Абсорбционная спектроскопия

1. Поглощение раствора, содержащего вещество с молекулярным весом 423 в концентрации 32 мкг/мл, составляет 0,27 при 540 нм в односантиметровой кювете. Чему равен коэффициент молярного погашения при 540 нм? Допустить, что закон Бера соблюдается.

2. Раствор соединения А имеет D260=0,45 и D450=0,03. Раствор второго соединения Б имеет D260=0,004 и D450=0,81. 2 мл раствора А смешали с 1 мл раствора Б. Результирующая оптическая плотность смеси D260=0,3 и D450=0,46. Имеется ли взаимодействие между А и Б? Объяснить. Какое допущение делается, чтобы подтвердить это заключение?

3. Раствор соединения А имеет D260=0,45 и D450=0,03. Раствор второго соединения Б имеет D260=0,004 и D450=0,81. 2 мл раствора А смешали с 1 мл раствора Б. Результирующая оптическая плотность смеси D260=0,3 и D450=0,28. Имеется ли взаимодействие между А и Б? Объяснить. Какое допущение делается, чтобы подтвердить это заключение?

4. Предположим, что вы захотели узнать, сколько цитохрома с содержится в одной клетке Е. coli. Известен молярный коэффициент погашения в максимуме поглощения. Как вы проделаете это измерение?

5. Молярный коэффициент погашения данного соединения 348 при 482 нм. Раствор этого соединения имеет D482=1,6. При разбавлении 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5 и 1:6 величины D482 составляют 1,52, 1,42, 1,05, 0,84, 0,70 и 0,61 соответственно. Какова молярность исходного раствора?

6. Молярные коэффициенты погашения вещества А при 260 и 280 нм равны соответственно 5248 и 3150. Для выделения А используется реагент Б, имеющий молярные коэффициенты погашения 311 и 350 при 260 и 280 нм. После выделения А D260=2,50 и D280=2,00. Какова концентрация А?

7. Белок помещают в 20%-ный раствор этиленгликоля и снимают его дифференциальный спектр против раствора, не содержащего этиленгликоля. При всех длинах волн De=0. Что вы можете заключить о структуре белка?

8. Белок изучают в 20%-ном диметилсульфоксиде и 20%-ной сахарозе. В сахарозе De=0. В диметилсульфоксиде проявляется характерный дифференциальный спектр триптофана. Наблюдаемая величина De удваивается, если белок нагревают в диметилсульфоксиде до 60°С. В 20%-ной сахарозе после нагревания до 60°С величина De.эквивалентна De для 8 триптофановых остатков. Что вы можете сказать об этом белке?

9. В процессе титрования белка при 295 нм найдено, что De295 резко возрастает при рН 9,6. При рН 11,7 De295 возрастает снова, причем это увеличение составляет одну треть от первого. Если затем рН понизить до 6 и далее постепенно увеличивать, кривая зависимости De295 от рН почти идентична кривой белка до титрования, за исключением того, что увеличение De295 составляет только две трети от наблюдаемого вначале. Известно, что в белке имеется восемь тирозиновых остатков. Что вы можете сказать о структуре белка?