На предметное (рис. 4.4) стекло нанесите (шаг 1) каплю изотонического раствора хлорида натрия (отрицательный контроль), каплю антисыворотки О111:Н24 к антигенам E.coli. В каждую каплю внесите (шаг 2) каплю тестируемой чистой культуры бактерий. При положительной реакции появятся агглютинаты, видимые глазом. Зарисуйте результат.
Рисунок 4.4 Схема РА на стекле для идентификации чистой культуры бактерий
Постановка реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) для определения титра антител (к вирусу кори) в сыворотке крови:
| 1. Устанавливаем в штатив ряд пробирок. Нумеруем пробирки.
| 
|
| 2. Вносим в опытные пробирки по 100 мкл изотонического раствора хлорида натрия.
|
|
| 3. В пробирку 1 вносим 100 мкл исследуемой сыворотки крови.
На этом этапе в пробирке 1 объём внесённых реагентов составляет 200 мкл, в других пробирках остаётся по 100 мкл изотонического раствора NaCl.
|
|
| 4.Перемешиваем содержимое пробирки 1 и переносим из неё в пробирку 2 100 мкл разведённой сыворотки крови. Эту операцию проводим с последующими пробирками. Из пробирки 7 удаляем 100 мкл реакционной смеси.
| 
|
| Во всех пробирках на этом этапе постановки реакции по 100 мкл разведенной изотоническим раствором NaCl сыворотки крови. Но в каждой пробирке другое разведение. Подпишите все полученные разведения сыворотки крови.
|
| 5. В пробирки вносим по 100 мкл эритроцитарного диагностикума.
6. Готовим контроли:
• положительный – 100 мкл эритроцитарного диагностикума + 100 мкл стандартной положительной сыворотки;
• отрицательный – 100 мкл эритроцитарного диагностикума + 100 мкл изотонического раствора NaCl.
7. Проводим инкубацию при + 37°С в течение 1 часа.
8. Результат учитываем по образованию агглютинатов.
|
