Дополнительный материал. Сложные методы окраски основаны на особенностях физико-химического строения микробной клетки

Сложные методы окраски основаны на особенностях физико-химического строения микробной клетки. Сущность этих методов заключается в воздействии на мазок двух или более красящих веществ, из которых одно является основной, главной краской, а другое (ие) дополнительной - контраст. При некоторых методах после воздействия первой краской мазок обесцвечивают и только после этого подвергают дополнительной окраске. В качестве обесцвечивающих веществ может быть применен целый ряд химических реагентов (кислоты, щелочи, спирт, ацетон и др.). Не все виды микробов одинаково относятся к обесцвечивающим реагентам; некоторые являются кислото - и спиртоустойчивыми, другие только кислотоустойчивы. Наконец, некоторые, как, например, споры, энергично противостоящие воздействию всех обесцвечивающих веществ, относятся к группе краскоустойчивых.

Сложные методы окраски имеют важное дифференциально-диагностическое значение для выявления непостоянных структур у изучаемого микроба.

Окраска кислотоустойчивых микроорганизмов. В природе существует группа микроорганизмов, устойчивых к действию кислот, щелочей и спиртов. Они относятся к роду Mycobacterium (возбудители туберкулеза). Химическая структура цитоплазмы и клеточной оболочки этого микроба отличается содержанием значительного количества жировосковых веществ, в частности жирных кислот (в том числе фтиеновой кислоты до 40%), поэтому проникновение красителя в клетку затруднено. Для их окраски используют протравливание (нагревание мазка с красителем над пламенем). Окрасившись, они прочно удерживают краску и не обесцвечиваются кратковременным действием кислоты.