Серологический метод диагностики коклюша

Начиная с 3-4 недели заболевания в крови больных начинают появляться антитела, которые можно обнаружить серологическим методом c помощью реакции агглютинации и реакции связывания комплемента по Борде-Жангу.

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ. Для выполнения реакции берут кровь больного в количестве 0,8-1 мл (из пальца или пятки ребенка), помещают на 10-15 минут в термостат, а после этого - в холодильник для уплотнения и отделения сгустка. Затем проводят центрифугирование, сьшоротку отсасывают и разводят физиологическим раствором от 1:5 до 1:2500. В качестве антигена используется изготовленный производственным способом диагностикум. Схема постановки реакции следующая.

Ингредиенты	Пробирки
контроль антигена	контроль сыворотки
Физ. раствор	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25
Сыворотка больного в разведении 1:5	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	-	0,25
Разведение	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	1:320	1:640	1:1280		1:5
Диагностикум в каплях										-

Пробирки с разведенной сывороткой и добавленным в них диагностикумом помещают на 2 часа в термостат при 37 °C, а затем на сутки оставляют при комнатной температуре.

Агглютинация носит мелкозернистый характер. Поэтому учет ее производят с помощью агглютиноскопа.

Реакция считается положительной при четкой агглютинации с интенсивностью на ++ + + и + + +. Диагностическим является титр 1:40. Результаты серологических реакций имеют диагностическое значение только при изучении их в динамике, в связи с чем они повторяются не менее двух раз в течение болезни с интервалами 5-7 дней.

РСК ПО БОРДЕ-ЖАНГУ. Реакцию ставят по общепринятой методике. Особенностью ее является: длительное связывание (18-24 часа на холоду при +4 °C); в качестве диагностикума берется свежеприготовленная 1 млрд. взвесь 2-дневной культуры палочек коклюша, выращенных на 20% картофельно-глицериновом агаре и смытых физиологическим раствором. Омыв бактерий центрифугируют до полного просветления, осадок эмульгируют в дистиллированной воде для растворения случайно смытых со среды эритроцитов. После повторного центрифугирования готовят 1 млрд. суспензию культуры, инактивируют при +56 °C 1 час и подвергают титрованию.

Антиген титруют в присутствии комплемента.

Схема титрования антигена коклюшных бактерий
Ингредиенты в мл	Номера пробирок и их содержимое в мл	Контроль
						антигенная гемотоксичность	комплемента
Антиген	0,05	0,1	0,12	0,15	0,2	0,25	0,25	-
Комплемент в рабочей дозе	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	-	0,25
Физиологический раствор	0,45	0,40	0,38	0,35	0,30	0,25	0,50	0,50
Встряхнуть, в термостат на 35-40 минут при +37 °C. Затем добавить гемолитическую систему.
Гемолитическая система	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Учет результатов	гемолиз	гемолиз	гемолиз	гемолиз	-	-	-	гемолиз

Титром антигена считают то его максимальное количество, при котором еще возможен гемолиз (в данном примере - 0,15 мл). Рабочая доза должна быть на 20% ниже (0,12 мл).

После этого антиген используют для постановки РСК.

Профилактика коклюша. Методы профилактики коклюша. Профилактика коклюша включает мероприятия, проводимые для предупреждения любых воздушно-капельных инфекций. Больного коклюшем изолируют от коллектива на 25-30 дней с момента заболевания. Карантин сроком на 14 дней устанавливают для детей до 7 лет, бывших в контакте с больными, если они ранее не болели коклюшем. В очаге проводят общие профилактические мероприятия (проветривание, обеззараживание посуды, носовых платков и др.). Для специфической профилактики коклюша используют вакцину из убитых бактерий I фазы; содержащей коклюшный токсин, агглютиногены и Аг капсулы. Обычно её комбинируют с дифтерийным и столбнячным анатоксинами (в составе АКДС-вакцины). Среди детей, заболевших в возрасте до 1 года, зарегистрирован самый высокий показатель смертности. Поэтому вакцинацию проводят в возрасте 3 мес, а ревакцинацию — в 4, 5, 18 мес и при поступлении в школу. Правильно проведённая вакцинация снижает заболеваемость в 7-10 раз.

В настоящее время профилактика коклюша состоит из иммунизации детей вакциной АКДС. Ее проводят в возрасте 3 месяцев троекратно, затем повторяют прививку в 18 месяцев. Хотя поствакцинальный иммунитет не может полностью защитить от коклюша, но заболевание в данном случае протекает значительно легче. Если же в детском коллективе оказался больной коклюшем, то все контактировавшие с ним дети подлежат изоляции сроком на 7 дней. За ними устанавливается медицинское наблюдение с обязательным проведением лабораторной диагностики. После двукратного отрицательного бактериологического анализа (посев мазка из носоглотки) контактировавшие дети могут вернуться к привычному образу жизни. Если в контакте с больным оказался непривитой или неполностью привитой ребенок до 3 лет, или ребенок с сопутствующими инфекционными заболеваниями, целесообразно в качестве профилактических мер сделать прививку антитоксическим противококлюшным иммуноглобулином. Его можно вводить независимо от сроков, прошедших с момента общения с больным.

Источник:http://www.tiensmed.ru/news/answers/kakovi-metody-profilaktiki-kokliusha.html

1.Классификация и морфо-биологические особенности менингококков.

Neisseria.meningitidis Менингококк - возбудитель менингококковой инфекции - строгого антропоноза с воздушно - капельной передачей возбудителя. Основной источник - носители. Природный резервуар - носоглотка человека. Морфологические, культуральные и биохимические свойства аналогичны гонококку. Отличия - ферментируют не только глюкозу, но и мальтозу, продуцируют гемолизин. Обладают капсулой, имеющей большие размеры и другое строение, чем у гонококка.

хорошо окрашиваемые метиленовым синим и другими анилиновыми красителями, плеоморфные (полиморфизм). Очень прихотливы к условиям культивирования и питательным средам. Из углеводов ферментируют только глюкозу

Антигенный состав. Имеют четыре основные антигенные системы.

1. Капсульные группоспецифические полисахаридные антигены. Штаммы серогруппы А наиболее часто вызывают эпидемические вспышки.

2. Белковые антигены наружной мембраны. По этим антигенам менингококки серогрупп В и С подразделены на классы и серотипы.

3. Родо- и видоспецифические антигены.

4. Липополисахаридные антигены (8 типов). Им