Кислотоустойчивые бактерии

Кислотоустойчивость некоторых бактерий обусловлена особенностями химического состава их КС: наличием в ней повышенного количества липидов, оксикислот (миколовой и миколеновой), восков.

Кислотоустойчивые бактерии плохо воспринимают анилиновые красители, их окрашивают концентрированными растворами красителей с подогреванием и дифференцируют от кислоточувствительных растворами сильных неорганических кислот. Для окраски кислотоустойчивых бактерий используют метод Циля-Нильсена:

– на фиксированный препарат накладывают полоску фильтровальной бумаги, наливают кислый карболовый фуксин Циля и, держа стекло над пламенем спиртовки, подогревают препарат 3–5 мин до появления паров, но не доводя до кипения;

– препарату дают остыть, снимают фильтровальную бумагу, сливают краситель и промывают водой;

– препарат обесцвечивают 5% раствором серной кислоты 30 сек (стекло 2–3 раза погружают в стакан с кислотой, не задерживая его в ней);

– 3–5 сек 5% H₂SO₄ или 95% C₂H₅OH, содержащим 3% НСl;

– промывают водой;

– докрашивают метиленовым синим 3-5 мин;

– промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и исследуют с иммерсионной системой.

При обработке препарата фуксином Циля все клетки окрашиваются в рубиново-красный цвет. При последующем обесцвечивании серной кислотой кислотоустойчивые бактерии, из-за особенностей своего химического состава (высокое содержание липидов), удерживают краситель и сохраняют рубиново-красный цвет. Кислоточувствительные бактерии (напр., стафилококки и сарцины), элементы тканей и лейкоциты обесцвечиваются под действием концентрированных минеральных кислот, а при дальнейшем окрашивании метиленовым синим принимают цвет дополнительного красителя — синий (рис. 23).

А Б

Рис. 23. Окраска по Цилю-Нильсену:

кислотоустойчивые микобактерии — красные, некислотоустойчивые бактерии, лейкоциты — синие.

А — микобактерии в моче, Б — микобактерии в мокроте

К кислотоустойчивым бактериям относятся микобактерии: M. tuberculosis, M. bovis — возбудители туберкулеза, M. africanum —возбудитель эндемического туберкулеза в Африке, M. scrofulaceum — возбудитель лимфаденитов у детей, M.leprae — возбудитель лепры, M. smegmatis — предствитель нормальной микрофлоры наружных половых органов мужчин.