Студопедия.Орг Главная | Случайная страница | Контакты | Мы поможем в написании вашей работы!  
 

Методы диагностики вирусных инфекций и их характеристика



Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используются цитологический (точнее – цитоскопический), вирусологический, серологический (как правило, метод парных сывороток для выявления нарастания титра специфических антител) и молекулярно-генетический (ПЦР) методы.

Вирусологический метод заключается в выделении вируса из патологического материала и его идентификации.

Культивировать вирусы можно в курином эмбрионе, культуре клеток, в организме лабораторного животного.

Выявление наличие вируса в системе культивирования называется индикацией, определение типа выделенного вируса – идентификацией, которая проводится с помощью серологических реакций.

Для культивирования вирусов используются 5-7-девные, реже – 10-11-дневные куриные эмбрионы.

Наиболее часто куриный эмбрион заражают патологическим материалом одним из пяти основных способов: на хорион-аллантоисную оболочку, в хорион-аллантоисную полость, в полость желточного мешка, в полость амниона, в тело эмбриона.

О репликации вируса в курином эмбрионе свидетельствуют гибель эмбриона, морфологические изменения эмбриона или его оболочек, положительная реакция агглютинации с жидкостью из той полости, в которую производилось заражение.

Для идентификации вируса, выделенного путем культивирования в курином эмбрионе, используют реакцию нейтрализации (в том числе ее разновидность – реакцию торможения гемагглютинации), реакцию связывания комплемента.

Чаще всего для культивирования вирусов используют однослойные перевиваемые культуры клеток.

Вирусы, реплицируясь в них, могут оказывать цитопатическое действие – любое изменение клеток монослоя, включая бляшкообразование и цветную пробу. Кроме этого для индикации можно ставить реакцию гемадсорбции, а также РИФ. В последнем случае одновременно с индикацией проводится и идентификация вируса.

Феномен бляшкообразования проявляется, когда на зараженный вирусом монослой клеток помещают слой агара с добавлением индикатора (чаще всего – обесцвеченного фуксина). Вирус, выйдя из пораженной клетки, в этом случае может поразить только рядом лежащие клетки и за ограниченное время сформирует локальное скопление погибших клеток, которые вследствие отсутствия метаболизма не будут изменять цвет агара. Живые же клетки, накапливающие в процессе метаболизма кислые продукты, будут восстанавливать фуксин, который окрасить агар в красный цвет. Бесцветные зоны и называются бляшками. Их морфология может зависеть от вида вируса, а по их количеству можно рассчитать концентрацию вируса в исходном материале.

Феномен цветной пробы имеет тот же принцип, только меняется (в случае отсутствие вируса) цвет культуральной жидкости. В случае репродукции вируса, убивающего культуру клеток, их метаболизм прекращается, кислые продукты не образуются и, так как рН среды не сдвигается в кислую сторону, индикатор, присутствующий в культуральной среде, не изменяет цвет.

Кроме РИФ для идентификация вируса, культивируемого в культуре клеток, можно использовать реакцию нейтрализации (в том числе ее разновидность – реакцию торможения гемадсорбции), а также реакцию связывания комплемента.

Вид животного, использующегося для вирусологического метода исследования (диагностики), а также способ его заражения, зависит от вида выделяемого вируса.

О репликации вируса в организме животного свидетельствует заболевание или гибель последнего.

Для идентификации выделенного вируса используется реакция нейтрализации.

Экспресс-методы диагностики вирусных инфекций можно условно классифицировать на две группы: малоспецифические и высокоспецифические.

К малоспецифическому экспресс-методу диагностики относится цитоскопический, при котором в пораженных клетках выявляют внутриклеточные включения, образующиеся в местах сборки вирионов. Такие включения могут быть как внутриядерные (например, при аденовирусной инфекции), так и цитоплазматические (например, включения Бабеша-Негри при бешенстве).

К высокоспецифическому экспресс-методу диагностики вирусных инфекций относится обнаружение пораженных вирусом клеток с помощью серологических реакций с мечеными антителами, которые реагируют со специфическими вирусными антигенами в составе инфицированных клеток.



Г. Тестовые вопросы по теме занятия

Первым был открыт вирус:

-табачной мозаики

ящура

жёлтой лихорадки

саркомы кур

бактериофаг

Вирусы открыл:

-Ивановский

Пастер

Кох

Ру

Левенгук

Основные отличия вирусов от других форм жизни:

-вирион содержит только один тип нуклеиновой кислоты

вирион содержит два типа нуклеиновой кислоты

-вирусы не имеют клеточного строения

вирусы имеют клеточное строение

-у вирусов отсутствуют собственные белоксинтезирующие и энергозапасающие системы

вирусы имеют собственные белоксинтезирующие и энергозапасающие системы

-вирусы могут интегрироваться в клеточный геном

вирусы не могут интегрироваться в клеточный геном

Большинство семейств ДНК-геномных вирусов содержат:

-двухцепочечную ДНК

одноцепочечную ДНК

Простые вирусы:

-Adenoviridae

-Papillomaviridae

-Polyomaviridae

Poxviridae

Herpesviridae

Hepadnaviridae

-Parvoviridae

-Circinoviridae

Сложные вирусы:

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

-Poxviridae

-Herpesviridae

-Hepadnaviridae

Parvoviridae

Circinoviridae

Содержат одноцепочечную ДНК:

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

Poxviridae

Herpesviridae

Hepadnaviridae

-Parvoviridae

-Circinoviridae

Содержат двухцепочечную ДНК:

-Adenoviridae

-Papillomaviridae

-Polyomaviridae

-Poxviridae

-Herpesviridae

-Hepadnaviridae

Parvoviridae

Circinoviridae

Большинство семейств РНК-геномных вирусов содержат:

двухцепочечную РНК

-одноцепочечную РНК

РНК-геномные вирусы:

-Retroviridae

-Togaviridae

-Flaviviridae

-Coronaviridae

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

РНК-геномные вирусы:

-Paramyxoviridae

-Rhabdoviridae

-Filoviridae

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

РНК-геномные вирусы:

-Orthomyxoviridae

-Bunyaviridae

-Arenaviridae

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

РНК-геномные вирусы:

-Picornaviridae

-Caliciviridae

-Reoviridae

Parvoviridae

Circinoviridae

Содержат двухцепочечную РНК:

Retroviridae

Togaviridae

Flaviviridae

Coronaviridae

-Reoviridae

Простые вирусы:

Retroviridae

Togaviridae

Flaviviridae

Coronaviridae

-Picornaviridae

-Caliciviridae

Позитивный геном содержат:

-Retroviridae

-Togaviridae

-Flaviviridae

-Coronaviridae

Paramyxoviridae

Rhabdoviridae

Filoviridae

Негативный геном содержат:

-Paramyxoviridae

-Rhabdoviridae

-Filoviridae

-Orthomyxoviridae

-Bunyaviridae

-Arenaviridae

Togaviridae

Flaviviridae

Фрагментированный геном содержат:

Paramyxoviridae

Rhabdoviridae

Filoviridae

-Orthomyxoviridae

-Bunyaviridae

-Arenaviridae

Reoviridae

Инфекционные нуклеиновые кислоты, не содержащие белковой оболочки:

вирионы

-вироиды

прионы

плазмиды

Инфекционные белки, не содержащие нуклеиновых кислот:

вирионы

вироиды

-прионы

плазмиды

Простые вирусы имеют:

-форму икосаэдра

пулевидную форму

нитевидную форму

кирпичеобразную форму

округлую форму

Большинство сложных вирусов имеют:

форму икосаэдра

пулевидную форму

нитевидную форму

кирпичеобразную форму

-округлую форму

Вирусы семейства Rhabdoviridae имеют:

форму икосаэдра

-пулевидную форму

нитевидную форму

кирпичеобразную форму

округлую форму

Вирусы семейства Filoviridae имеют:

форму икосаэдра

пулевидную форму

-нитевидную форму

кирпичеобразную форму

округлую форму

Вирусы семейства Poxviridae имеют:

форму икосаэдра

пулевидную форму

нитевидную форму

-кирпичеобразную форму

округлую форму

ДНК в составе вириона:

линейная

кольцевая

-или линейная или кольцевая

РНК в составе вириона:

линейная

кольцевая

-или линейная или кольцевая

Процесс сборки ДНК-геномных вирусов происходит:

в цитоплазме

в ядре

-как правило, в ядре, а некоторых – в цитоплазме

как правило в цитоплазме, а некоторых – в ядре

Какие ДНК-геномные вирусы собираются в цитоплазме:

Adenoviridae

Papillomaviridae

Polyomaviridae

-Poxviridae

Herpesviridae

-Hepadnaviridae

Parvoviridae

Circinoviridae

Процесс сборки РНК-геномных вирусов происходит:

-в цитоплазме

в ядре

как правило, в ядре, а некоторых – в цитоплазме

как правило в цитоплазме, а некоторых – в ядре

У РНК-геномных вирусов с позитивным геномом («плюс-нить») транскрипция вирусного генома происходит по схеме:

вирионная РНК служит матрицей для синтеза информационной РНК, на матрице которой собираются вирусные белки

-вирионная РНК, после множественного копирования, используется как матрица для синтеза вирусных белков

на матрице вирионной РНК собирается ДНК, которая используется как матрица для синтеза информационной РНК, служащей, в свою очередь, матрицей для синтеза вирусных белков

У РНК-геномных вирусов с негативным геномом («минус-нить») транскрипция вирусного генома происходит по схеме:

-вирионная РНК служит матрицей для синтеза информационной РНК, на матрице которой собираются вирусные белки

вирионная РНК, после множественного копирования, используется как матрица для синтеза вирусных белков

на матрице вирионной РНК собирается ДНК, которая используется как матрица для синтеза информационной РНК, служащей, в свою очередь, матрицей для синтеза вирусных белков

У ретровирусов транскрипция вирусного генома происходит по схеме:

вирионная РНК служит матрицей для синтеза информационной РНК, на матрице которой собираются вирусные белки

вирионная РНК, после множественного копирования, используется как матрица для синтеза вирусных белков

-на матрице вирионной РНК собирается ДНК, которая используется как матрица для синтеза информационной РНК, служащей, в свою очередь, матрицей для синтеза вирусных белков

Как называется такая форма изменчивости вирусов, когда в результате совместной репликации в одно клетке двух вирусов происходит «обмен генами», в результате чего в геноме вирионов, вышедших из клетки, часть генов будет от одного вируса, а часть – от другого:

-генетическая рекомбинация

генетическая реактивация

комплементация

фенотипическое смешивание

Как называется такая форма изменчивости вирусов, когда в результате совместной репликации в одной клетке двух одинаковых вирусов, у которых инактивированы разные части генома, вирусное потомство содержит полностью активированный геном, поскольку одна часть генома (а именно – активированная) берется от одного вируса, а другая (тоже активированная – от другого):

генетическая рекомбинация

-генетическая реактивация

комплементация

фенотипическое смешивание

Как называется такая форма изменчивости вирусов, когда в результате совместной репликации в одно клетке двух вирусов вирионы вновь образованных вирусов будут содержать нуклеиновую кислоту одного вируса, а капсидную оболочку – другого:

генетическая рекомбинация

генетическая реактивация

комплементация

-фенотипическое смешивание

Как называется такая форма изменчивости вирусов, когда в результате совместной репликации в одно клетке двух вирусов один из них может детерминировать синтез в клетке белка, ответственного за репродукцию другого вируса

генетическая рекомбинация

генетическая реактивация

-комплементация

фенотипическое смешивание

Повреждение вирусом клеток вплоть до гибели последних:

-цитопатическое действие

иммуноопосредованное действие

иммунотропное действие

толерогенное действие

онкогенное действие

тератогенное действие

Инициирование вирусом аутоиммунной реакции по отношению к поражённым клеткам:

цитопатическое действие

-иммуноопосредованное действие

иммунотропное действие

толерогенное действие

онкогенное действие

тератогенное действие

Поражение вирусом иммунокомпетентных клеток:

цитопатическое действие

иммуноопосредованное действие

-иммунотропное действие

толерогенное действие

онкогенное действие

тератогенное действие

Индуцирование вирусом развитие по отношению к себе иммунологической толерантности:

цитопатическое действие

иммуноопосредованное действие

иммунотропное действие

-толерогенное действие

онкогенное действие

тератогенное действие

Индуцирование вирусом опухолевого перерождения поражённых клеток:

цитопатическое действие

иммуноопосредованное действие

иммунотропное действие

толерогенное действие

-онкогенное действие

тератогенное действие

Поражение вирусом плода:

цитопатическое действие

иммуноопосредованное действие

иммунотропное действие

толерогенное действие

онкогенное действие

-тератогенное действие

Для профилактики этих вирусных инфекций используются живые вакцины:

-жёлтая лихорадка

-натуральная оспа

-бешенство

-корь

-краснуха

-эпидемический паротит

-полиомиелит

клещевой энцефалит

гепатит А

гепатит В

Для профилактики этих вирусных инфекций используются инактивированные вакцины:

жёлтая лихорадка

натуральная оспа

бешенство

корь

краснуха

эпидемический паротит

-полиомиелит

-клещевой энцефалит

-гепатит А

гепатит В

Для профилактики этой вирусной инфекции используется генно-инженерная вакцина:

жёлтая лихорадка

натуральная оспа

бешенство

корь

краснуха

эпидемический паротит

полиомиелит

клещевой энцефалит

гепатит А

-гепатит В

Выявление наличия вируса в системе его культивирования:

-индикация

идентификация

Определение типа выделенного вируса:

индикация

-идентификация





Дата публикования: 2015-11-01; Прочитано: 244 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!



studopedia.org - Студопедия.Орг - 2014-2024 год. Студопедия не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования (0.031 с)...