и нехолерные вибрионы (не О1 серогруппа) вызывают острые кишечные заболевания с явлениями гастроэнтерита, иногда заболевания с некишечной локализацией. Морфология и тинкториальные свойства

Слегка изогнутые или прямые палочки, размером 1,5-3х0,5-0,8 мкм. Спор и капсул не образуют. Обладают активной подвижностью — монотрихи. В раздавленных каплях совершают «полет ласточки», в окрашенных мазках

располагаются в виде «паутинки» или «стаек рыб». Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамотрицательны.

Биологические свойства

Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Метаболизм бродильный и

окислительный, лучше размножаются в аэробных условиях.

Растут на щелочных средах с оптимальным pH 7,8-8,6 (алкалифилы).

Среды для культивирования: голодные, простые, элективные,

дифференциально-элективные и транспортировочные (все щелочной

реакции).

1. Элективные — 1% щелочная вода — нежная голубая пленка; щелочной МПА — прозрачные уплощенные, мелкие голубоватые колонии, напоминающие капельки росы.

2. Дифференциально-элективные:

1) TCBS (тиосульфит-цитрат бромтимоловый сахарозный агар) — уплощенные, крупные желтые колонии;

2)TTGA (таурохолат-теллурит- желатиновый агар) — полупрозрачные сероватые колонии;

3) Среда Аронсона (прототип среды Эндо, но с сахарозой вместо лактозы) — блестящие с красным центром и бледно-розовым ободком колонии.

3. Транспортные среды:

1) 1% щелочная ПВ с теллуритом калия. Ферментативная активность

Оксидазоположительны, каталазоположительны. Ферментируют углеводы короткого пестрого ряда до кислоты. Большинство штаммов не ферментирует лактозу. Разжижают желатин, восстанавливают нитраты в нитриты, образуют индол, расщепляют крахмал, Неотрицательны.

Антигены

Выделяют общий термолабильный Н- и термостабильный О-антигены. По стуктуре О-антигена вибрионы подразделяются на 139 серогрупп (число их увеличивается).

Оба биовара холерных вибрионов — классический и Эль-Тор — относятся к О1 серогруппе. О-антиген О1-серогруппы неоднороден, состоит из трех фракций: A, B, C. Сочетание этих фракций образует серовары: Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима (АВС).

Для серотипирования используют О-сыворотки, OR-сыворотки и сыворотки — АВ (Огава) и АС (Инаба). Выделенный в 1993 г. холерный вибрион по антигенной структуре отнесен к О139-серогруппе, не агглютинируется О1-сывороткой.

Вибрионы, не агглютинирующиеся О1-сывороткой, обозначаются как неагглютинабельные — НАГи. Сопоставление V. cholerae и холероподобных (НАГ) вибрионов более чем по 70 признакам выявило их сходство на 90%, а степень гомологии ДНК составляет 70-100%.

В связи с этим холероподобные вибрионы объединены в один вид с холерным вибрионом и отличаются от него лишь по антигенной структуре; их обозначают как вибрионы не О1-серогруппы вида V. cholerae. Факторы патогенности:

• подвижность;

• хемотаксис;

• факторы адгезии и колонизации;

• ферменты агрессивности (нейраминидаза, гиалуронидаза, лецитиназа, муциназа и др.);

• токсичность — эндотоксин;

• токсигенность — экзотоксин-холероген и энтеротоксины типов LT, ST, стимулирующие аденилат- или гуанилатциклазные системы.

Эпидемиология, патогенез, клиника заболевания (особенности)

Холера — особо опасная, антропонозная, кишечная инфекция с фекально-

оральным механизмом передачи, характеризующаяся явлениями

гастроэнтерита, резким нарушением водно-солевого обмена и тяжелой

интоксикацией.

Особенности заболевания:

1) крайне тяжелое течение: ООИ, карантинная инфекция;

2) охват заболеванием большого количества людей за короткий период, быстрое распространение на обширные территории — принимает характер пандемий;

3) высокий процент вибрионосительства в очаге инфекции.

Источник инфекции — вибрионоситель, больной человек, возможно абиотическая среда. Механизм передачи — фекально-оральный; пути — водный, пищевой, бытовой.

Циркуляция возбудителя: человек -> водоемы -> человек. Патогенез (особенности): фекально-оральный путь поступления вибриона в организм (большие количества) желудок (возможная гибель в кислой среде) тонкий кишечник (размножение, адгезия, колонизация слизистых тонкой кишки) -> продукция экзотоксина-холерогена воздействие на аденилатциклазную систему -> профузная диарея и рвота -> обезвоживание интоксикация.

Патогенетические стадии заболевания: энтерит -> гастроэнтерит -> холерный алгид (от греч. algos — холод). Характерным признаком холерного алгида является снижение температуры тела до 34°С. В 17% случаев холерный алгид заканчивается смертью больного.

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: испражнения, рвотные массы, желчь. Классическое исследование: 1 этап.

1. Микроскопия мазков из патологического материала (окраска по Граму, фуксином, и препарата «раздавленная» капля).

2. Посев материала на среду обогащения — 1% пептонную воду.

3. Посев материала на щелочной МПА и дифференциально-элективные среды (TCBS, TTGA и др.).

2 этап (через 6 часов).

1. Учет характера роста на первой пептонной воде (нежная голубая пленка).

2. Микроскопия мазков из пленки, окраска по Граму, фуксином и на подвижность.

3. Пересев на вторую пептонную воду для дальнейшего обогащения.

4. Пересев из первой пептонной воды на щелочной агар и среду TCBS.

3 этап (через 12 часов).

1. Учет роста на второй пептонной воде (аналогично первой).

2. Изучение характера роста на пластинчатых питательных средах:

• микроскопия окрашенных по Граму и фуксином мазков из желтых колоний на среде TCBS и прозрачных на щелочном МПА;

• определение подвижности в препаратах «раздавленная» капля;

• постановка РА на стекле с О1, Инаба-, Огава- и RO-сыворотками.

3. Пересев агглютинабельных колоний на среду Клиглера.
На этом этапе может быть дан предварительный ответ.

4 этап (через 18 часов).

1. Учет изменения лактозо-сахарозной среды.

2. Идентификация выделенной культуры:

• развернутая реакция агглютинации с холерными сыворотками: О1, Инаба, Огава, RO;

• определение чувствительности к холерным диагностическим бактериофагам;

• определение принадлежности к биохимической группе Хейберга;

• определение биовара;

• определение спектра антибиотикорезистентности. Выдача окончательного ответа.

Ускоренное исследование предусматривает обнаружение микроорганизма,

холерогена или фрагмента хромосомы, несущего оперон холерогена

непосредственно в патологическом материале или после подращивания его

в пептонной воде методами ПЦР, РИФ, ИФА, РНГА с антительным

эритроцитарным диагностикумом и др.

Серологическая диагностика.

Носит ретроспективный характер. РА, РНГА.

Иммунитет

Постинфекционный иммунитет длительный, антимикробный и антитоксический. Повторные заболевания наблюдаются редко. Специфическая профилактика

Для создания искусственного иммунитета предложены следующие типы вакцин:

1. Копрускулярная убитая вакцина;

2. Холероген-анатоксин.

3. Бивалентная вакцина, состоящая из анатоксина и соматических
антигенов, серотипов Инаба и Огава.

4. Живая пероральная вакцина.

В очагах холеры проводится экстренная профилактика тетрациклином.

Лечение

1. Восполнение потерь жидкости и электролитов.

2. Антибиотикотерапия: препараты тетрациклинового ряда, левомицетин. Нехолерные вибрионы

V. parahemolyticus — галофильный вибрион, вызывающий гастроэнтериты.

Распространен повсеместно, в морской и пресной воде. Эпидемичен для Японии, заболевания регистрируются в странах Юго-Восточной Азии, Африки, Лат. Америки. Заражение происходит при употребление рыбы и морепродуктов (особенно сырых). У 50% инфицированных — сильные боли в животе и диарея после короткого инкубационного периода (24 ч.). Летальные исходы редки, возможно у пожилых и маленьких детей. Диагностика — бактериологическая. На TCBS-агаре — оливково-зеленые колонии, так как этот микроб не ферментирует сахарозу (отличие от холерного).

V.vumificus — распространен в прибрежных водах Тихого и Атлантического океанов. Концентрируется в «природных фильтрах» — устрицах, мидиях, моллюсках; вызывает два вида поражений — септицемии и раневые инфекции.

ИЕРСИНИИ

Чума — острое природно-очаговое, трансмиссивное, зооантропонозное заболевание. Характеризуется лихорадкой, тяжелой интоксикацией, серозно-геморрагическим воспалением лимфатических узлов, поражением внутренних органов, септицемией, высокой летальностью, быстрым эпидемическим распространением.

Таксономия возбудителя: отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, род Yersinia, вид Y.pestis — возбудитель чумы.

Морфология

Иерсинии чумы отличаются полиморфизмом, могут иметь шаровидную, нитевидную, бациллярную, но чаще овоидную палочку в форме бочонка с двумя крышечками с биполярной окраской (более темные на полюсах), грамотрицательны. Имеют длину 1-2 мкм, толщину 0,3-0,7 мкм. Аспорогенны, неподвижны, при 37°С образуют нежную капсулу белковой природы.

Культуральные свойства

Аэробы, хемоорганотрофы, неприхотливы к питательным средам. Психрофилы — оптимальная температура роста 27-28°С (диапазон — от 0°С до 45°С), pH=6,9-7,1. Ауксотрофы, нуждаются в цистеине и других аминокислотах.

Питательные среды: простые на основе продуктов гидролиза белка. Специальные питательные среды: среда Туманского-Ленской на основе МПА с добавлением антифаговой сыворотки и гемолизированной крови кролика и раствора генцианфиолета для устранения гнилостной сопутствующей микрофлоры. Характер и скорость роста

На жидких ПС дают поверхностную нежную пленку, со свисающими нитями в виде сосулек, так называемый «сталактитовый рост». На плотных ПС на основе гидролизатов белка развитие колоний проходит 3 стадии:

1) через 10-12 часов рост в виде бесцветных пластинок «битого стекла» — S-форма колоний, авирулентная форма.

2) через 18-24 часа — рост колоний с приподнятыми краями, напоминает кружевной платочек, с желтоватой либо буроватой окраской выступающей центральной части, основной вирулентный R-тип.

3) Через 48 ч. наступает стадия «взрослой колонии» с буровато-очерченным центром и периферической зоной.

Биохимическая активность

Разлагают до кислоты глюкозу, арабинозу, маннит, мальтозу, галактозу. Важный признак — отсутствие ферментации сахарозы и лактозы. Антигенная структура

• Капсульный антиген (F1 фракция) — белковой природы обладает сильными иммуногенными свойствами, препятствует фагоцитозу.

• W-антиген (липопротеин) и V-антиген (белок) Идентичны Vi-антигену сальмонелл брюшного тифа.

• F2 фракция — экзотоксин белковой природы.

• Соматический О-антиген (ЛПС) — эндотоксин, вызывает деструкцию тканей.

Факторы патогенности

Y.pestis является самой патогенной и агрессивной среди бактерий, поэтому вызывает наиболее тяжелое заболевание. У всех чувствительных к нему животных и у человека возбудитель чумы подавляет фагоцитарную функцию, подавляет в фагоцитах «окислительный взрыв» и беспрепятственно размножается. Высокая инвазивность, способность проникать даже через неповрежденные кожные покровы, агрессивность, наличие экзо- и эндотоксинов, аллергенность обусловлены наличием следующих факторов патогенности:

• Капсула — обеспечивает устойчивость к фагоцитозу.

• Синтез капсульных антигенов: F1 фракция^-, W-антигены — обеспечивают размножение внутри макрофагов.

• Пили адгезии.

• Синтез пестицина.

• Экзотоксин — «мышиный токсин».

• Эндотоксин.

• Ферменты агрессии и инвазии.

Эпидемиология

Чума — зооантропонозная природно-очаговая инфекция. Циркуляция возбудителя в очагах происходит между дикими животными и кровососущими членистоногими — блохи, клещи. Человек инфицируется через укусы переносчиков или при контакте с кровью инфицированных животных. Патогенез и клиника

Входные ворота — кожа и слизистые оболочки. Пути передачи: трансмиссивный, алиментарный и аэрогенный. Клинические формы чумы:

1) кожная, бубонная форма — образуется некротические язвы у входных ворот, от которых возбудитель проникает в регионарный лимфатический узел, развивается геморрагическое воспаление;

2) первично-септическая форма — возбудитель в крови (септицемия) вызывает токсический шок с повреждением кровеносных сосудов, характерно бурное начало, озноб, лихорадка, сильные головные боли, бред, кома, геморрагии на коже чернеют («черная смерть»); часто заканчивается смертью;

3) вторично-септическая форма — возбудитель с кровью (септикопиемия) разносится по организму, образуя вторичные очаги во внутренних органах, геморрагические кровоизлияния в них;

4) первично-легочная форма — наиболее тяжелая и эпидемиологически очень опасная, характеризуется тяжелой пневмонией с геморрагическими изменениями в легких и кровянистой жидкой мокротой с большим количеством возбудителей, отек легких, смерть;

5) вторично-легочная форма — развивается при осложнении других форм чумы;

6) кишечная форма — развивается при фекально-оральном механизме передачи, кровянистый стул на фоне основных клинических проявлений.

Лабораторная диагностика

При работе с чумным материалом требуется соблюдение строгого режима, проводится в противочумном костюме, хорошо обученным персоналом, в специальных лабораториях особо опасных инфекций.

Патологический материал: отделяемое язв, пунктат бубона, ликвор, кровь, мокрота, фекалии, слизь из зева, трупный материал.

Микроскопический метод: фиксированные мазки из патологического материала окрашивают по Граму. Гр-отрицательные биполярно-окрашенные овоидные микроорганизмы. Расположение вне лейкоцитов. Экспресс метод: для выявления антигенов возбудителя чумы в патологическом материале от больного, в реакциях ИФА, РИФ, РНГА. Бактериологический метод: посев пататологического материала на простые питательные среды, среду Туманского-Ленской. Серологический метод: обнаруживают антитела в сыворотке в ИФА, РИФ,

РНГА.

Специфическая профилактика

Проводится по эпид. показаниям и в очагах чумы. Применяют:

1) живую аттенуированную вакцину из штамма EV;

2) химическую вакцину из оболочечных антигенов;

3) иммуноглобулин противочумный (экстренная профилактика).

Лечение

• антибиотики (тетрациклины, аминоглигозиды);

• противочумная сыворотка или иммуноглобулин.

ФРАНЦИСЕЛЛЫ

Туляремия — зоонозное, природно-очаговое заболевание, протекающее с интоксикацией, лихорадкой явлением лимфаденита, поражением различных органов, разнообразной клинической картиной и медленным восстановлением трудоспособности.

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Brucellaceae, род Francissella, вид: F.tularensis — возбудитель туляремии.

Морфология

Мелкие коккобактерии — 0,2-0,7 мкм. Неподвижны. Аспорогенны. Образуют слизистую капсулоподобную оболочку. Грамотрицательны. Биполярно окрашиваются. Анилиновые красители воспринимают слабо. В препаратах из клинического материала располагается внутриклеточно.

Биологические свойства

Хеморганотрофы. Мезофилы. Строгие аэробы. Прихотливы к питательным средам. Ауксотрофы. Растут на яичных среда, средах с кровью, лецитином, цистином. Рост медленный, скудный — от 3-х дней до 3-х недель. Специальные питательные среды:

1) среда Мак-Кой — свернутая яично-желточная среда;

2) среда Френсина — МПА с кровью, глюкозой и цистином;

3) среда Емельяновой — содержит аутолизат дрожжей, цистин, рыбную муку, желатин.

Биохимическая активность Каталаза «+», оксидаза «-».

Гликолитическая активность: ферментируют глюкозу, мальтозу, маннозу, до кислоты без газа. Образуют H2S. Антигенная структура

Имеют 2 антигена: 1) О — соматический (липополисахарид клеточной стенки) — есть общие субстанции с бруцеллезными антигеном, что может приводить к перекрестным реакциям; 2) Vi-антиген — капсульный, выделяется только у вирулентных форм франциселл в S-форме колонии. Факторы патогенности Являются внутриклеточными паразитами.

1. Капсула — угнетает фагоцитоз. Фагоцитоз носит незавершенный
характер, возбудители размножаются в фагоцитах, подавляя их киллерный
эффект.

2. Нейраминидаза — способствует адгезии.

3. Эндотоксин — выделяется при разрушении возбудителя.

4. Аллергенные свойства — связаны с антигенами клеточной стенки,
вызывают ГЗТ.

Эпидемиология

Зооноз. Основной резервуар туляремии — грызуны около 82 видов. Механизмы и пути передачи инфекции:

1. Контактный — прямой и непрямой — при контакте с больными
животными и их трупами, предметами, зараженными грызунами.

2. Алиментарный — через воду и продукты инфицированные
возбудителем.

3. Воздушно-пылевой.

4. Трансмиссивный — через укусы комаров, клещей.

В Республике Беларусь — природные очаги в пойме рек и болот Белорусского Полесья.

Патогенез и клиника туляремии

Входные ворота (кожа, слизистые глаз, ротовой полости, носа, ЖКТ) — попадает в лимфатические узлы, где размножается в фагоцитах — проникает в кровь. В очагах скопления возбудителя образуются специфические туляремийные гранулемы — бубоны. Чумоподобное заболевание. С кровью — это генерализация инфекции в следствии бактериемии — микроб разносится по всему организму, выделяя эндотоксин при его разрушении, который способствует появлению аллергических реакций ГЗТ во внутренних органах и тканях. Клинические формы: бубонная, легочная, генерализованная, абдоминальная (кишечная). Иммунитет

Прочный, стойкий, клеточный с завершенным фагоцитозом. Лабораторная диагностика Основные методы:

1) аллергический,

2) серологический,

3) бактериологический.

Аллергический: проба с аллергеном тулярином. Реакция положительна с 3 -4 дня заболевания. Выявляет сенсибилизацию (ГЗТ), положительна у переболевших и вакцинированных. Серологический (со 2-й недели заболевания). РНГА; РА; кровяно-капельная реакция.

Экспресс-метод (поиск микробных антигенов) — РИФ, ИФА. Специфическая профилактика (по эпидпоказаниям, в очагах). Вакцина: Эльберта-Гайского — живая, сухая, ослабленная вакцина. Вводят однократно, накожно или внутрикожно.

БРУЦЕЛЛЫ

Бруцеллез — зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, склонное к хроническому течению. Протекает с длительной волнообразной лихорадкой, поражением опорно-двигательного аппарата, сердечно­сосудистой системы, центральной нервной системы, мочеполовой и др. систем организма. Таксономия и классификация

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Brucellaceae, род Brucella.

Виды B. melitensis — мелкий рогатый скот (козы)

B. abortus — коровы

B. suis — свиньи.

B. canis — собаки

B. ovis — овцы, бараны

Br. neotomae — крысы Заболевание у человека чаще вызывают первых три возбудителя. Морфология

Бруцеллы — это мелкие, грамотрицательные коккобактерии, среднее между кокками и короткими палочками. Диаметр 0,5-0,7 мкм; длина 0,6-1,5 мкм.

Неподвижны. Спор не образуют. Капсулу образуют в организме человека и животных. В препарате располагаются хаотично. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Грамотрицательны.

Культуральные свойства

Строгие аэробы. Хеморганотрофы. Прихотливы к питательным средам. Растут на средах с добавлением глюкозы, крови, тиамина, биотина. Являются ауксотрофами и требуют добавления факторов роста и витаминов.

Питательные среды для культивирования бруцелл:

• печеночный сахарный МПБ;

• печеночный сахарный МПА;

• глюкозо-сывороточный агар;

• дрожжевой агар;

• эритрит агар.

Для бруцелл характерен медленный рост, особенно для первых генераций — 2-4 недели, последующие — 1 -2 недели.

Биохимические свойства

Обладают положительной оксидазной и каталазной активностью. Бруцеллы ферментируют глюкозу и арабинозу до кислоты без газа, но достаточно медленно. Восстанавливают нитраты в нитриты. Индол не образуют, не разжижают желатин. Н^-позитивны. Тест на образование H₂S и уреазную активность используется для дифференцировки бруцелл на виды. Факторы патогенности:

1) высокая инвазионная способность;

2) сильнейшие аллергенные свойства, которые определяют патогенез и клинику заболевания. Реакция развивается по ГЗТ;

3) способность подавлять фагоцитоз;

4) эндотоксин;

5) ферменты агрессии и инвазии.

Эпидемиология

Источник инфекции — больные животные (зоонозная инфекция): овцы, козы, крупный рогатый скот, свиньи. Пути передачи инфекции:

1) основной — контактный или контактно-бытовой — до 90% всех заболеваний, при уходе за животными, возбудитель проникает через кожу и слизистые оболочки;

2) воздушно-пылевой — с пылью, кормом животных. Возбудитель проникает через слизистые оболочки носа, глаза, рта;

3) алиментарный — при употреблении непастеризованного молока, зараженной воды, мяса. Патогенез и клиника

По лимфатическим путям возбудитель попадает в лимфатические узлы и размножается там. Далее в кровь (бактериемия), разносится по организму, поражая ткани и органы лимфо-гемопоэза — селезенка, печень, костный мозг. Наблюдается гепатолиенальный синдром — увеличение лимфатических узлов, селезенки, печени и т.д., где образуются стойкие гранулемы, из которых микроорганизм повторно поступает в кровь (повторная генерализация) и поражает уже сенсибилизированные возбудителем органы и системы органов — наблюдается развитие ГЗТ. Поражаются:

• опорно-двигательный аппарат (артриты);

• урогенитальная система — орхиты, прерывается беременность, мертворождаемость;

• нервная система — менингиты, невриты;

• мышцы (миозиты);

• дыхательная система (пневмонии).

Заболевание долго лечится — 10 месяцев, может привести к длительной потери трудоспособности и временной инвалидности.

Иммунитет длительный, стойкий, но возможны повторные заражения. Перекрестный (против всех видов бруцелл). Лабораторная диагностика Методы:

• серологический,

• аллергический,

• микроскопический,

• бактериологический,

• биопроба.

Серодиагностика проводится со 2-ой недели заболевания.

1) реакцию Хеддельсона (качественная, отборочная реакция
агглютинации);

2) реакции Райта (это количественная, подтверждающая реакция
агглютинации);

3) реакцию Кумбса — для определения неполных IgG.

Аллергодиагностика. Применяется кожно-аллергическая проба Бюрне с бруцеллином (протеиновый фильтрат культуры бруцелл) для выявления

ГЗТ.

Можно выявить уже в начальной стадии болезни (1-15 суток заболевания).

Вводится внутрикожно, учет через 48 часов. Диаметр инфильтрата ~ 4 см. Выявляем сенсибилизацию организма бруцеллезным антигеном. Может сохранятся всю жизнь.

Специфическая профилактика

I. Живая ослабленная бруцеллезная вакцина (ЖБВ) из штамма B. abortus.
Проводится по эпидпоказаниям. Иммунитет до 2-х лет. Ревакцинацию
проводят только лицам, у которых проба Бюрне и серологические реакции
отрицательны.

II. Химическая бруцеллезная вакцина (ХБВ) из антигенов клеточной
стенки бруцелл.

Лечение: антибиотикотерапия.

ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

Сибиpская язва — острая бактериальная зоонозная инфекция, характеризующаяся интоксикацией, развитием серозно-геморрагического воспаления кожи, лимфатических узлов и внутренних органов. Латинское название болезни — Antrax (уголь) дано Гиппократом. В 1876 г. Р.Кох выделил возбудителя сибирской язвы в чистой культуре, а в 1881 г. Л.Пастер предложил вакцину против нее. Таксономия

В. anthracis относится к отделу Firmicutes, семейству Васillaceae, роду Bacillus. Это крупная палочка длиной 5-8 мкм, диаметром 1,0-1,5 мкм. Концы у живых палочек слегка закруглены, у убитых они как бы обрублены и слегка вогнуты. Палочки в мазках располагаются парами и очень часто — цепочками, особенно длинными на питательных средах, напоминая бамбуковую трость. Сибиреязвенная палочка хорошо красится всеми анилиновыми красителями, грамположительна. Жгутиков не имеет, образует споры, но только во внешней среде, вне организма человека или животного. Споры располагаются центрально, их диаметр не превышает диаметра бактериальной клетки. Образование спор происходит в тех случаях, когда бактерии испытывают дефицит либо источников энергии, либо аминокислот или оснований. Поскольку в крови и тканях эти источники питания бактерий имеются, спорообразования в организме не происходит. Возбудитель сибирской язвы образует капсулу, но только в организме животного или человека. Биологические свойства

Аэроб или факультативный анаэроб. Температурный оптимум для роста 37-38°С, рН среды 7,2-7,6. К питательным средам не требователен. На плотных средах образует характерные крупные матовые шероховатые колонии R-формы. Структура колоний имеет сходство с локонами или львиной гривой. На агаре, содержащем пенициллин (0,05-0,5 ЕД/мл), через 3 ч роста бациллы распадаются на отдельные шарики, располагающиеся в виде цепочки, образуя феномен «жемчужного ожерелья». В бульоне палочка, находящаяся в R-форме, растет на дне, образуя осадок в виде комочка ваты, бульон при этом остается прозрачным. В. anthracis вирулентна в R-форме, при переходе в S-форму она утрачивает свою вирулентность. Биохимическая активность

В. anthracis каталазопозитивна ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, образует H₂S, свертывает молоко. При посеве уколом в столбик 10%-ного желатина вызывает послойное разжижение его (рост в виде елочки, опрокинутой вниз вершиной). Антигены

Возбудитель сибирской язвы имеет соматические антигены и капсульный антиген (только в организме животного и человека). Соматический антиген полисахаридной природы термостабилен, длительно сохраняется во внешней среде и в трупах животных. На его обнаружении основана диагностическая реакция термопреципитации Асколи.

Факторы патогенности

Важнейшим фактором вирулентности сибиреязвенной палочки является капсула. Утрата капсулы приводит к потере вирулентности. Капсула предохраняет В. anthracis от фагоцитоза. B.anthracis продуцирует 3 термолабильных белка:

• отечный фактор (EF),

• летальный фактор (LF),

• протективный антиген (PA).

Резистентность. Споры сибиреязвенной палочки чрезвычайно устойчивы: в почве сохраняются десятки лет, в воде - в течение нескольких лет. Эпидемиология

Зооноз. Основным источником сибирской язвы являются больные травоядные животные. Они возбудителя с мочой и испражнениями в почву. Почва становится дополнительным резервуаром возбудителя. Заражение животных происходит главным образом алиментарным путем. Заражение человека сибирской язвой происходит при непосредственном контакте с трупами животных, при разделке туш вынужденно убитых животных, при уходе за больными животными, при употреблении мяса или мясных продуктов, полученных от больных животных, при контакте с шерстью, шкурами, кожей, щетиной, зараженными возбудителем или его спорами. Заражение здорового человека от больного происходит крайне редко.

Патогенез и клиника

Входными воротами инфекции являются кожа и слизистые оболочки кишечного тракта и дыхательных путей.

В соответствии с входными воротами заболевание человека сибирской язвой протекает в виде кожной (чаще всего, до 98% всех случаев заболевания), кишечной или легочной форм. Кожная форма проявляется в виде сибиреязвенного карбункула, который локализуется обычно на открытых частях тела.

После перенесенной сибирской язвы образуется стойкий иммунитет.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования — отделяемое карбункула или язвы; испражнения и моча; мокрота; кровь. Исследованию могут подвергаться различные объекты внешней среды (почва, вода), пищевые продукты, сырье животного происхождения. Для обнаружения возбудителя используют бактериоскопический метод: обнаружение грамположительных палочек, окруженных капсулой (в материале от животных или человека) или содержащих споры (объекты внешней среды). Основной метод диагностики — бактериологический — выделение чистой культуры и ее идентификация.

Методы экспресс-диагностики: РИФ, ИФА, полимеразная цепная реакция. Реакция термопреципитации Асколи. Ее используют в тех случаях, когда трудно рассчитывать на выделение чистой культуры возбудителя. Реакция Асколи основана на обнаружении термостабильных антигенов возбудителя.

Кожная аллергическая проба с антраксином. Антраксин вводят внутрикожно в дозе 0,1 мл. Результаты пробы учитывают через 24 и 48 ч. Реакция считается положительной, если образуются гиперемия и инфильтрат диаметром 10 мм и более. Кожная аллергическая проба положительна в течение 20 и более лет после перенесенного заболевания. Специфическая профилактика

Впервые вакцина против сибирской язвы была получена Л. Пастером в 1881 г. Для вакцинации людей против сибирской язвы используются:

• живая аттенуированная сибиреязвенная вакцина;

• инактивированная адсорбированная сибиреязвенная вакцина.

В России лицам, входящим в группы риска заражения сибирской язвой (работники предприятий по обработке продуктов животноводства), проводят плановую вакцинацию живой аттенуированной сибиреязвенной вакциной СТИ.

Лечение. Применяют противосибиреязвенныи иммуноглобулин и антибиотики (пенициллины, тетрациклины, фторхинолоны).

Лекция 17

Грамотрицательные палочки БОРДЕТЕЛЛЫ

Коклюш — детская, воздушно-капельная инфекция, характеризующаяся приступами спастического кашля.

Таксономия бордетелл

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Brucellaceae, род Bordetella.

Виды: B. рertussis,

В.parapertussis, B. bronchiseptica

B. рertussis и В.parapertussis вызывают заболевания у человека — коклюш и паракоклюш. B. bronchiseptica вызывает острые респираторные заболевания у различных животных (кролики, собаки, кошки, свиньи, лисы, обезьяны и др.) и крайне редко в качестве оппортунистической инфекции поражает человека. Возбудитель коклюша Морфология

Мелкая, овоидная палочка, размером 0,5х1,2 мкм, аспорогенная, имеет нежную капсулу (В.pertussis) неподвижна. Подвижностью обладает лишь B. bronchiseptica. Грамотрицательна (биполярная окраска).

Биологические свойства

Хемоорганотроф, аэроб, капнофил (нуждается в 5-10% CO₂), мезофил (температурный оптимум роста 37°C). Ауксотроф, требователен к питательным средам. На простых питательных средах роста не дает. Среды для культивирования: среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый-кровяной МПА) и казеиново-угольный агар (КУА). В.pertussis растет медленнее (48-72 ч.), чем другие бордетеллы. На среде Борде-Жангу вырастают колонии в виде жемчужин («капельки ртути»); на КУА — маслянистые колонии кремового цвета («капельки сметаны»). Биохимическая активность

В.pertussis биохимически инертна, обладает слабой биохимической активностью.

Антигенная структура

У бордетелл выявлено 14 антигенов-агглютиногенов, из которых 7-й является родовым, общим для всех видов, а другие — видовыми: 1-й — В.pertussis, 14-й — В.parapertussis, 12-й — B. bronchiseptica.

Факторы патогенности

1. Капсула — обладает антифагоцитарной активностью.

2. Филаментозный гемагглютинин и фимбрии (пили) — обуславливают адгезию на ресничках мерцательного эпителия трахеии и бронхов.

3. Трахеальный цитотоксин — повреждает мерцательный эпителий.

4. Главным фактором патогенности В.pertussis является термолабильный белковый экзотоксин — возможный индуктор пароксизмальной фазы заболевания, определяющий клиническую специфику коклюша. Коклюшный токсин связан с бактериальной клеткой и выделяется при ее разрушении.

5. Ферменты - гиалуронидаза, плазмокоагулаза, лецитиназа. Особенности клиники

1. Инкубационный период 2-14 дней.

2. Катаральная стадия 5-8 дней.

3. Приступы спастического кашля 4-8 недель.

4. Период выздоровления 1 -3 месяца.
Лабораторная диагностика

Для диагностики коклюша используется в первые дни болезни бактериологический метод. Спустя две недели от начала заболевания, когда в материале бордетеллы не обнаруживаются — серодиагностика. Бактериологический метод: Материал для исследования — мокрота. Посев на среду Борде-Жангу (глицериново-картофельный кровяной МПА) или казеиново-угольный агар (КУА) с пенициллином. Посев производится тампоном или методом «кашлевых пластинок».

Инкубация посевов при температуре 35—37^оС и ежедневный просмотр с помощью лупы. Микроскопия мазков из подозрительных колоний, окраска по Граму. Ориентировочная идентификация подозрительных колоний в реакции агглютинации с видовыми агглютинирующими сыворотками. Откол подозрительных колоний на среду КУА или Борде-Жангу. Окончательная идентификация выделенной культуры путем серотипирования с адсорбированными сыворотками к антигенам 1, 12, 14. При необходимости дифференциация по биологическим свойствам. Серологический метод: РНГА, ИФА.

Иммунитет после перенесенного заболевания стойкий, напряженный, пожизненный.

Лечение: антибиотики гентамицин, пенициллин, эффективны только в катаральном периоде. Эритромицин, пенициллин. Специфическая профилактика проводится вакциной АКДС по схеме: 3 мес., 4 мес, 5 мес., 18 мес.

ГЕМОФИЛЬНАЯ ПАЛОЧКА

Заболевания, вызываемые H. influenzae:

• менингит,

• пневмония,

• остеомиелит,

• сепсис,

• средний отит,

• синусит,

• конъюктивит.

Длительное время эти бактерии считали возбудителем гриппа (influenza), что объясняет происхождение видового названия.

Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Pasteurellaceae, род Haemophilus, вид Haemophilus influenzae.

Морфология

Палочки небольшого размера или кокобациллы. Диаметр 0,3-0,4 мкм, длина 1-1,5 мкм. Неподвижные, неспорообразующие. Часть штаммов имеют полисахаридную капсулу. По Граму окрашиваются отрицательно.

Биологические свойства

Хемоорганотроф. Факультативный анаэроб, но лучше растет в присутствии кислорода. Капнофил (необходимо повышать концентрацию СО2 в атмосфере инкубирования до 5-10%). Мезофил. Ауксотрофный микроорганизм. Для культивирования в питательной среде должны содержаться X и V факторы роста. Х фактор — это гемин и гематин. V фактор — это никотинамидадениндинуклеотид (НАД, ко-фермент I) или никотинамидадениндинуклеотидфосфат (НАДФ, ко-фермент II). Х и V факторы присутствуют в крови (отсюда название рода Haemophilus — «любящие кровь»). Однако в нативной крови находятся ферменты (НАДазы), разрушающие V фактор. Поэтому гемофилы плохо или совсем не растут на кровяном агаре.

Для высвобождения факторов роста из эритроцитов и инактивации сывороточных ингибиторов кровь прогревают при 80° С 15 мин. Питательная среда для гемофил — шоколадный агар (агар с гретой кровью).

Капсульные штаммы формируют слизистые, круглые, сочные, сероватого цвета, дающие радужную окраску в проходящем свете колонии диаметром до 2 мм.

Неинкапсулированные штаммы образуют мелкие, непрозрачные, колонии с неровными краями.

Для чистой культуры гемофильной палочки характерно наличие специфического «мышиного» запаха.

Биохимическая активность

H.influenzae обладает оксидазной и каталазной активностью. Ферментация углеводов вариабельна.

Антигенная структура

Имеется капсульный К-антиген и соматический О-антиген. По капсульному антигену все штаммы разделяют на 6 сероваров (a, b, c, d, e, f). Основную эпидемическую опасность представляет H. influenzae типа b (обозначают как Hib, ХИБ). Факторы патогенности:

• капсула;

• факторы адгезии и колонизации (пили, фимбрии);

• эндотоксин (липополисахарид).

Патогенез и клинические проявления

Все инфекции, обусловленные гемофильной палочкой, можно подразделить на 2 типа: инвазивные и неинвазивные.

Неинвазивные инфекции возникают в результате размножения H. influenzae на слизистой оболочке дыхательных путей. Острый синусит, острый средний отит и обострение хронического бронхита, как правило, являются осложнениями вирусных инфекций. Инвазивные инфекции (менингит, остеомиелит, сепсис) развиваются в результате внедрения возбудителя во внутреннюю среду организма.

Клиническая картина зависит от локализации поражений. Наибольшую опасность представляют менингит и острый эпиглоттит (воспаление надгортанника).

Микробиологическая диагностика

• Бактериологический метод (выделение чистой культуры, ее идентификация и определение антибиотикорезистентности).

• Иммунологические методы выявления капсульного антигена H. influenzae типа b в ликворе, крови, плевральной жидкости и моче: реакция латекс-агглютинации, иммуноферментный анализ.

• Молекулярно-генетический метод (ПЦР).

Лечение: антибиотикотерапия. Специфическая профилактика

Используются химические вакцины на основе капсульного полисахарида ХИБ. Плановая вакцинация проводится в США и ряде стран Западной Европы. С 2006 г. проводится плановая вакцинопрофилактика против ХИБ в Украине, с 2008 г. — в Беларуси (только г. Минск).

Схема вакцинации состоит из четырех введений в те же сроки, когда делаются прививки АКДС-вакциной: 3 мес., 4 мес, 5 мес., 18 мес.

ЛЕГИОНЕЛЛЫ

Легионеллез — заболевание бактериальной этиологии, протекающее с интоксикацией, респираторным синдромом, тяжелой пневмонией и поражением центральной нервной системы.

Возбудитель легионеллеза — Legionella pneumophila, впервые выделен и идентифицирован в 1977 г. после крупной эпидемической вспышки пневмоний в Филадельфии (США) с 15% летальным исходом. В названии бактерии увековечены первые жертвы инфекции — участники конгресса организации «Американский легион» и обозначена пневмотропность возбудителя — Legionella pneumophila. Таксономия

Царство Procaryotae, отдел Gracilicutes, семейство Legionellaceae, род Legionella, вид Legionella pneumophila.

Семейство Legionellaceae состоит только из одного рода. Описано более 40 видов легионелл, для 22 из них доказана роль в инфекционной патологии человека.

Морфология

Легионеллы — грамотрицательные палочки диаметром 0,5-0,7 мкм и длиной 2-5 мкм. Иногда встречаются нитевидные формы длиной до 20­25 мкм. Спор и капсул не образуют. Подвижны за счет одного или двух полярно расположенных жгутиков.

Биологические свойства

Аэробы. Мезофилы. Каталаза-положительны, оксидаза-вариабельны. Легионеллы не ферментируют углеводы, в качестве источника углерода и энергии используют аминокислоты.

Культуральные свойства