Культивирование вируса. Вирусы гриппа хорошо размножаются в куриных эмбрионах при заражении в аллантоисную или амниотическую полости и вызывают их гибель через 26-36 ч

Вирусы гриппа хорошо размножаются в куриных эмбрионах при заражении в аллантоисную или амниотическую полости и вызывают их гибель через 26-36 ч.

Одни штаммы вируса гриппа птиц после адаптации размножаются в культуре клеток фибробластов куриных эмбрионов, почек обезьян, другие - в диплоидных культурах клеток человека, в миелобластах цыплят, в первичных культурах клеток лёгких эмбриона человека.

Большинство штаммов вируса дают бляшки в первичной культуре клеток фибробластов.

Лабораторная диагностика включает выделения вируса и его идентификацию, а также выявление специфических антител в сыворотке крови больной или переболевшей птицы.

Для этой цели биопромышленность выпускает два диагностических набора:

- набор специфических антигенов и сывороток к ним для диагностики гриппа птиц 13 серотипов,

- диагностический набор для идентификации вируса Ньюкаслской болезни и гриппа птиц.

В качестве вируссодержащего материала используют селезёнку, головной мозг, синусы, трахею, лёгкие, воздухоносные мешки, кишечник от больной птицы из свежих трупов.

Материал в лабораторию доставляют в замороженном виде в термосе со льдом.

Испытуемой суспензией заражают:

- 9-10-дневные куриные эмбрионы в аллантоисную или амниотическую полость и инкубируют в течение 72 ч. Эктраэмбриональную жидкость каждого эмбриона проверяют на гемагглютинирующую активность в капельной реакции гемагглютинации с 1%-ной взвесью эритроцитов кур. При отсутствии положительного результата проводят ещё 3-5 слепых пассажей;

- культуру фибробластов куриных эмбрионов, цитопатическое действие проявляется через 24-48 ч;

- цыплят 2-3-месячного возраста любым методом, которые погибают через 36-72 ч в зависимости от дозы и вирулентности возбудителя.

Идентификацию вируса проводят в РТГА, РСК, МФА и ИФА с использованием моноклональных антител.

Для обнаружения специфических антител используют парные сыворотки крови, которые исследуют в РТГА, РСК и реже в РДП.

Для специфической профилактики гриппа применяют инактивированную β-пропиолактоновую гидроокисьалюминиевую вакцину. В Англии применяют живую нейроминидазо- K -специфическую вакцину, а в США - масляно-эмульсионную вакцину против гриппа птиц на цыплятах-бройлерах и курах-несушках.

Разработан метод получения рекомбинантного вируса гриппа птиц, который экспрессирует иммуногенные белки и выполняет функцию живой вакцины для домашней птицы. Продолжительность поствакцинального иммунитета до 6 мес.

3. Семейство бирнавирусов (Family Birnaviridae)

Семейство Бирнавирусов (от англ. bi - двойной, rna - рибонуклеиновая кислота) образовано в 1984 г., включает вирусы, поражающие широкий круг хозяев, и состоит из 2 родов:

- род Aquabirnavirus: вирус инфекционного некроза поджелудочной железы лососевых рыб и др.;

- род Avibirnavirus: вирус инфекционного бурсита птиц.