Количественное определение активности липазы в панкреатическом соке. Влияние желчи на активность липазы

Принцип метода: метод основан на нейтрализации щелочью жирных кислот, образующихся при гидролизе триацилглицеридов липазой. Активность липазы выражается количеством миллилитров 0,1N NaOH, затраченного на титрование (нейтрализацию) свободных жирных кислот, образующихся при гидролизе липидов молока под влиянием 1 мл ферментного раствора.

Ход работы: Отмерить в 3 колбы (№ 1, 2 и 3) по 4 мл молока. Добавить в каждую колбу по 5 капель фенолфталеина и одинаковое количество 0,1 н NaOH до появления красной окраски (щелочь нейтрализует все кислые продукты молока). Добавить в 1-ю колбу 4 мл воды, во 2-ю – 2 мл панкреатического сока и 2 мл воды, в 3-ю – 2 мл панкреатического сока и 2 мл желчи. Все колбы поместить в термостат (38^оС) на 30 мин.

По истечении указанного времени колбы извлечь из термостата и в каждой отметить изменение цвета смеси. Содержимое колб 2-й и 3-й оттитровать 0,1 н NaOH до одинаковой окраски с пробой №1.

Рассчитать активность липазы в колбах 2 и 3 и сделать вывод.

Выполнить следующее:

1. Найти среди перечисленных жирных кислот ненасыщенные. Подобрать для каждой из них соответствующее обозначение:

1. Пальмитиновая а. 16:0

2. Олеиновая б. 18: 0

3. Стеариновая в. 18:1 D 9

4. Линолевая г. 20: 4 D 5,8,11,14

5. Линоленовая д. 18: 2 D 9,12

6. Арахидоновая е. 18: 3 D9,12,15

2. Подберите к каждому типу липидов (1 – 6) и их производных соответствующую специфическую функцию (а – е):