Лабораторная идентификация вирусов и диагностика инфекции

1. ИФА на основе моноклональных антител (8Е7) для выявления антигена астровирусов в материале от больных. Используется в расшифровке вспышек.

2. ЭМ и ИЭМ препаратов из материала от больных. В материале выявляются типичной морфологии звездчатые вирионы. ИЭМ повышает эффективность выявления и может использоваться для идентификации и типирования вирусов

3. Молекулярно-биологическая диагностика — ПЦР. У астровирусов человека выявлены типоспецифические и общие области генома. Для выявления РНК астровирусов в фекалиях больных применяется обратно-транскриптазная ПЦР (ОТ-ПЦР). Метод примерно в 3 раза чувствительнее, чем ИФА.

4. Вирусологическая диагностика. Астровирусы культивируют в культуре клеток СоСо-2, клеток почек обезьян (LLC-MK2), клетках гепатомы (PLC/PRF/5). Выделение астровирусов возможно как из свежих материалов, так и из замороженных проб. Многие исследователи предпочитают выделение вируса на культуре клеток другим методам.

5. Серологическая диагностика астровирусных инфекций находится в стадии разработки. Установлено, что группоспецифические антитела к астровирусам выявляются у 75% детей в возрасте 5-10 лет. Вируснейтрализующие антитела к серотипу 1 выявлялись в 92% случаев, серотипу 3 — в 69%, серотипу 4 — в 50%, серотипу 5 — в 36% и серотипу 2 — у 31% обследованных детей.

Пути передачи инфекции. Инфекция у детей передается от больного ребенка к здоровым. Возможны водный, пищевой и контактный пути передачи инфекции.

Эпидемиология. Астровирусы относятся к эндемичным патогенам. Дети из организованных детских коллективов имеют больший риск инфицирования, чем дети не посещающие их. Наибольший риск развития инфекции и диарейного синдрома у детей до 1 года. Они инфицируют от 11 до 62% новорожденных, являются причиной крупных вспышек диареи среди детей. Инфекция нередко имеет место и у подростков. Вспышки диареи, ассоциированные с астровирусами, проявляются в детских дошкольных учреждениях, школах, домах престарелых. Наиболее часто вспышки астровирусных инфекций вызывает первый серотип вируса. Заболевания, вызванные астровирусами, имеют место как в развивающихся, так и в развитых странах. Астровирусы могут быть причиной и нозокомиальных инфекций.

Патогенез заболеваний. Вирус репродуцируется в энтероцитах тонкого кишечника, активирует аденилатциклазу и стимулирует развитие диарейного синдрома. Клинические проявления развиваются через 24-36 часов после инфицирования. Заболевание проявляется диареей и рвотой (или их сочетанием). Диарейный синдром чаще развивается у детей младших возрастов. Примерно через 4 дня наступает выздоровление.

Лечение и профилактика. Лечение астровирусных инфекций — симптоматическое. В целях профилактики используют общие санитарно-эпиде-миологические меры — контроль качества питьевой воды, пищевых продуктов, санитарно-просветительную работу, соблюдение санитарно-гигиенического режима в организованных детских коллективах.

Калицивирусы

Характеристика. Калицивирусы — +РНК одноцепочечные вирусы. Объем генома 7,5 кб. Они близкородственны пикорнавирусам. РНК генома имеет 5’ терминальный фрагмент, контролирующий белок VPg и 3’ фрагмент, контролирующий поли A. Калицивирусы имеют общие с пикорнавирусами белки — 2C, 3D и 3C. Вирусы объединены в семейство Caliciviridae, включающее четыре рода: Norwalk-like virus, Sapporo-like virus, Vesivirus и Lagovirus. Первые два рода — вирусы человека (HuCVs), выделяющиеся от больных гастроэнтеритом людей. Вирусы последних двух родов — вирусы животных. Диаметр капсида — 30-35 нм, шарообразной формы. С помощью электронной микроскопии выявляют два морфологических типа. Типичные калицивирусы имеют форму «звезды Давида» и включают вирусы Sapporo-like virus и Lagovirus. К малым круглым вирусам относится род Norwalk-like virus. Капсид калицивирусов содержит 90 димеров капсидного белка, которые образуют треугольные арки и соответственно Т=3 икосаэдрический капсид (вирион). На поверхности вирионов выявляют 32 чашеобразных вдавления. Они характеризуются антигенным и генотипическим разнообразием. Антигенные связи внутри семейства калицивирусов изучены недостаточно.

Репликация. Вирусы реплицируются в энтероцитах тонкого кишечника, подобно пикорнавирусам.