Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Тема: «Організація бактеріологічної лабораторії. Барвники і прості методи фарбування мікроорганізмів. Мікроскопія»
1. Актуальність теми:
Бактеріологічна лабораторія – це найважливіша структура в системі мікробіологічної діагностичної служби практичних лікувальних та діагностичних закладів охорони здоров’я.
Протягом вивчення медичної мікробіології, вірусології та імунології студенти навчаються в учбових бактеріологічних лабораторіях, які оснащені на кафедрі аналогічно практичним лабораторіям. Тому на першому занятті важливо вивчити структуру бактеріологічної лабораторії, її оснащення, організацію робочого місця лікаря-бактеріолога. Крім того студентам надається можливість оволодіти одними із найбільш поширених мікробіологічних методів – виготовлення бактеріальних препаратів із чистих культур мікроорганізмів, фарбуванням бактерій простими методами із застосуванням анілінових барвників та мікроскопії з використанням імерсійних об’єктивів. Все це зумовлює актуальність теми заняття та спрямоване на формування позитивної мотивації її вивчення.
2. Конкретні цілі:
· Аналізувати структуру та функції бактеріологічної лабораторії, її місце в системі практичних лікувальних та діагностичних закладів охорони здоров’я.
· Оволодіти методикою виготовлення бактеріальних препаратів із чистих культур бактерій з використанням простих методів фарбування.
· Засвоїти методику мікроскопії бактеріальних препаратів з використанням імерсійних об’єктивів.
3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція)
Назви попередніх дисциплін | Отримані навики |
Анатомія людини | Аналізувати інформацію про будову тіла людини, системи, що його складають, органи і тканини |
Гістологія, цитологія, ембріологія | Інтерпретувати мікроскопічну та субмікроскопічну структуру клітин |
Медична і біологічна фізика | Трактувати загальні фізичні та біофізичні закономірності, що лежать в основі біологічних процесів. |
Медична біологія | Пояснювати на молекулярно-біологічному та клітинному рівні закономірності біологічних процесів |
Медична хімія | Трактувати загальні фізико-хімічні закономірності, що лежать в основі процесів розвитку клітин |
4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття.
4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття:
Термін | Визначення |
Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія | Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія – це навчальна дисципліна, сукупність наук про походження, еволюцію та властивості патогенних для людини мікроорганізмів, нормальної мікрофлори тіла людини, закономірності взаємодії мікроорганізмів з макроорганізмом, імунну систему та механізми протиінфекційного імунітету, методи діагностики, принципи лікування та специфічної профілактики інфекційних захворювань. |
Бактеріологічна лабораторія | Бактеріологічна лабораторія – це первинний підрозділ в системі мікробіологічної служби практичних лікувальних та діагностичних закладів охорони здоров’я. |
Матеріал | Матеріал – це субстрати, тканини (гній, мокротиння, кров, сеча, фекалії, біоптати тканин тощо), які беруть у хворого чи об’єктів зовнішнього середовища для дослідження з метою виявлення збудників захворювань або антитіл до них (в сироватці крові), тобто для постановки діагнозу інфекційної патології, або виявлення збудників в навколишньому середовищі. |
Препарат-мазок | Препарат-мазок готують на предметному склі із матеріалу або чистих культур мікроорганізмів і досліджують у мікроскопі з метою виявлення збудників захворювань чи дослідження їх морфологічних і тинкторіальних властивостей. Препарат-мазок із бактерій ще називають бактеріальним препаратом. |
Анілінові барвники | Анілінові барвники – це похідні аніліну, які використовують для фарбування мікроорганізмів з метою збільшення їх контрастності та подальшої мікроскопії. |
Імерсійна система | Імерсійна система складається з імерсійного об’єктиву (х 90) та імерсійного масла, яке забезпечує концентрацію променів, що проходять через мікроскопічний об’єкт в об’єктив і, таким чином, забезпечує кращі умови для дослідження мікроорганізмів. |
4.2. Теоретичні питання до заняття:
· Структура бактеріологічної лабораторії, призначення різних підрозділів.
· Організація та оснащення робочого місця лікаря-бактеріолога.
· Методика виготовлення бактеріального препарату-мазку.
· Анілінові барвники та приготування фарбуючи розчинів для фарбування мікроорганізмів.
· Прості та складні методи фарбування мікроорганізмів.
· Світловий мікроскоп, будова, призначення окремих частин.
· Визначення збільшення та роздільної здатності мікроскопа. Імерсійна система.
4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:
· Ознайомитись з принципами організації бактеріологічної лабораторії та правилами роботи в ній.
· Вивчити барвники і фарбуючи розчини, які використовуються в мікробіології.
· Засвоїти методику виготовлення бактеріологічного препарату і фарбування простими методами.
· Оволодіти методами мікроскопічного дослідження бактеріологічних препаратів з використанням імерсійного об’єктиву.
5. Зміст теми:
На практичному занятті студенти вивчають структуру бактеріологічної лабораторії, правила роботи в ній, організацію робочого місця лікаря-бактеріолога, готують мазки із чистих культур стафілокока та кишкової палички, фарбують мазки простими методами (метиленовим синім та фуксином), вивчають методику мікроскопії бактеріальних препаратів із використанням імерсійного об’єктиву. Виконані завдання студенти записують у протокол та підписують його у викладача.
Рекомендації для оформлення протоколу.
Правила роботи в учбовій мікробіологічній лабораторії
У мікробіологічних лабораторіях працюють з матеріалом, що містить мікроорганізми. У зв’язку з цим необхідно дотримуватись правил роботи, які забезпечують її стерильність і запобігання можливості виникнення внутрішньо лабораторних заражень:
1. В лабораторію можна входити в халаті і шапочці.
2. Забороняється вносити в лабораторію сторонні речі.
3. Кожний студент повинен працювати на своєму робочому місці.
4. Робоче місце необхідно утримувати в чистоті.
5. Матеріал для практичної роботи одержує черговий у лаборантській кімнаті і роздає студентам групи в присутності викладача.
6. Використані в роботі інфіковані матеріали, пробірки з культурами бактерій необхідно знезаразити, для чого черговий здає відпрацьований матеріал у лаборантську.
7. Якщо випадково розіб’ється посуд з заразним матеріалом, чи розіллється рідкий заразний матеріал, студент повинен негайно сповістити викладача і разом з ним знезаразити інфіковане місце.
8. Після закінчення роботи студент повинен:
· Здати черговому матеріал, одержаний на початку заняття;
· Здати весь відпрацьований матеріал, який підлягає знезараженню, а також свої посіви у термостат;
· Привести в порядок робоче місце, продезінфікувати його;
· Вимити руки дезінфікуючим розчином і милом.
9. Черговий студент контролює порядок на робочих місцях студентів в групі і здає у лаборантську все, що одержав для роботи на початку заняття.
Структура бактеріологічної лабораторії
1. Приймальна матеріалу.
2. Кабінет лікаря-бактеріолога.
3. Бактеріологічна.
4. Мікроскопічна.
5. Термостатна.
6. Серологічна.
7. Стерилізаційна.
8. Лабораторія поживних середовищ.
9. Мийна.
10. Віварій.
Організація робочого місця лікаря-бактеріолога
1. Бактеріологічна петля.
2. Мікроскоп з освітлювачем.
3. Штатив для пробірок.
4. Пробірка з стерильним фізіологічним розчином.
5. Пастерівська піпетка.
6. Анілінові барвники.
7. Імерсійне масло.
8. Лоточок з мостиком для фарбування мазків.
9. Покривні, предметні скельця.
10. Стерильні мірні піпетки.
11. Фільтрувальний папір.
12. Склограф.
13. Спиртовка.
14. Стакан з дезинфікуючим розчином.
15. Газовий пальник.
16. Стерильні пробірки, чашки Петрі.
17. Дозатори і набори стерильних наконечників.
Методика виготовлення бактеріального препарату-мазку
1. Приготування суспензії бактерій на предметному склі.
2. Висушування суспензії бактерій та одержання мазку.
3. Фіксація мазку. Мета фіксації: вбити мікроби, закріпити їх на склі і забезпечити краще їх фарбування.
4. Фарбування мазку.
5. Промивання.
6. Висушування препарату-мазку.
Анілінові барвники
Для фарбування мікроорганізмів використовують анілінові барвники. Це, в основному, похідні органічних сполук (аніліну та інших). Це порошки, які не розчиняються у воді, але добре розчиняються в органічних розчинниках (спирт, ацетон). Для фарбування мікроорганізмів використовують спиртово-водні розчини.
Анілінові барвники бувають: основні, кислі та нейтральні. Для фарбування бактерій використовують основні барвники. Методи фарбування мікроорганізмів є прості і складні. Прості – коли використовують 1 барвник. Складні – використовують 2 та більше барвників, або 1 барвник та речовини, які не фарбують мікроби, але приймають участь у процесі фарбування.
Анілінові барвники
Колір | Основні | Кислі |
Червоний | Нейтральний червоний Фуксин Сафранін Піронін | Кислий фуксин Еозин |
Фіолетовий | Генціанвіолет Кристалвіолет | |
Синій | Метиленовий синій | |
Зелений | Малахітовий зелений Бриліантовий зелений | |
Чорний | Інулін | Нігрозин |
Жовтий | Конго Аурантія | |
Коричневий | Хризоїдин |
Схема промінів при сухій (А) і масляній (Б) системах;
1-фронтальна лінза об’єктиву; 2-імерсійне масло; 3-предметне скло.
Завдання №1. Приготувати бактеріальні препарати із коків та паличок, пофарбувати простими методами, дослідити в мікроскопі.
Фарбування
метиленовим синім
Чиста культура
Staphylococcus saprophyticus
Фарбування фуксином
Чиста культура
Escherichia coli
Висновок:
7. Питання для самоконтролю:
· Що вивчає медична мікробіологія?
· Яка структура бактеріологічної лабораторії та яке призначення її підрозділів?
· Для чого фарбують мікроорганізми?
· Які властивості мікроорганізмів можна дослідити при мікроскопії пофарбованих препаратів?
· Як готують фарбуючи розчини із анілінових барвників?
· З якою метою роблять фіксацію мазків на предметному склі?
· Яким об’єктивом користуються при мікроскопії бактеріальних препаратів? Які ознаки такого об’єктиву?
· Як розрахувати загальне збільшення мікроскопа?
· Що таке роздільна здатність мікроскопа і чому вона дорівнює?
Дата публикования: 2015-02-20; Прочитано: 2865 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!