Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Обследованию подлежат не только больные, но обязательно все люди в очаге для выявления скрытых форм и бактерионосителей. Забор материала проводится в условиях, обеспечивающих полную безопасность персонала и внешней среды, обязательно медицинским работником. Материал от больного берется индивидуально, от подозреваемых лиц - можно объединять по несколько проб.
Материал для исследования: испражнения, кусочки кишечника от трупов, пищевые продукты, вода, объекты внешней среды. Пересылка материала осуществляется медицинским работником в течение не более 3,5 часов в
системе стекло-впитывающий материал-металл с приложением
сопроводительного письма, в котором указаны паспортные данные больного,
предполагаемый диагноз, время взятия материала, и пометкой
"бактериологическое загрязнение".
Используют два метода: главный - бактериологический, дополнительный -
серологический.
Бактериологическая диагностика: проводят в специальных лабораториях
с соблюдением строгого противоэпидемического режима.
Методы диагностики: классический и ускоренный.
Классическое исследование: проводят поэтапно, через каждые 6 часов.
1-й этап:
а) посев материала для обогащения на 1% пептонную воду;
б) микроскопия материала (окраска по Граму и фуксином);
в) посев материала на щелочной агар и среду TCBS (тиосульфатцитрат-
бромтимоловый синий, сахароза). Посевы помещают в термостат;
2-й этап (через 6 часов):
а) вырастает пленка на пептонной воде, делают пересев на вторую пептонную воду для дальнейшего обогащения;
б) пересев из первой пептонной воды на щелочной агар и среду TCBS;
3-й этап (через 12 часов):
а) исследование роста на второй пептонной воде (аналогично первой);
б) изучение чашек первичного посева: - описание колоний (желтые на TCBS, прозрачные голубоватые на щелочном агаре; - микроскопия; -определение подвижности; - постановка РА на стекле с 0-1, Инаба и Огава сыворотками; - просмотр колоний в стереоскопическом микроскопе (голубоватый цвет); - пересев на двухсахарную лактозо-сахарозную среду. На этом этапе может быть дан предварительный ответ;
4-й этап (через 18 часов) - изучение выросшей культуры:
а) учет изменения лактозо-сахарозной среды (разложение сахарозы в столбике без газа);
б) мазок по Граму;
в) идентификация по ряду признаков:
- для постановки окончательного диагноза и отличия выделенных вибрионов от нехоленых: РА с сывороткой 0-1 (в пробирках); посев на триаду Сахаров Хейберга: сахарозу (+), маннозу (+) и арабинозу (-); определение чувствительности к холерным фагам С4 и Эльтор-2.
- для определения серовара: РА с сыворотками Огава и Инаба (в пробирках).
- для определения биовара холерного вибриона: чувствительность к бактериофагам (классический вибрион - к фагу С4, Эльтор - к фагу Эльтор-2; рост на среде с полимиксином; агглютинация куриных эритроцитов; лизис бараньих эритроцитов.
Три последних теста положительны для вибриона Эль-Тор. Длительность исследования: 36-48 часов в зависимости от скорости обогащения.
Ускоренное исследование подразделяется на ускоренный метод индикации микроба, антигена и ускоренную идентификацию.
1. Ускоренная индикация - поиск микроба непосредственно в материале или после подращивания в пептонной воде следующими методами:
а) микроскопия (по Граму и фуксином и на подвижность);
б) прямая РИФ;
в) р. иммобилизации под действием сыворотки 0-1;
г) РА растущих культур (материал засевается в 2 пробирки с пептонной водой, в одну из них добавляют диагностическую сыворотку, отмечается рост и одновременно склеивание микробов в пробирке с сывороткой);
д) проба с бактериофагами.
2. Поиск антигена в материале серологическими методами:
а) ИФА;
б) РОПГА;
в) РТПГА.
3. Ускоренная идентификация осуществляется на 3-м этапе бактериологического исследования путем изучения свойств выросших колоний (мазок по Граму, р. агглютинации с сывороткой 0-1, посев в малые объемы трех углеводов по Хейбергу, проба с бактериофагом).
Серологическая диагностика: чаще носит ретроспективный характер, помогает в неясных случаях, для выявления переболевших и вибриононосителей. Используют РА, РПГА, а также определение вибриоцидных антител. Рекомендуют использовать парные сыворотки. Положительный ответ получают при наличии высокого титра (в РА-1:180-1:3200) или при нарастании его в парных сыворотках.
Дата публикования: 2015-02-28; Прочитано: 1040 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!