Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Задание.1. Отобрать девственных самок. 2. Поставить скрещивание в соответствии с разработанным заданием.3. Получить F1 и проанализировать его. 4. Поставить на скрещивание мух F1. 5. Получить F2 и проанализировать его.
Материал и оборудование. 1. Стаканчики со средой — по 2 на каждого студента для получения F1 и по 4...6 для получения F2. 2. Соответствующие мутанты и мухи дикого типа. 3. Оборудование, необходимое для работы с дрозофилой.
Пояснения к заданию
Отбор девственных самок. Для постановки опытов по скрещиванию необходимо в качестве материнских форм брать заведомо девственных самок не старше 8... 10 ч после вылупления. С этой целью в пробирках, где идет размножение соответствующих линий мух, удаляют родительские особи и вылетевших из куколок мух. Через 6...8 ч пробирки или стаканчики просматривают, и если появились молодые мухи, их усыпляют, отделяют самцов от самок, помещают в отдельные пробирки с питательной средой. Там они могут находиться в течение 2...4 сут. По мере надобности их используют для скрещивания.
При проведении занятий эту работу удобно организовать следующим образом. За 4...8 ч до начала занятий из пробирки удаляют всех мух. Пробирку с куколками ставят в термостат с температурой 24...26° С на 4...8 ч. Мух, вылетевших из куколок за этот период, используют для скрещивания.
Желательно в каждом случае ставить реципрокные (прямые и обратные) скрещивания. Гибриды F1, как и обычные линии, размножаются внутри себя без отбора девственных самок, поэтому после анализа гибридов F1 самцов и самок помещают в пробирки со свежей средой для получения F2. На протяжении всего опыта, а он от момента постановки скрещивания и до получения F2 продолжается 20...24 дня, следует внимательно следить за состоянием мух и обеспечить все условия для их нормального развития.
При проведении моногибридного скрещивания в качестве одной из родительских форм следует взять линию дикого типа Normal, а в качестве второй родительской формы можно взять одного из мутантов — Lobe, vestigial, cinnabar, ebony, brown, curved и др. (см. табл.2).
Весьма удобно провести следующие реципрокные скрещивания, позволяющие изучить наследование доминантных и рецессивных признаков:
♀ Normal ♂ Lobe
♀ Lobe ♂ Normal
♀ vestigial ♂Normal
♀ Normal ♂ vestigial
Выполнение задания
1. Вначале следует составить схему и определить теоретически ожидаемое наследование признаков F1 и F2 (табл.3).
Таблица 3. Схема моногибридного скрещивания
♀ Lobe ♂ Normal
РР: ♀ ♂
Гаметы РР: ♀ L ♂ +
F1
Гаметы F1
♀ vestigial ♂Normal
РР: ♀ ♂
Гаметы РР: ♀ vg ♂ +
F1
Гаметы F1
♂ ♀ | L | + | ♂ ♀ | + | vg | |
L | + | |||||
+ | vg |
2. Ознакомиться с разделом данного пособия «Наркотизация мух».
3. В соответствии с подобранной комбинацией скрещивания 2...3 девственные самки поместить вместе с 3...5 самцами в стаканчик со свежей средой.
4. Через 10..12 дней после постановки опыта, когда в стаканчике начнется массовый вылет мух F1, их следует усыпить и проанализировать. Все они как в прямом, так и в обратном скрещивании будут одинаковыми по признаку формы глаз — глаза у них будут лопастными, как и у доминантного родителя. Если скрещивают мух дикого типа с рецессивным мутантом vestigial, то в F1 они все будут иметь нормальные крылья.
3. В каждой комбинации для получения F2 следует среди анализируемых мух F1 отобрать 2...3 самки и 3...5 самцов и поместить в пробирки со свежей средой. В каждой комбинации для получения F2 поставить по 2...3 пробирки и более.
6. Через 10... 12 дней в стаканчиках начинается массовый вылет мух F2. Их следует усыпить в эфиризаторе и проанализировать на матово-белом стекле. При внимательном просмотре отделить и подсчитать мух с лопастными глазами (Lobe). В соответствии со схемой опыта (табл.3) их будет примерно 3/4 от общего числа. Затем отделить и подсчитать мух с нормальными глазами. Их будет примерно ¼ от общего числа. Результаты подсчета занести в таблицу (табл.4).
Таблица 4. Результаты гибридологического анализа при моногибридном и возвратном скрещивании
Линия или гибрид дрозофилы | Проанализировано особей | Расщепление | |||
Всего | В том числе | теоретически ожидаемое | фактически полученное | ||
Lobe | Normal | ||||
♀ Normal | Нет | - | |||
♂ Lobe | Нет | - | |||
F1 Normal Lobe | Нет | Единообразие | |||
F2 Normal Lobe | 3: 1 | 3: 1 | |||
Беккроссы: | |||||
F1 Lobe | Нет | Не ожидается | Нет | ||
F1 Normal | 1: 1 | 1: 1 |
7. Одновременно можно провести опыт по возвратному скрещиванию. Для этого в F1 отобрать девственных самок и поместить их в пробирки вместе с самцами одной из родительских форм (доминантной или рецессивной).
Анализ мух от возвратного скрещивания F1 с доминантной родительской формой показывает, что все они имеют лопастные глаза, как и мутанты Lobe. В скрещивании F1 с рецессивной родительской формой (анализирующее скрещивание) 1/2 часть мух имеет лопастные глаза, a 1/2 — нормальные. Такой результат скрещивания свидетельствует о том, что мухи F1 гетерозиготны.
Таким же образом могут быть проведены скрещивания и проанализированы гибриды Normal с любым мутантом, у которого соответствующий ген локализован в I, II, IIIили IV хромосомах.
Дата публикования: 2014-11-19; Прочитано: 1495 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!