Постановки реакции Хеддльсона

1. Стекло, на котором производится реакция, расчерчивается на квадраты величиной примерно 4х4см каждый, по горизонтали должно быть 6 квадратов.

2. На первом квадрате стекла записывается номер испытуемой сыворотки, в следующие квадраты разливают (микропипеткой или градуированной пипеткой 1мл) испытуемую сыворотку в следующих дозах: 0,04; 0,02; 0,01; 0,02 (кс).

3. К первым трем дозам сыворотки добавляют пипеткой 0,03мл неразведенного диагностикума.

4. К последней дозе 0,02мл сыворотки добавляют 0,03мл 0,09% раствора хлористого натрия.

5. Сыворотку осторожно смешивают с антигеном стеклянной палочкой, начиная с минимальной дозы сыворотки.

6. Контроль антигена ставят с добавлением 0,03мл 0,9% раствора хлористого натрия к 0,03мл антигена.

7. Затем стекло равномерно подогревают над пламенем спиртовки так, чтобы происходило нагревание всей поверхности стекла примерно до 37⁰С±0,5⁰ (около 2 мин).

8. В случае положительной реакции в первые же минуты появляются ясные хлопья. Максимальный срок наблюдения 8 мин.

9. Учет реакции производят невооруженным глазом. Реакция оценивается как положительная при агглютинации не менее, чем на два плюса (++): незначительное просветление жидкости с заметными хлопьями, т.е. 50% агглютинации.

Для диагностической оценки результатов рекомендуется следующая схема:

а) отсутствие агглютинации во всех дозах сыворотки – реакция «отрицательная»;

б) агглютинация в первой дозе – (0,04мл сыворотки) – результат «сомнительный»;

в) агглютинация во второй или в третьей дозах (0,02-0,01мл сыворотки) – результат «положительный»;

г) агглютинация на 4 плюса во всех дозах сыворотки – результат «резко положительный».

Примечание. Для диагностики бруцеллеза имеет значение только положительный результат реакции. РА должны обязательно ставить одновременно с постановкой аллергической пробы. При наличии сомнительного результат рекомендуется повторная постановка реакции через 7-10 дней. Так как реакция Хеддльсона является только качественной реакцией, то рекомендуется использовать ее только в условиях массового обследования.

Схема