Задание 6. Познакомьтесь со схемой лабораторной диагностики и типирования C.diphtheriae (см

Познакомьтесь со схемой лабораторной диагностики и типирования C.diphtheriae (см. Приложение № 2).

Проведите 1-ый этап бактериологического исследования материала при выделении коринебактерий дифтерии:

Алгоритм проведения 1 этапа:

1. Произведите забор материала (слизь из зева) друг у друга при помощи стерильного дифтерийного тампона без пробки.

а) зев должен быть ярко освещен и хорошо виден;

б) прижмите язык шпателем и возьмите материал из зева, не касаясь тампоном языка или внутренней поверхности щек.

в) слегка вращая и прижимая тампон, обязательно возьмите материал из налетов, белых пятен или участков воспаления. При наличии налетов постарайтесь из­влечь материал из-под краев, чтобы выделить бактерии, находящиеся в более глубоких слоях ткани.

2. Проведите посев взятого материала.

Ø Посев материала из ротоглотки, носа или других пораженных мест производят на две чашки Петри - с кровяным, а затем с теллуритовым агаром. Для экономии времени и материалов можно производить посев материала от одного лица на одну чашку (1/2 чашки - материал из зева, 1/2 чашки - из носа). При посеве материала из других мест добавляют еще одну чашку. Не допускается посев материала от нескольких лиц на одну чашку.

Ø При посеве материал втирают в среду со всех сторон тампона на участке площадью 2x1 см², затем этим же тампоном или стеклянной сте­рильной палочкой засевают остальную поверхность. Такой метод посева позволяет засеять весь материал с тампона, получить изолированные колонии, непосредственно на чашке для дальнейшей идентификации. Засеянные чашки инкубируют при 37⁰С. Посев производят на среды, согретые при комнатной t или в термостате (15-20 мин).

3.Произведите забор материала (слизь из зева) у того же обследуемого при помощи второго дифтерийного тампона (с пробкой).

Ø Сделайте 2 мазка-отпечатка с этого тампона на 2-х предметных стеклах, высушите на воздухе, зафиксируйте над пламенем горелки и окрасьте один мазок по методу Леффлера (см. Алгоритм окраски МР № 4), а второй - по методу Грама-Синева (что позволяет определить другие возбудители ангины, кроме дифтерийной палочки: спирохеты, веретенообразные палочки, стрептококки и др.). Изучите мазки под микроскопом, зарисуйте в дневник и сделайте предварительное заключение.

Заключение:

Ø Исследуемый материал на этом же тампоне засейте на полужидкую среду обогащения, опустив тампон с материалом в пробирку со средой и поставьте в термостат при 37°С на 18-20 часов.