Видовий склад та популяційний рівень мікроорганізмів порожнини товстої кишки білих щурів за перорального введення ніпазолу

Контрольну групу тварин складали 26 статевозрілих білих щурі обох статей. Проведені нами мікробіологічні дослідження виявили у складі мікрофлори порожнини товстої кишки інтактних тварин бактерії 15 родів (табл. 3.1).

За індексом сталості (С%) та показником частоти виявлення (Р_і) виділені мікроорганізми порожнини товстої кишки можна розташувати в такому порядку: бактерії родів Bacteroides, Bifidobacterium, Lactobacillus, Escherichia, Enterococcus, Staphylococcus (С% – 100,0 %; Р_і – 0,10), Eubacterium (С% – 76,9%; Р_і – 0,08), Fusobacterium (С% – 53,8%; Р_і – 0,06), Prevotella (С% – 50,0%; Р_і – 0,05).

Таблиця 3.1

Видовий склад та показники мікрофлори порожнини товстої кишки

контрольних тварин (білих щурів)

Мікроорганізми	Кількість тварин (n = 26)	Виділено штамів (n)	Індекс сталості (С%)	Показник частоти виявлення (Рі)
Bacteroides			100,0	0,10
Prevotella			50,0	0,05
Bifidobacterium			100,0	0,10
Lactobacillus			100,0	0,10
Eubacterium			76,9	0,08
Fusobacterium			53,8	0,06
Clostridium			15,4	0,02
Peptococcus			34,6	0,04
Peptostreptococcus			38,5	0,04
Escherichia coli лактозопозитивні			100,0	0,10
Proteus			26,9	0,03
Enterococcus			100,0	0,10
Staphylococcus			100,0	0,10
Streptococcus			26,9	0,03
Candida			34,6	0,04

Бактерії родів Peptostreptococcus (С% – 38,5%, Р_і – 0,04), Peptococcus (С% – 34,6%, Р_і – 0,04) та гриби роду Candida (С% – 34,6%, Р_і – 0,04) виявлялися у даному біотопі з меншою частотою. Рідко з вмісту порожнини товстої кишки висівалися представники родів Proteus і Streptococcus, Clostridium (С% – 26,9%, Р_і – 0,03; С% – 15,4%, Р_і – 0,02, відповідно).

Таким чином, до резидентних бактерій, які персистують у порожнині товстої кишки інтактних білих щурів, належать бактерії родів Bacteroides, Bifidobacterium, Lactobacillus, Escherichia, Enterococcus, Staphylococcus, Eubacterium, Prevotella, Fusobacterium. Представники родів Peptococcus, Peptostreptococcus, Candida можна віднести до факультативної мікрофлори товстого кишечника, які визначаються нечасто. Бактерії родів Proteus, Streptococcus та Clostridium зустрічаються рідко.

Проведено дослідження впливу антимікробного консерванту ніпазолу у концентрації 10 мг/кг на видовий склад та популяційний рівень мікрофлори порожнини товстої кишки. Ніпазол вводили у вигляді водно-гліцеринового розчину внутрішньошлунково. Динаміку зміни мікробоценозу порожнини товстої кишки досліджували через 4, 7, 11, 14 діб з моменту його введення.

Результати дослідження впливу ніпазолу на кількісний та якісний склад мікрофлори порожнини товстої кишки білих щурів наведено у табл. 3.2.

Одержані результати дають змогу стверджувати, що у складі мікрофлори контрольної групи тварин найвищий популяційний рівень мають бактерії родів Bacteroides, Prevotella, Bifidobacterium, Lactobacillus, Eubacterium, Fusobacterium, Peptococcus, Peptostreptococcus, Enterococcus. Значно меншою є кількість мікробних клітин у вмісті товстої кишки бактерій родів Clostridium та Proteus. Лактозонегативні види роду Escherichiа та бактерії роду Klebsiella у складі мікрофлори товстої кишки інтактних тварин не зустрічаються.

Таблиця 3.2

Популяційний рівень мікрофлори порожнини товстої кишки білих щурів

за впливу 10 мг/кг ніпазолу

Мікроорганізми	Кількість мікроорганізмів, lg КУО/мл
Контроль	4 день	7 день	11 день	14 день
Bacteroides	9,17±0,68	9,24±0,25	9,08±0,32	8,78±0,35	8,70±0,34
Prevotella	9,03±0,34	8,90±0,47	8,87±0,45	9,19±0,57	9,48±0,78
Bifidobacterium	8,88±0,51	7,00±0,32*	4,78±0,22***	4,0±0,21***	3,0±0,17***
Lactobacillus	9,14±0,56	9,22±0,63	8,90±0,34	7,41±0,44	8,62±0,33
Eubacterium	8,74±0,38	8,49±0,33	8,15±0,25	7,18±0,32	7,01±0,48
Fusobacterium	8,23±0,24	7,90±0,39	8,30±0,24	8,60±0,65	8,81±0,41 **
Clostridium	3,30±0,15	3,70±0,42	3,93±0,39	4,88±0,31 **	4,90±0,16 **
Peptococcus	9,09±0,22	9,30±0,38	9,18±0,65	8,48±0,48	8,14±0,34
Peptostreptococcus	8,88±0,53	8,48±0,24	8,0±0,50	8,95±0,37	8,75±0,51
Escherichia coli лактозопозитивні	5,65±0,25	4,93±0,14	4,70±0,34	4,00±0,28**	3,18±0,12***
Escherichia coli лактозонегативні	0,00	5,09±0,20*	5,58±0,31**	6,14±0,23**	6,84±0,24***
Proteus	3,23±0,19	4,80±0,33***	4,86±0,22***	5,70±0,21***	7,11±0,23***
Klebsiella	0,00	3,90±0,23***	4,43±0,26***	4,56±0,21***	4,80±0,38***
Enterococcus	8,03±0,49	7,00±0,24	5,18±0,27**	4,98±0,19**	3,75±0,14**
Staphylococcus	5,08±0,26	6,04±0,31*	6,37±0,24**	6,90±0,27***	7,13±0,27***
Streptococcus	6,24±0,32	5,99±0,39	6,11±0,20	5,85±0,33**	6,10±0,34**
Candida	6,98±0,34	5,50±0,42	4,22±0,19	4,32±0,28	4,03±0,15

Примітка: вірогідність між вказаними групами ^* - р<0,05, ^** - р<0,01, ^***- р <0,001

Введення тваринам ніпазолу у досліджуваній концентрації призводить до зниження популяційного рівня автохтонних облігатних бактерій родів Bifidobacterium, Enterococcus, Escherichia та грибів роду Candida на 4 день дослідження, представників родів Eubacterium, Peptostreptococcus на 7 день та Peptococcus і Lactobacillus на 11 день експерименту, порівняно з таким у контрольних тварин. До 14 дня дослідження після такого зменшення знову зростає чисельність тільки бактерій родів Lactobacillus і Peptostreptococcus до значення, близького в інтактних тварин.

Відбувається збільшення кількості у складі порожнинної мікрофлори на 4 день введення консерванту представників родів Proteus, Staphylococcus, а на 7 та 14 дні ще і бактерій родів Clostridium та Fusobacterium, відповідно, порівняно з чисельністю даних мікроорганізмів у інтактних щурів.

Крім того, на 4 день дослідження відбувається контамінація порожнини товстої кишки лактозонегативними представниками роду Escherichia та бактеріями роду Klebsiella.

Як свідчать обчислені нами показники на основі одержаних даних (табл. 3.3), на 7 та 11 день введення ніпазолу спостерігається зменшення індексу сталості бактерій роду Eubacterium на 10,3% і 43,6%, відповідно, порівняно з контролем. На 11 і 14 дні експерименту цей показник знижується на 33,4% і для мікроорганізмів Bifidobacterium та лактозопозитивних представників роду Escherichia.

На 4 день введення консерванту спостерігається зростання індексу сталості бактерій родів Clostridium і Proteus у 2,2 та 2,5 рази, відповідно, порівняно з контролем (див. табл. 3.3). Також відбувається збільшення індексу сталості представників роду Prevotella, який на 14 день становить 100,0%, тобто на 50% більше, порівняно з контролем.

При цьому відбувається контамінація порожнини товстої кишки досліджуваних тварин на 4 день дослідження лактозонегативними представниками роду Escherichia (C% – 66,6%, P_i – 0,05) та бактеріями роду

Таблиця 3.3

Вплив 10 мг/кг ніпазолу на склад мікрофлори порожнини

товстої кишки білих щурів

Мікроорганізми	Показники	Основні групи білих щурів (по 3 тварини)
Контроль	4 день	7 день	11 день	14 день
Bacteroides	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Prevotella	C%; Pі	50,0; 0,05	33,3; 0,03	66,6; 0,05	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Bifidobacterium	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	66,6; 0,05	33,3; 0,03
Lactobacillus	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Eubacterium	C%; Pі	76,9; 0,08	100,0; 0,08	66,6; 0,05	33,3; 0,03	33,3; 0,03
Fusobacterium	C%; Pі	53,8; 0,06	66,6; 0,05	66,6; 0,05	66,6; 0,05	66,6; 0,05
Clostridium	C%; Pі	15,4; 0,02	33,3; 0,03	33,3; 0,03	66,6; 0,05	66,6; 0,05
Peptococcus	C%; Pі	34,6; 0,04	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03
Peptostreptococcus	C%; Pі	38,5; 0,04	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03
Escherichia coli лактозопозитивна	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08	66,6; 0,05
Escherichia coli лактозонегативна	C%; Pі	0,0; 0,0	66,6; 0,05	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Proteus	C%; Pі	26,9; 0,03	66,6; 0,05	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Klebsiella	C%; Pі	0,0; 0,0	33,3; 0,03	66,6; 0,05	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Enterococcus	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Staphylococcus	C%; Pі	100,0; 0,10	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08	100,0; 0,08
Streptococcus	C%; Pі	26,9; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03
Candida	C%; Pі	34,6; 0,04	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03	33,3; 0,03

Примітка: С% – індекс сталості, P_і – показник частоти виявлення.

Klebsiella (C% – 33,3%, Pi – 0,03).

Отже, у експериментальних тварин під впливом введення ніпазолу у досліджуваній дозі спостерігаються зміни не тільки складу мікробоценозу порожнини товстої кишки, а й співвідношення в ньому різних мікроорганізмів. Константними представниками мікрофлори порожнини товстої кишки за даних умов, порівняно з такими в інтактних тварин, стають мікроорганізми родів Clostridium, Prevotella, Proteus, Klebsiella і лактозонегативні представники роду Escherichia.