У всех пациентов – гиперкалиемия. 7 страница

2. Назовите методы определения альбумина.

3. Какие понятия используют для оценки содержания белка в сыворотке крови?

4. Какие погрешности при определении альбумина БКЗ – бромкрезоловым зеленым методом могут привести к получению ошибочных результатов?

Эталоны ответов к задаче

1. Гипоальбуминемия. Уменьшение содержания альбумина наблюдается при длительном голодании или продолжительном соблюдении безбелковой диеты, при заболевании почек, кровопотерях, ожогах, при сахарном диабете, циррозах, токсических повреждениях печени, энтеритах, перитонитах, завороте кишок.
2. Методы основаны на взаимодействии альбумина с красителями: бромкрезоловым зеленым – БКЗ или с бромкрезоловым пурпуровым – БКП, а также метод электрофореза.
3. Нормопротеинемия, гиперпротеинемия, гипопротеинемия при нормальном, повышенном и пониженном содержании белка, соответственно; парапротеинемия при появлении патологических белков и диспротеинемия при количественных изменениях белковых фракций.
4. Хранение бромкрезолового реактива на свету, несоблюдение установленного времени развития цветной реакции, неправильное дозирование, неточное построение калибровочного графика.

Задача №107

Лаборант определял общий билирубин и его фракции в сыворотке крови пациента. Все пробы одновременно он колориметрировал одновременно после 20 минутной инкубации.

Задания

1. Оцените ситуацию. Дайте объяснение лабораторной ошибке.
2. Какие фракции билирубина имеются в организме человека?
3. Какой процент от общего билирубина приходится на долю неконъюгированного, как он рассчитывается?
4. Какие виды желтух Вам известны?

Эталоны ответов к задаче

1. При определении билирубина в сыворотке крови необходимо строго соблюдать время от внесения диазосмеси до измерения на ФЭКе: 5 – 10 минут при определении конъюгированного (прямого) билирубина и 20 минут при определении общего билирубина. При более длительном стоянии часть неконъюгированного билирубина начинает взаимодействовать с диазосмесью, что завышает результаты.

2. Две фракции билирубина: конъюгированный билирубин или связанный с глюкуроновой кислотой, который дает прямую реакцию с диазосмесью; и неконъюгированный билирубин, адсорбированный на альбумине, который, при добавлении к смеси кофеинового реактива, вступает в реакцию с диазосмесью.

3. На долю неконъюгированного билирубина приходится 75% от общего. Концентрацию неконъюгированного билирубина рассчитывают по формуле: неконъюгированный билирубин = общий билирубин – конъюгированный билирубин.

4. Надпечёночная (гемолитическая), печёночная (паренхиматозная), подпечёночная (механическая).

Задача №108

У пациента 60 лет при исследовании крови на содержание железа, был получен результат – 4,3 мкмоль/л (норма 9,0 – 31,0 мкмоль/л).

Задания

1. Оцените полученный результат.
2. Назовите методы определения сывороточного железа.
3. Какие внелабораторные ошибки могут привести к ошибке при исследовании железа?
4. В состав каких соединений в организме входит железо?

Эталоны ответов к задаче

1. Гипосидеремия. Понижение сывороточного железа происходит при железодефицитной анемии, раке печени, после острых и хронических кровопотерь, беременности, дефиците витамина C, болезни почек, заболеваниях желудочно-кишечного тракта.

2. Определение содержания сывороточного железа основывается на формировании окрашенных комплексов, образующихся при взаимодействии железа с определенными химическими реагентами. Наиболее чувствительным является батофенантролиновый метод.

3. Внелабораторные ошибки: сыворотка не должна содержать следов гемолиза, пациент не должен принимать препараты железа в течение 5 дней. Несоблюдение этих правил приводит к завышенным результатам.

4. Железо в организме входит в состав гемоглобина, миоглобина, в небольших количествах в состав цитохромов, некоторых ферментов. Железо в сыворотке связывается с белками, образуя ферритин и трансферрин.

Задача №109

У военнослужащего 19 лет, проходящего службу в очаге распространения вирусного гепатита, появились жалобы на плохое самочувствие, слабость, отсутствие аппетита, пожелтение склеры глаз, кожи. При исследовании сыворотки крови были получены следующие результаты:

общий билирубин – 85 мкмоль/л (норма 8,5 – 20,5 мкмоль/л)

конъюгированный билирубин – 25 мкмоль/л (норма 0 – 5,1 мкмоль/)

неконъюгированный билирубин – 60 мкмоль/л (норма до 16,5 мкмоль/л)

Задания

1. Оцените полученный результат.
2. Какие фракции билирубина имеются в организме человека?
3. Какой процент от общего билирубина приходится на долю неконъюгированного, как он рассчитывается?
4. Какие виды желтух Вам известны?

Эталоны ответов к задаче

1. по результатам исследования можно предположить паренхиматозную (печёночную) желтуху.

2. Две фракции билирубина: конъюгированный билирубин или связанный с глюкуроновой кислотой, который даёт прямую реакцию с диазосмесью, и неконъюгированный билирубин, адсорбированный на альбумине, который, при добавлении к смеси кофеинового реактива, вступает в реакцию с диазосмесью.

3. На долю неконъюгированного билирубина приходится 75% от общего. Концентрацию неконъюгированного билирубина рассчитывают по формуле: неконъюгированный билирубин = общий билирубин – конъюгированный билирубин.

4. Надпечёночная (гемолитическая), печёночная (паренхиматозная), подпечёночная (механическая).

Задача №110

Пациент 60 лет госпитализирован с острыми болями в области сердца. При исследовании сыворотки крови через 10 часов после болевого синдрома выявлено:

ЛДГ - (норма 240 – 280 u/л)

АсАт - (норма 10 – 50 u/л)

АлАт - (норма 0 – 41 u/л)

Задания

1. Оцените полученные результаты.
2. Каковы особенности подготовки сыворотки для ферментативных определений?
3. Дайте определение понятию «изоферменты».
4. Назовите 5 изоферментов ЛДГ.

Эталоны ответов к задаче

1. По результатам исследования можно предположить острый инфаркт миокарда.

2. При работе с ферментами сыворотку надо как можно быстрее отделить от эритроцитов, избегать нагревания, повторного замораживания и оттаивания, исследовать не откладывая. Определение ферментов проводить натощак. Лекарственные препараты, принятые пациентом, влияют на активность ферментов.

3. Изоферменты – это множественные формы фермента, катализирующие одну и ту же реакцию, но отличающиеся друг от друга по физико-химическим свойствам, составу, месту локализации.

4. ЛДГ (лактатдегидрогеназа)-катализирует превращение пировиноградной кислоты в молочную, содержит два типа полипептидных цепей: Н – сердечный тип, М – мышечный тип и состоит из 4 субъединиц, может существовать в 5 изоформах: ЛДГ₁ (НННН) и ЛДГ₂ (НННМ) – локализуется в сердечной ткани; ЛДГ₃ (ННММ) – в поджелудочной железе; в скелетных мышцах и печени преобладают изоферменты ЛДГ₄ (НМММ) и ЛДГ₅ (ММММ).

Задача №111

При определении магния в сыворотке крови пациента 65 лет был получен результат – 0,5 ммоль/л (норма 0,7 – 1,2 ммоль/л).

Задания

1. Оцените полученный результат.
2. Каковы общие требования подготовки материала при определении концентрации электролитов?
3. Методы определения магния.
4. Локализация магния в органах и тканях.

Эталоны ответов к задаче

1. Гипомагниемия. Пониженное содержание магния в сыворотке крови вызывают голодания, острая потеря кишечной жидкости, хронический алкоголизм, печеночная недостаточность, ишемическая болезнь сердца.

2. Взятие крови утром до приема пищи, время от забора крови до отделения форменных элементов должно быть не более 30 – 60 минут. Кровь до получения сыворотки или плазмы даже на короткое время нельзя помещать в холодильник.

3. Магний в сыворотке крови определяют по цветной реакции с образованием комплекса, окрашенного в пурпурный цвет.

4. Магний – внутриклеточный катион. В организме человека он содержится в количестве 20 – 30 граммов, 1/3 из которых сосредоточена в костях и зубах, 1/5 – в мышцах. Основная масса магния содержится в крови в ионизированном состоянии (55 – 60%), 14 – 15% входит в состав комплексных соединений с липидами и нуклеотидами. Самое большое содержание магния в миокарде.

Задача №112

При определении мочевины и креатинина у двух пациентов получены следующие результаты:

у 1-го пациента уровень мочевины – 4,6 ммоль/л (норма 1,7 – 8,3 ммоль/л),

креатинина – 160 мкмоль/л (норма 50 – 115 мкмоль/л);

у 2-го пациента уровень мочевины – 10 ммоль/л, креатинина – 100 мкмоль/л.

Задания

1. Какие лабораторные ошибки можно предположить?
2. Назовите методы определения мочевины.
3. Какой главный продукт обмена белков?
4. Как изменяется содержание мочевины при заболеваниях печени и почек?

Эталоны ответов

1. В первом случае предполагается возможность лабораторной ошибки, так как повышение креатинина при нормальном уровне мочевины маловероятно. Полученный результат свидетельствует о необходимости повторения биохимических исследований.
2. Методы: ферментативный уреазный. как более специфичный.
3. Мочевина синтезируется в печени при обезвреживании аммиака, который интенсивно образуется в результате окисления и дезаминирования аминокислот, пуриновых и пиримидиновых азотистых оснований и выводится почками с мочой.
4. Увеличение уровня мочевины в крови – признак нарушения функции почек; снижение характерно для заболеваний печени.

Задача №113

У пациента 22 лет натощак определили уровень глюкозы в крови – 15,0 ммоль/л, в моче – 2,5 ммоль/л.

Задания:

1. О какой патологии можно думать? Причины повышенного содержания уровня глюкозы в крови.

2. Назовите методы определения глюкозы в крови.

3. Назовите гормон, ответственный за утилизацию глюкозы, где он вырабатывается?

4. Что означают термины: гипергликемия, глюкозурия, кетонемия, кетонурия, полидипсия, полиурия?

Эталоны ответов к задаче:

1. О сахарном диабете. Уровень глюкозы в крови увеличивается также при тяжелых поражениях печени, повышенной гуморальной активности щитовидной железы, гипофиза, надпочечников, механическом и токсическом раздражении ЦНС, травмах и опухолях головного мозга, эпилепсии, отравлении окисью углерода, эфиром, ртутью, стрессовых ситуациях, при обильном потреблении углеводов с пищей (алиментарная гипергликемия).
2. Глюкозу в крови определяют глюкозооксидазным методом.
3. Инсулин. Он вырабатывается в β–клетках островков Лангерганса поджелудочной железы. Под действием инсулина уровень глюкозы снижается, так как этот гормон повышает проницаемость клеточных мембран для глюкозы и таким образом увеличивает ее утилизацию.
4. Гипергликемия – повышенное содержание глюкозы в крови; глюкозурия – наличие глюкозы в моче; кетонемия – наличие в крови кетоновых тел; кетонурия – повышенное выделение кетоновых тел с мочой; полидипсия – повышенное потребление жидкости, обусловленное патологически усиленной жаждой, полиурия – повышенное выделение мочи.

Задача №114

У пациента 70 лет с диагнозом «атеросклероз сосудов головного мозга» при исследовании холестерина получен результат 10,3 ммоль/л (норма 0 – 5,2 ммоль/л).

Задания

1. Дайте оценку полученному результату.

2. Как проводится расчет коэффициента атерогенности?

3. Назовите фракции липопротеинов.

4. Назовите требования, предъявляемые к взятию крови для исследования липидного спектра.

Эталоны ответов к задаче

1. Гиперхолестеринемия. Увеличение концентрации холестерина наблюдается при атеросклерозе, сахарном диабете, подпечёночной (механической) желтухе, ожирении, беременности, алкоголизме, ИБС, остром инфаркте миокарда, подагре.

2. Фактор риска рассчитывают исходя из соотношения холестерина атерогенных липопротеинов и холестерина антиатерогенных липопротеинов:

ХС_общ - ХС ЛПВП ХС ЛПНП + ХС ЛПОНП

К = ————————— или ————————————

ХС ЛПВП ХС ЛПВП

3. Фракции липопротеинов: хиломикроны, ЛПВП, ЛПНП, ЛПОНП.

4. Кровь для исследования липидного спектра надо брать натощак, после 12-14 часового голодания, обследуемый должен в течение 2-х недель перед сдачей анализа придерживаться обычного режима питания, взятие крови желательно проводить в одном положении пациента (лучше сидя). На результаты исследования влияет употребление алкоголя. Хранение проб должно быть ограничено по времени.

Задача №115

Для коагулологических исследований предложено в качестве антикоагулянтов использовать 3,8% цитрат натрия, оксалат натрия, гепарин, ЭДТА. Сделайте правильный выбор, объясните.

Задания

1. Антикоагулянт, используемый для коагулологических исследований.

2. Какая посуда необходима для исследования коагулограммы?

3. Механизмы остановки кровотечения.

4. Дайте объяснение терминам «адгезия», «агрегация», «ретракция».

Эталоны ответов к задаче

1. Для коагулологических исследований необходимо брать в качестве антикоагулянта 3,8 % цитрат натрия. Все другие антикоагулянты менее пригодны.

2. Для исследования коагулограммы используют стеклянную силиконированную или пластиковую одноразовую посуду.

3. Существуют 2 механизма остановки кровотечения: сосудисто-тромбоцитарный и гемокоагуляционный.

4. Адгезия – приклеивание тромбоцитов к поврежденной внутренней поверхности эндотелия сосудов; агрегация – скопление тромбоцитов в месте повреждения сосудов; ретракция – сокращение сгустка.

Задача №116

После проведения ЭФ с последующей фиксацией и окраской, лаборант отмыл электрофореграмму 12% уксусной кислотой. Экстинкция окраски всех белковых фракций была очень низкой.

Задания

1. Дайте оценку результатам. С чем связана низкая экстинкция белковых фракций?

2. Виды электрофореза.

3. Какие используются понятия для оценки содержания белка в сыворотке крови?

4. Какие свойства белков позволяют разделить их методом электрофореза?

Эталоны ответов к задаче

1. Отмывку электрофореграмм проводят с целью удаления окраски, адсорбированной плёнкой из ацетата целлюлозы для получения чистого фона. Отмывку электрофореграмм проводится с использованием 5 – 7% раствора уксусной кислоты. Использование для этой цели 12% уксусной кислоты приведет к частичной элюции краски, связанной с белком, и к искажению результатов анализа.

2. Виды электрофореза: электрофорез на плёнках из ацетата целлюлозы, на агарозе, в полиакриламидном геле, иммуноэлектрофорез.

3. Для оценки содержания белка в сыворотке крови используют понятия: гипопротеинемия, гиперпротеинемия, парапротеинемия, диспротеинемия.

4. Разный заряд белков и разная молекулярная масса позволяют разделить белковые молекулы методом электрофореза; характеризуют разную подвижность в электрическом поле.

Задача №117

Концентрация мочевины в сыворотке крови у группы пациентов следующая:

а) 5,48 ммоль/л

б) 2,34 ммоль/л

в) 23,1 ммоль/л

г) 4,59 ммоль/л

Норма 1,7 – 8,3 ммоль/л

Задания

1. Оцените результаты исследования с точки зрения «норма – патология».

2. Назовите методы определения мочевины.

3. Дайте характеристику мочевины.

4. Как изменяется содержание мочевины при заболеваниях печени и почек?

Эталоны ответов к задаче

1. а) норма

б) пониженное содержание мочевины

в) уремия

г) норма

2. Методы: ферментативный уреазный, как более специфичный.

3. Мочевина синтезируется в печени при обезвреживании аммиака, который интенсивно образуется в результате окисления и дезаминирования, аминокислот, пуриновых и пиримидиновых азотистых оснований, и выводится почками с мочой.

4. Увеличение уровня мочевины в крови – признак нарушения функции почек; снижение характерно для заболеваний печени.

Задача №118

При исследовании активности α–амилазы лаборант использовал субстратно–буферный раствор 10-дневной давности, который хранился при комнатной температуре. При добавлении йода к контрольной и опытной пробам они окрасились крайне слабо. Разницы в экстинкциях опытных и контрольных проб не было.

Задачи

1. Назовите причину слабой окраски проб и отсутствии разницы в экстинкциях опыта и контроля.
2. Дайте характеристику α–амилазы.
3. Расскажите, для диагностики какого заболевания определяют активность этого фермента в сыворотке крови и в моче?
4. Какими терминами характеризуется отклонение активности α – амилазы от нормы в сыворотке крови и в моче?

Эталоны ответов к задаче

1. Субстратно–буферный раствор хранится при t +4°C не более 7 дней. Лаборант использовал субстратно–буферный раствор, в котором произошел гидролиз крахмала в результате бактериального загрязнения, поэтому разницы в экстинкции опытных и контрольных проб не было.
2. α–амилаза катализирует гидролиз гликозидных связей крахмала и гликогена. Сыворотка крови человека содержит α–амилазу 2-х изоэнзимных типов: панкреатическую, вырабатываемую поджелудочной железой и слюнную, продуцируемую слюнными железами. Так как молекулярная масса α–амилазы сравнительно низкая по сравнению с другими белками, то она фильтруется в клубочках почек и содержится в моче.
3. Для диагностики острого панкреатита. Так как активность этого фермента сначала повышается в крови, затем в моче, то возможна диагностика в более поздние сроки с момента приступа.
4. Гипоамилаземия, гипоамилазурия, гиперамилаземия, гиперамилазурия.

Задача №119

Больной В. поступил в инфекционное отделение с подозрением на вирусный гепатит. Получены результаты исследований: в сыворотке – билирубин конъюгированный – 82 мкмоль/л (норма 0 – 5,1 мкмоль/л), билирубин неконъюгированный – 27 мкмоль/л (норма до 16,5 мкмоль/л).

Задания

1. Рассчитайте содержание общего билирубина.
2. Проанализируйте, соответствуют результаты исследований предполагаемому диагнозу или нет.
3. поясните, зачем при определении билирубина на каждую опытную пробу ставят свой контроль с сывороткой.
4. Назовите нормы билирубина.

Эталоны ответов к задаче

1. Общий билирубин = конъюгированный + неконъюгированный. Общий билирубин = 82+27=109 (мкмоль/л).
2. Соответствуют, так как при печеночной (паренхиматозной) желтухе отмечается гипербилирубинемия за счет конъюгированной и неконъюгированной фракции.
3. На каждую пробу обязательно надо ставить контроль на сыворотку, чтобы нивелировать интенсивность окраски самой сыворотки.
4. Норма общего билирубина – 5,13 – 20,5 мкмоль/л.

Задача №120

В лаборатории был синтезирован тетрапептид, содержащий в своем составе аминокислоты цистеин, пролин, тирозин, серин. Тетрапептид подвергли ферментативному гидролизу, в результате образовался трипептид, содержащий тирозин, цистеин, пролин.

Задания

1. Назовите ароматическую аминокислоту, входящую в состав тетрапептида.
2. Расскажите, как образуется пептидная связь.
3. Назовите реакцию обнаружения пептидной связи и расскажите ее принцип.
4. Назовите качественные реакции на цистеин и тирозин.

Эталон ответов к задаче

1. В состав тетрапептида входит ароматическая аминокислота тирозин.

2. Пептидная связь образуется между азотом аминогруппы одной аминокислоты и углеродом карбоксильной группы другой аминокислоты. Первичная структура белка стабилизирована пептидными связями.

3. Пептидную связь обнаруживают биуретовой реакцией. Пептидные связи с сульфатом меди в щелочной среде образуют комплекс сине-фиолетового цвета. Интенсивность окраски пропорциональна количеству пептидных связей.

4. Качественная реакция на цистеин – Фоля, на тирозин – Миллона.

Задача №121

У новорожденного ребенка после кормления грудным молоком наблюдались понос и рвота. После перевода ребенка на искусственное вскармливание без молока эти явления прекратились. Возможной причиной заболевания является недостаточность одного из ферментов, участвующих в переваривании углеводов.

Задания

1. Назовите углевод, входящий в состав молока, мономеры и связи, с помощью которых он образован.
2. Дайте краткую характеристику мономерам молочного сахара.
3. Назовите реакцию и принцип обнаружения молочного сахара.
4. Назовите фермент, расщепляющий молочный сахар.

Эталоны ответов к задаче

1. Лактоза, или молочный сахар, состоит из молекул глюкозы и галактозы, связанных между собой α-гликозидной связью. Это важнейший углевод молока.
2. Глюкоза («виноградный сахар») – альдегидоспирт, хорошо растворяется в воде, сладкий на вкус, углеродный скелет состоит из 6 атомов углерода, обладает восстанавливающими свойствами, является основным энергетическим субстратом. Галактоза – альдегидоспирт, хорошо растворяется в воде, сладкий на вкус, углеродный скелет состоит из 6 атомов углерода, обладает восстанавливающими свойствами.
3. Проба Велька. Лактоза в щелочной среде при нагревании с аммиаком дает окрашенное соединение красно-коричневого цвета.
4. Лактаза.

Задача №122

Лаборант приготовил 3 раствора: глюкозы, сахарозы, мальтозы и перепутал этикетки на флаконах с реактивами.

Задания

1. Предложите качественные реакции и последовательность, с помощью которой можно идентифицировать эти растворы.

2. Назовите мономеры и связи, участвующие в образовании сахарозы, лактозы, мальтозы.

3. Расскажите принцип метода обнаружения глюкозы.

4. Расскажите принцип метода обнаружения мальтозы.

Эталон ответов к задаче

1. Реакция Троммера, проба Велька. Реакция Троммера будет отрицательной с сахарозой, а с глюкозой и мальтозой – положительной (так можно определить в каком флаконе находится раствор с сахарозой). С оставшимися двумя растворами надо проделать пробу Велька – она положительна только с мальтозой. Раствор, который даст отрицательную пробу Велька, содержит глюкозу.
2. Сахароза, или тростниковый сахар (свекольный) сахар, состоит из глюкозы и фруктозы. Лактоза, или молочный сахар, состоит из молекул глюкозы и галактозы. Мальтоза, или солодовый сахар, состоит из двух молекул глюкозы. Во всех дисахаридах мономеры связаны гликозидными связями.
3. Глюкоза в щелочной среде при нагревании восстанавливает окись меди в закись, а сама окисляется до глюконовой кислоты. При этом образуется осадок кирпично–красного цвета.
4. Проба Велька. Мальтоза в щелочной среде при нагревании с аммиаком дает окрашенное соединение красного цвета.

Задача №123

В инструкции для определения мочевой кислоты не указана длина волны и номер светофильтра.

Задания

1. Как провести выбор длины волны, необходимой для количественного определения мочевой кислоты?

2. Методы определения мочевой кислоты.

3. Причины повышенного содержания мочевой кислоты.

4. Дайте определения понятиям «гиперурикемия», «подагра».

Эталоны ответов к задаче