Реактивы. 1) Р-р субстрата АсАТ: смесь a‑кетоглутаровой кислоты и аспарагиновой кислоты, 2) р-р субстрата АлАТ: смесь a‑кетоглутаровой кислоты и аланина

1) Р-р субстрата АсАТ: смесь a‑кетоглутаровой кислоты и аспарагиновой кислоты, 2) р-р субстрата АлАТ: смесь a‑кетоглутаровой кислоты и аланина, 3) р-р 2,4‑динитрофенил­гидразина в 1,0 М HCl, 4) 0,4 М р-р NaOH.

Стандартный р-р пировиноградной кислоты, 0,1 ммоль/л.

Материал исследования

Сыворотка крови.

Проведение анализа

	Проба 1, стандартная, мл	Проба 2, опытная для АлАТ, мл	Проба 3, опытная для АсАТ, мл
Субстратный р‑р АлАТ	0,25	0,25	––
Субстратный р‑р АсАТ	––	––	0,25
Стандартный раствор пировиноградной кислоты	0,05	––	––
Сыворотка крови	––	0,05	0,05
	Инкубируют 30 минут при 37°С
2,4‑ДНФГ	0,25	0,25	0,25
	Инкубируют при комнатной температуре в течение 20 минут
NaOH	2,5	2,5	2,5
	Инкубируют при комнатной температуре в течение 10 минут. Колориметрируют опытные и стандартную пробы против воды при 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Активность АлАТ, ммоль/л · ч =

Активность АсАТ, ммоль/л · ч = , где

Е_ст, Е_оп2, Е_оп3 – соответственно оптическая плотность стандартной и опытных проб для АлАТ и АсАТ, С_ст – концентрация стандартного раствора, 2 – коэффициент перевода 30 минут в 1 час.