Определение антител, связанных с лейкоцитами

Прямой тест дегрануляции базофилов (ТДБ) основан на дегрануляции базофилов больных аллергией, сенсибилизированных антителами класса IgE под влиянием специфического аллергена. Натощак у больного получают 10 - 15 мл (1 мл – 1 аллерген) крови из вены в пробирку с гепарином (20 ЕД/мл). В лунки планшет для иммунологических исследований вносят по 0,05 мл суспензии лейкоцитов, в опытные лунки - равный объем аллергенов, в контрольные - растворитель. Инкубируют 15 мин при 37 °С и добавляют в каждую лунку по 0,05 мл раствора толуидинового синего. Суспензией заполняют камеру Горяева и подсчитывают количество окрашенных базофилов. В контроле должно содержаться не менее 30 кл. Реакция считается положительной, если число окрашенных клеток в опыте уменьшалось на 30% и более.

Тест активации базофилов - basotest Оценка количества активированных базофилов по уровню экспрессии Cd63 IgE. Оценка результатов теста проводится с помощью метода проточной цитометрии. Интерпретация результатов: в негативном контроле уровень активированных базофилов не превышает 5%.

Реакция бласт-трансформации лимфоцитов (РБТЛ), основывается на том, что при наличии повышенной чувствительности Т-лимфоцитов к аллергенам они трансформируются в молодые клетки - бласты. Если индекс РБТЛ с аллергеном повышается более, чем на 3 % то имеем сенсибилизацию к данному аллергену.

Аллергию замедленного типа на лекарства определяют по наличию сенсибилизации Т-лимфоцитов.

Сенсибилизацию Т-клеток выявляют:

1) по выделению ими цитокинов в реакциях подавления (ингибиции) миграции лейкоцитов, угнетения прилипаемости лейкоцитов;

2) по изменению Т-активного розетко-образования;

3) по усилению пролиферации Т-клеток под влиянием аллергенов - реакция бласттрансформации.

Весь этот набор лабораторных тестов позволяет подтвердить диагноз аллергического заболевания, как в стадии обострения так и в стадии ремиссии.