Тема 5. 1. Морфология и структура вирусов. Вирусоскопические методы исследования

Введение. Вирион состоит из сердцевины (нуклеиновой кис­лоты в комплексе с сердцевинными белками) и оболочек. Размеры вирионов колеблются от 15—20 (0,015—0,002 мкм) до 300-500 нм (0,3-0,5 мкм).

Существуют простые и сложные вирионы. Первые снабже­ны только капсидом. Форма просто устроенных вирусов опре­деляется типом симметрии его капсида: изометрическим или спиральным. У вирусов с изометрическим типом симметрии капсида отдельные морфологические субъединицы капсида (капсомеры) уложены на осях симметрии многогранника, на­пример икосаэдра (двадцатигранника). При этом вирион при­обретает сферическую форму. У вирусов со спиральным типом симметрии капсомеры уложены по спирали вокруг нуклеино­вой кислоты. При этом вирион приобретает палочковидную форму.

Сложные вирионы имеют дополнительную внешнюю обо­лочку — суперкапсид, покрывающий капсид снаружи. Супер-капсид представляет собой модифицированную мембрану клет­ки хозяина [цитоплазматическую (ЦПМ), ядерную или др.], содержащую вирусные белки и гликопротеины. Форма слож­ных вирусов обычно близка к сферической, для них характерен плеоморфизм.

Вирусы бактерий (бактериофаги) имеют сперматозоидную или нитевидную форму. Бактериофаги сперматозоидной фор­мы состоят из головки, в которой содержится нуклеиновая кислота, и отростка. Капсид головки фагов построен по изо­метрическому типу симметрии, а отростка — по спиральному. У некоторых фагов отросток очень короткий или может отсут­ствовать.

Морфологию вирусов изучают с помощью электронной микроскопии. Методы сканирующей электронной микроско­пии позволяют исследовать форму и характер поверхности вирусной частицы. Для изучения ультраструктуры вирусов применяют методы просвечивающей электронной микроско­пии.

Тема 5.2. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВИРУСОВ И ДРУГИХ ОБЛИГАТНЬГХ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХ ПАРАЗИТОВ (РИККЕТСИЙ, ХЛАМИДИЙ)

Введение. Вирусы не имеют собственного метаболизма. Для репродукции они используют метаболические системы клетки-хозяина.

Различают 3 типа взаимодействия вируса с клеткой.

Продуктивная инфекция. При этой форме инфек­ции в клетке происходит репродукция вируса и образуется вирусное потомство — 10⁴—10^ вирусных частиц, которые вы­
ходят из зараженной клетки во внешнюю среду.

Интегративная инфекция. Геном вируса встраива­ется (интегрирует) в геном клетки-хозяина. Интегрированные вирусные геномы — провирусы — передаются потомству зара­женной клетки при делении. РНК-содержащие вирусы также могут вызвать интегративную нфекцию путем обратной транскрипции с помощью РНК-зависимой ДНК-полимеразы
(обратной транскриптазы). При этом в клеточный геном встра­ивается образующаяся ДНК-копия вирусной РНК. При опре­деленных условиях интегративная форма вирусной инфекции
может переходить в продуктивную.

Абортивная инфекция. При проникновении в клетку дефектного вируса, не способного к самостоятельной репро­дукции, или при попадании полноценного вируса в непермис-
сивную (не подходящую для его репродукции) клетку, или при неподходящих условиях внешней среды возникает абортивная форма инфекции. Взаимодействие с клеткой прерывается на одной из ранних стадий — вирус не репродуцируется и не передается потомству зараженной клетки.

План

Программа

Методы культивирования вирусов, риккетсий, хламидий.

Методы индикации вирусов.

Бактериофаги: морфология и физиология, практичес­кое применение.

Демонстрация

Питательные среды, растворы и лабораторная посуда для культур клеток.

Культуры клеток: незараженные, зараженные вирусом простого герпеса и хламидиями. Отметить изменения в культурах клеток, зарисовать, сделать вывод.