Метод исследования

Основные гематологические показатели

RBC (Red Blood Cells) - число эритроцитов в единице объема, обычно в 1 мкл. Нормальные значения 4 - 9 х 10 6. Значения ниже 4 х 10 6 указывают на наличие анемии.
Кровь, в которой подсчитываются эритроциты, предварительно разводится прибором и содержит, кроме эритроцитов, еще лейкоциты и тромбоциты. Поскольку содержание красных клеток значительно превышает количество лейкоцитов, этим фактором пренебрегают и лейкоциты подсчитываются вместе с эритроцитами.

WBC (White Blood Cells) - число лейкоцитов в единице объема, обычно в 1 мкл. Нормальные значения колеблются от 3 до 11 х 10 3. Значения ниже 4 х 10 3 указывают на наличие лейкопении, выше - лейкоцитоза. Подсчет лейкоцитов осуществляется прибором после лизиса эритроцитов.

PLT (Platelet) - число тромбоцитов в единице объема, обычно в 1 мкл. Нормальные значения 150 - 400 х 10 3. Значения ниже 150 х 10 3 указывают на тромбоцитопению. Автоматические счетчики крови анализируют тромбоциты и эритроциты в одной камере без предварительной обработки.

HGB (Hemoglobin) - концентрация гемоглобина. В большинстве автоматических анализаторов показатель определяется спектрофотометрически гемоглобинцианидным методом.
HCT (Hematocrit) - гематокрит - часть объема крови, приходящаяся на долю эритроцитов. Обычно выражается в %.

MCV (Mean Corpuscular Volume) - отношение объема эритроцитов к их числу в определенном объеме крови. Показатель МС V изменяется в течение жизни. МС V ниже 80 фл оценивается как микроцитоз, выше 95 - как макроцитоз.
В автоматических счетчиках MCV вычисляется делением суммы клеточных объемов на число эритроцитов.

MCH (Мean Corpuscular Hemoglobin) - c реднее содержание гемоглобина в эритроците. МСН - отношение количества гемоглобина в 100 мл крови к числу эритроцитов в том же объеме крови. Поскольку содержание гемоглобина сравнительно постоянная величина, вариации МСН в основном определяются величиной МС V. Поэтому данный показатель самостоятельного значения не имеет и всегда соотносится с МС V.

МСНС (Мean Corpuscular Hemoglobin Concentration) - количество гемоглобина (в г) в 100 мл эритроцитов (36 г в 100 мл - предельная загрузка эритроцита гемоглобином при нормальном объеме клетки). Большее количество гемоглобина в эритроците возможно в результате увеличения его объема. МСНС представляет собой не процент, а отношение веса к объему, касается не одного эритроцита, а 100 мл эритроцитарной массы.

RDW (Red Cell Distribution Width) - распределение эритроцитов по размерам. RDW дает количественную оценку разброса эритроцитов по объему, т.е. наглядно в цифрах помогает оценить степень анизоцитоза. Гистограмма графически отражает частоту встречаемости эритроцитов разного объема. Обычно гистограмма имеет унимодальную форму, т.е. форму одиночного пика. При увеличении RDW гистограмма становится более широкой в основании с сохранением формы. При некоторых заболеваниях гистограмма может иметь более сложную форму.

МРV (Mean Platelet Volume) - средний объем тромбоцитов - этот показатель дает информацию о размерах тромбоцитов (макро или микротромбоцитопения). У практически здоровых лиц MPV находится в обратной зависимости от числа тромбоцитов. MPV увеличивается с возрастом.

РСТ (Platelet Crit) - тромбоцитарная масса или тромбокрит - отражает процент количества тромбоцитов от массы цельной крови. Этот показатель вычисляется либо суммированием прямо измеренных объемов тромбоцитов, либо умножением среднего объема тромбоцитов на их содержание в единице объема крови.

PDW (Platelet Distribution Width) - распределение тромбоцитов по размерам - коэффициент вариации кривой распределения тромбоцитов. Основными методами измерения для приборов первого класса является кондуктометрия для подсчета клеток и цитохимия для определения уровня гемоглобина. Еще недавно исключительным методом для такой дифференциации было лазерное светорассеяние. Однако в последнее время совершенствование технологий, и в том числе применение методик не лазерного светорассеяния, позволяют добиться результатов, сопоставимых с результатами, получаемыми на приборах, основанных на лазерном принципе подсчета. Это обстоятельство существенно изменило ценовую ситуацию в данной популяции приборов, что позволило производить приборы с хорошими характеристиками и достаточно низкой ценой.

Для определения субпопуляции ретикулоцитов используется лазерная флюороцитометрия, которая в некоторых приборах дополняется цитохимией для выявления дополнительных параметров. Следует учитывать, что большинство фирм-производителей в технических спецификациях указывают не только методы детекции, но и другие технологии, используемые прибором, например, методы разведения или лизиса клеток. Кроме того, приборы могут дополняться и другими каналами, например, для определения CRP используется турбодиметрия

Границы нормальных значений для гематологических показателей

Параметры	Единицы измерения	Интервал значений
WBC	10?/мкл	4.0 - 9.0
Лимфоциты	%	19 - 37
	10?/мкл	1.2 - 3.0
Моноциты	%	3.0 - 11.0
	10?/мкл	0.1 - 0.6
Гранулоциты	%	47 - 72
	10?/мкл	2.0 - 5.5
RBC	106/мкл	3.9 - 5.0
HGB	г/дл	11.0 - 16.0
HCT	%	36 - 48
MCV	фемтолитр (10-15л)	75 - 95
MCH	пикограмм (10-12г)	24 - 34
MCHC	г/дл	30 - 38
RDW	%	11.5 - 14.5
PLT	10?/мкл	150 - 400
MPV	фемтолитр (10-15л)	7.4 - 10.4
PCT	%	0.15 - 0.40
PDW	%	10 - 20

3. Производительность
Помимо структуры исследований важным вопросом является производительность приборов. Приборы первых двух классов производят до 60 анализов в час. Приборы старшего класса имеют производительность от 60 до 120 анализов в час. Скорость работы приборов лимитирована как самой методикой исследования, так и особенностями подготовки проб.

4. Пробоподготовка
По способу подготовки проб гематологические анализаторы делятся на две большие группы.

К первой относятся полуавтоматические анализаторы, в которых подготовка проб отделена непосредственно от анализа и производится в специальных приборах - дилютерах. Использование такой раздельной схемы приводит как комтаминации проб, так и к значительному увеличению времени на их подготовку.

Вторая группа - полностью автоматические анализаторы - в свою очередь делится на еще две группы. Приборы первой группы позволяют работать только с предразведенной кровью, вторая группа анализаторов может работать непосредственно с цельной кровью. Для гематологического анализа может использоваться как капиллярная, так и венозная кровь. Использование венозной крови с точки зрения аналитической точности более предпочтительно. Однако возможность широкого применения анализа венозной крови ограничивается отсутствием в обращении закрытых систем взятия материала и высокой инвазивностью самой методики взятия крови.

Некоторые анализаторы, обычно старших классов, позволяют работать с венозными пробирками, не открывая крышки. Это возможно благодаря использованию специальных штативов, позволяющих анализатору работать в нужном режиме. Другие анализаторы работают с открытыми пробирками, что позволяет собирать кровь как из венозной, так и из капиллярной пробирки. Некоторые системы оборудованы мини-штативами, которые позволяют сочетать оба метода.

5. Объем пробы
Современные гематологические анализаторы используются для анализа от 10 до 300 микролитров цельной крови. Более низкие объемы крови позволяют использовать систему в педиатрии, а также более экономно расходовать кровь, что дает возможность проведения повторных исследований. Кроме того, более низкие объемы проб снижают потребление реагентов.

6. Реагентная база
Помимо подготовки проб большое значение имеет реагентная база. Количество разных реагентов, используемых анализатором, существенно влияет на себестоимость и качество исследований. Анализаторы младших классов могут работать как реагентами, произведенными фирмой-изготовителем, так и с реагентами других производителей, что обычно не сказывается на аналитическом качестве исследования, но может существенно повлиять на работоспособность прибора.

Статистически показано, что анализаторы, работающие на реагентах сторонних производителей, чаще ломаются и требуют большего внимания инженеров, кроме того, многие поставщики отказываются от технического обслуживания анализаторов в том случае, если лаборатории используют сторонние реагенты. На некоторых анализаторах установлены специальные защитные системы, не позволяющие использовать сторонние реагенты. Важной является возможность поставки безцианидных реагентов, используемых в цитохимической части исследования.

7. Система представления информации
Другим важным аспектом при выборе анализатора является формат представления результатов. Обычной формой предоставления результата являются абсолютные и относительные показатели, а также гистограммы и флаги. Использование флагов и гистограмм существенно упрощает расшифровку результатов анализа. Наличие у приборов специальных интерфейсов, позволяющих выводить информацию на принтер, внутри лабораторную сеть или отдельно стоящий компьютер, является в настоящее время обязательным требованием. Также важным является сохранение результатов исследования в памяти прибора.

8. Система контроля качества
Большой проблемой по работе с гематологическими анализаторами является система контроля качества исследований. Большинство программ контроля качества, используемые современными гематологическими анализаторами, не отвечают российским стандартам. Gem-2005 - новый программный продукт, совмещающий в себе и лабораторный журнал и контроль качества, к тому же не требующий ручного ввода данных.

9. Совокупная стоимость владения
Наконец, при выборе анализатора большое значение имеет его стоимость. Однако помимо непосредственно стоимости анализатора, стоит обратить особое внимание на стоимость реагентов и расходных материалов. Расчет спецификации, особенно для приборов имеющих возможность выбора режима работы (CBC/5DIFF/RET), достаточно сложен и лучше, если его осуществит менеджер компании поставщика. При этом стоит обращать внимание на то, учтены ли в расчетах все режимы работы анализатора (анализ, Start-up, Stand-by, Autocleaning), включены ли в стоимость контроли и расходные материалы (например, пробирки) в необходимых количествах.

Таким образом, при выборе гематологического анализатора следует учитывать целый ряд факторов:

• Измеряемые параметры
• Метод исследования
• Производительность прибора
• Автоматическая или полуавтоматическая подготовка проб
• Объем пробы
• Реагентная база
• Удобная система выдачи информации
• Наличие программы контроля качества
• Совокупная стоимость владения

Кроме того, существует ряд факторов, которые чрезвычайно трудно объективизировать. Например, таким фактором является эргономичность и простота работы с прибором. Однако существуют несколько показателей, свидетельствующих о том, что прибор будет удобен в работе: наличие штативов для пробирок, автоматическое доразведение и повторный анализ проб при наличии определенных флагов, автоматическая промывка самплера и т.д. Поэтому следует тщательно изучить все особенности прибора, запросить официальные спецификации производителя, а также поинтересоваться мнением коллег.