Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Лабораторные животные используются для выделения вирусов из инф. материала, когда невозможно применить культуры кл. или куриные эмбрионы. Используют преимущественно новорожденных белых мышей, хомяков, морских свинок, крысят. Заражают животных в соответствии с цитотропизмом вируса: пневмотропные вирусы вводятся интраназально, нейротропные — интрацеребрально, дерматотропные — на кожу.
Индикация вируса основана на проявлении у животных признаков инфекционного заболевания, их гибели, характере патоморфологических и патогистологических изменений в тканях и органах, а также по положительной реакции гемагглютинации.
Бактериофаги (вирусы бактерий)
Бактериофагами или фагами называют вирусы, поражающие бактерий, которым они всегда сопутствуют. Распространены повсеместно. Взаимодействие бактериофагов с кл. специфично и в зависимости от вида бактерий. Различают бактериофаги кишечной палочки, сальмонелл, клебсиелл, стафилококков. Р-ры от 25 до 200 нм. Геном представлен РНК или ДНК и содержит от 8–9 до 200 генов (соответственно и мелких, и крупных фагов). Существуют в трех формах — внекл. (вирион), размножающейся в кл. (вегетативная форма) и в виде провируса (интегрированной с геномом кл.-хозяина). Большинство бактериофагов по внешнему виду напоминают сперматозоиды. У наиболее сложно устроенных фагов имеется головка кубической симметрии с заключенным в ней геномом и отросток, в котором различают полый стержень, окружающий его чехол, состоящий из актиноподобного, способного к сокращению спирального белка, и находящуюся на дистальном конце стержня базальную пластинку с шипами и нитями (рецепторами), от которых зависит специфическая адсорбция на клетке-хозяине. В пластинке и шипах содержится лизоцим. Есть бактериофаги, устроенные более просто. По морфологии различают 5 типов вирионов бактериофагов: 1-й — нитевидные (в своем составе содержат однонитевую ДНК), 2-й — головка с аналогом отростка (РНК-содержащие и один бактериофаг с однонитевой ДНК), 3 — головка с коротким отростком, 4-й — головка с несокращающимся отростком, 5-й — головка с сокращающимся отростком (3–5 типы, как правило, с двунитевой ДНК). Бактериофаги делятся на вирулентные и умеренные.
Взаимодействие бактериофага с кл.вначале идет адсорбция фага на бактер. кл. Для одних рецепторы бактерий — липопротеины, для других — липополисахариды, тейховые кислоты, Vi-антиген, жгутики бактерий. Нитевидные фаги и фаги с аналогом отростка прикрепляются к F-пилям (секс-пилям).
Второй этап — введение вирусной НК в бактер. кл. У сложных фагов пластинка с шипами прикрепляется к кл.стенке, содержащийся в них лизоцим в месте контакта повреждает кл. стенку, затем внутренний стержень прокалывает стенку клетки и ДНК фага инъецируется в цитоплазму кл. Если бактериофаг вирулентный, то развивается продуктивная инфекция кл. Фаговая НК вызывает перестройку обмена вв инфицир. кл. Репликация бактериофага не отличается от таковой вирусов. Если процесс по каким-либо причинам прерывается, зрелые бактериофаги не образуются, и реализуется абортивный тип инфекции. В случае нормального протекания репродукции образуются зрелые инфекц. фаговые частицы. То есть инфекция продуктивна. Выход образованных фагов из кл.- путем воздействия на кл. стенку бактерий синтезируемым фагом лизоцимом. При этом образуются аутолизины, повышается внутрикл. давление и стенка разрывается (выход путем «взрыва»). Только нитевидные фаги могут проходить через клеточную стенку без ее повреждения. Кол-во образованных в кл.частиц — 100–400 до 20 000 частиц.Если в кл. внедряется умеренный бактериофаг, то после проникновения его ДНК встраивается в геном кл.-хозяина и превращается в профаг. Это явление получило название «лизогения». В этом случае активной репродукции вируса не происходит, а геном фага репродуцируется одновременно с геномом бактерии и передается по наследству дочерним кл.. Такие бактерии называются лизогенными. У них возникает резистентность (им-тет) по отношению к гомологичному вирулентному фагу. Профаг может спонтанно или под действием некоторых индукторов (УФ-облучение, рентгеновское облучение, избыток витамина С, Н2О2, повышение t.) начать репродуцироваться (10-2–10-6), т.е. превращается в вирулентную форму.Превращение бактерии из нелизогенной в лизогенную может придавать ей новые св-ва (способность продуцировать экзотоксин). Это явление называется «лизогенная конверсия».
При общей трансдукции в процессе сборки фага внутри кл.в его головку встраивается равный по длине случайный фрагмент ДНК клетки-донора. Такой фаг, проникая в клетку-реципиент, впрыскивает фрагмент ДНК клетки-донора и при рекомбинации генов клетка-реципиент приобретает новые свойства, которые у нее отсутствуют.
Если трансдукция специфическая, то умеренный бактериофаг обязательно встраивается в хромосому кл.-хозяина и при выходе из нее захватывает рядом лежащие ее, но теряет равный захваченному отрезок своей НК. Когда он проникает в клетку-реципиент, то размножаться в ней не может, но привносит в нее строго определенные гены клетки-донора. Донорские гены встраиваются в геном клетки-реципиента и придают ей новые биологические свойства.
Практическое использование бактериофагов:
1. Идентификация бактерий путем постановки пробы фаголизиса. Идентификация проводится видовыми бактериофагами (Vi-I брюшнотифозный, бруцеллезный Тб, бактериофаги шигелл Зонне, Флекснера и др.) или до биовара (СIV и Эль-Тор II холерные).
2. Фаготипирование с целью определения источника инфекции (Vi-II брюшнотифозные бактериофаги, стафилококковые, сальмонеллезные, склеромные и др., которые лизируют отдельные штаммы данного вида).
3. Определение присутствия в патологическом материале или объектах внешней среды бактерий по наличию соответствующих бактериофагов, что свидетельствует о контаминации этих объектов.
4. Обнаружение бактерий в материале по нарастанию титра бактериофага.
5. Для лечения инф. (дизентерийн., брюшнотифозн бактериофаги) и обширных ожогов с нагноением (колибактериофаг, коли-протейный, стафилококковый, поливалентный клебсиеллезный.).
6. Для проф-ки инфекций (дизентерийный, холерный).
7. Для изучения генетики микроорганизмов.
8. Бактриофаги — сильные стимуляторы Т-клеточного иммунного ответа.
Дата публикования: 2015-11-01; Прочитано: 574 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!