Лабораторная диагностика бешенства

Она включает: обнаружение вирус­ного антигена в РИФ и РДП, телец Бабеша — Негри и биопробы на белых мышатах. РИФ. Для данной реакции биопромышленность выпускает флуо­ресцирующий антирабический гамма-глобулин. Материал от животных, вакцинированных против бешенства, нельзя исследовать в РИФ в течение 3 мес после прививки, так как может быть флуоресценция антигена вакцинного вируса.

В препаратах, содержащих антиген вируса бешенства, наблюдаются разной величины и формы флуорес­цирующие желто-зеленым цветом гранулы в нейронах, но чаще вне клеток (см. рис. 63). В контроле подобного свечения не должно быть, нервная ткань обычно светится тусклым сероватым или зеленоватым цветом. Интенсивность свечения оценивают в крестах. Отрицатель­ным считают результат при отсутствии специфической флуоресцен­ции.

В РИФ не подлежат исследованию ткани, консервированные глицерином, формалином, спиртом и т. д., а также материал, име­ющий признаки даже незначительного загнивания.

РДП в агаровом геле. Метод основан на свойстве ан­тител и антигенов диффундировать в агаровом геле и при встрече образовывать видимые визуально линии преципитации (комплекс антиген + антитело). Применяют для обнаружения антигена в мозге животных, павших от уличного вируса бешенства, или при экспери­ментальной инфекции.

Реакцию считают положительной при появлении одной или 2—3 линий преципитации любой интенсивности между лунка­ми, содержащими суспензию мозга и антирабический гамма-гло­булин. Выявление телец Бабеша-Негр и. На пред­метных стеклах делают тонкие мазки или отпечатки из всех отде­лов головного мозга (как для РИФ), не менее двух препаратов с каждого отдела мозга, и окрашивают по одному из методов (по Селлерсу, Муромцеву, Манну, Ленцу и т. д.). Положительным результатом считают наличие телец Бабеша — Негри — четко очерченных овальных или продолговатых гранули­рованных образований розово-красного цвета, расположенных в цитоплазме клеток или вне их.

Биопроба. Для биопробы отбирают белых мышей массой 16—20 г, нервную ткань из всех отделов головного мозга растирают в ступке со сте­рильным песком, добавляют физиологический раствор до получения 10%-ной суспензии, отстаивают 30—40 мин и используют надоса-дочную жидкость для заражения мышат. При наличии ви­руса бешенства в патматериале с 7—10-го дня после заражения у мышей наблюдают следующие симптомы: взъерошенность шер­сти, своеобразную горбатость спины, нарушение координации движений, паралич задних, затем передних конечностей и гибель. У павших мышей головной мозг исследуют в РИФ на обнаружение телец Бабеша — Негри и ставят РДП

Биопробу на бешенство считают положительной, если в пре­паратах из мозга зараженных мышат обнаруживают тельца Ба­беша— Негри или выявляют антиген методами РИФ или РДП. Отрицательный диагноз — отсутствие гибели мышат в течение 30 дней.