Определение спектра чувствительности бактерий к фагу

Спектр литического действия фага – это способность бактериофага заражать и вызывать лизис определенного круга бактерий. По наличию фагов, например, в воде, можно косвенно судить о присутствии в ней тех или иных бактерий-хозяев. Определение спектра литического действия используют при эпидемиологическом анализе вспышек инфекционных заболеваний. Исследование спектра литического действия фага может быть полезно при определении пути попадания данного фага на производство, а также при выборе способов придания клеткам признака фагоустойчивости.

Спектр литического действия фага можно охарактеризовать по индексу чувствительности культур – доле бактериальных культур,лизирующихся данным фагом,по отношению к общему числу испытанных штаммов. Этим показателем можно пользоваться при сравнении спектров литического действия нескольких фагов.

Определить спектр литического действия можно несколькими способами:

Способ 1:

На поверхность 1,5%-ой агаризованной питательной среды в чашке Петри с помощью бактериологической петли наносят культуры исследуемых бактерий медальонами. В центре каждого медальона с помощью пастеровской пипетки наносят каплю исследуемого фага. Чашки помещают в термостат с температурой 28ºС. Результаты учитывают через 24 часа. О способности тестируемого фага вызывать лизис исследуемых бактерий судят по наличию зон лизиса в местах нанесения суспензии фага.

Способ 2:

На поверхность 1,5%-ой агаризованной питательной среды в чашке Петри пипеткой наносят каплю исследуемого фага, втирают с помощью шпателя, затем наносят каплями исследуемые бактериальные культуры в стационарной фазе роста. Чашки помещают в термостат с температурой 28ºС. Результаты учитывают через 24 часа. О способности тестируемого фага вызывать лизис исследуемых бактерий судят по отсутствию роста чувствительных к исследуемому фагу бактерий.