 |
Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | |
Основные характеристики метода ВЭЖХ
|
|
| Механизм распределения | Подвижная фаза | Неподвижная фаза | Температурные условия | Состояние анализируемых проб |
| Обратимая сорбция в системе жидкость-твердый сорбент | жидкость | Твердый сорбент | 20-50оС | Растворяются в подвижной фазе |
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) является вариантом жидкостной колоночной хроматографии. Неподвижная фаза – твердый сорбент, подвижная - жидкость, подаваемая в колонку под повышенным давлением. Разделение компонентов смеси достигается за счет различия в сродстве компонентов смеси к неподвижной и подвижной фазам.
Основными требованиями в методе является растворимость исследуемых веществ в подвижной фазе, а также свойство удерживаться неподвижной фазой. Если при вводе пробы какие-либо компоненты смеси окажутся нерастворимыми, они будут отфильтрованы и уже не участвуют в хроматографическом процессе. Точно также не будут разделяться компоненты, не удерживающиеся неподвижной фазой, т.к. они пройдут через колонку с подвижной фазой.
Основными узлами хроматографа для ВЭЖХ являются: насос высокого давления для подачи подвижной фазы, устройство для ввода пробы (дозатор), хроматографическая колонка, детектор с регистрирующим устройством.
Несмотря на некоторую общность узлов приборов с другими вариантами хроматографии (ГХ и ГЖХ) здесь имеются отличия:
- подвижная фаза подается под давлением (до 200-500 атм);
- колонки иных размеров (обычно длиной 10-25 см, диаметр 4-5,5 мм, в
микроколоночных хроматографах используют длиной 5-6 см и
диаметром 1-2 мм);
- размер частиц сорбента 5-10 мкм и их плотная упаковка в колонке,
что обеспечивает эффективность разделения;
-выбор сорбента ограничен;
- другие температурные условия.
В качестве сорбента в ВЭЖХ обычно используют силикагель с гидроксилированной поверхностью или привитыми к поверхности различными функциональными группами, например, алкилсиликагель, примером которого является Сепарон-18. К его поверхности привита алкильная группа с числом углеродных атомов 18.
В колонках, содержащих силикагель с привитыми неполярными группами (Сепарон-18), используют полярные растворители – водные растворы, содержащие низшие спирты и ацетонитрил. Если в качестве сорбента используют силикагель, то элюентом служат углеводороды с добавлением небольшого количества спирта.
В ВЭЖХ используются детекторы различных типов, их основные характеристики представлены в таблице 2.
Дата публикования: 2015-10-09; Прочитано: 1425 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!
