Исследование копрокультуры — выделение возбудителя брюшного тифа

1 день — первичный посев эмульгированных испражнений:

1. На накопительную среду (селенитовый бульон) разлитый в пробирки с последующим высевом на ДДС.

2. На элективную среду (ВСА)

3. На ДДС (Эндо, Плоскирева, Левина). Посевы вносят стеклянной палочкой, растирают шпателем место посева, а затем по поверхности чашки (для изолированных колоний). Помещают в термостат при 37 градусах Цельсия на 48 часов.

2 день — отбор подозрительных колоний и выделение чистой культуры

На ВСА — мелкие, черные колонии (возбудитель тифа).

На ДДС — бесцветные.

Пересев на среду Ресселя, Олькеницкого уколом в столбик и штрихом на поверхность — для выделения чистой культуры и первичной идентификации. Помещают в термостат при 37 градусах Цельсия на 48 часов.

3 день, при наличии характерного роста на среде Ресселя. Лактоза отрицательна — пожелтение столбика, цвет скошенной части не изменяется.

Проверка чистоты культуры — окраска по Граму.

Биохимическая идентификация:

1. Посевы на ряды Гисса (полужидкие или жидкие) — на расщепление сахаров.

2. МПБ с индикаторными бумажками — на индол и сероводород.

Посев в полужидкий агар уколом по Пешкову для определения подвижности. Помещают в термостат при 37 градусах Цельсия на 48 часов.

Серотипирование чистой культуры (со среды Ресселя, Олькеницкого). Проводят путем постановки ОРА сначала со смесью групповых сывороток (АВСДЕ). При положительной ОРА (подтверждает, что выделенная культура относится к сальмонеллам) проводят серотипирование с каждой групповой сывороткой. При положительной ОРА например с сывороткой группы Д, дальнейшее серотипирование проводят с адсорбированными монорецепторными О- и Н-брюшнотифозными сыворотками.

Ответ: антигенная формула выделенной культуры: 9, 12 d Vi — S. Typhi.

Окончательный ответ устанавливают на основании биохимических свойств на четвертый день.