Приготовление убитых вакцин

1.Отобрать штамм. Проверить морфо тинкториальные свойства в мазках, окрашенных по Граму, изучают его культурально – биохимические особенности, антигенную структуру, их соответствие таксономии и характеристике вида.

2. Засеять культуру штамма на поверхность косячка или материала МПА. Поставить в термостат при +37 С⁰ на 18-24 часа для получения массивного роста.

3. Смыть выросшую культуру стерильным 0,05 % изотонического раствором, получить маточную взвесь.

4. Маточную взвесь инактивировать одним из методов:

а) гретая - термовакцина

б) 0,25% раствора формалина – формалвакцина

в) ультразвуком – ультразвуковая вакцина.

5. Проверить стерильность инактивированной взвеси путем высева на МПА и контроля посевов.

6. Провести стандартизацию маточной взвеси, используя оптический стандарт мутности ГИСК 1 млрд.мт/мл и прилагающийся к нему стандартный шрифт. Для этого:

- в широкую чистую сухую пробирку диаметром, равным диаметру пробирки или ампулы стандарта мутности, внести 1 мл маточной взвеси;

- мерно добавить к ней в пробирку 0,5% изотонический раствор поваренной соли до получения мутности, идентичной стандарту;

- рассчитать количество микробных тел в 1 мл исходной маточной взвеси с учетом разведения, использованного для получения заданной мутности в опытной пробирке, одинаковой со стандартной мутностью. Например, для получения взвеси 1млрд мт/1мл пошло 2 мл изотонического раствора. Следовательно, исходная густота взвеси была в 3 раза больше, - 3 млрд. мт в 1 мл.

7. Приготовить вакцину с концентрацией 3 млрд. м.т. в 1мл, разбавив маточную взвесь в 3 раза стерильным изотоническим раствором;

8. Провести контроль вакцины на ее соответствие требованиям к готовому препарату:

- повторно после разведения проверить стерильность вакцины на МПА. При наличии роста вакцину повторно инактивировать;

- установить антигенность на кроликах путем их 3-х кратных прививок в ушную вену с недельным интервалом, последующего взятия крови, постановки с ее сывороткой РА и определения титра AT;

- проверка специфичности образовавшихся AT в РА на стекле или развернутом варианте;

- установить иммуногенность вакцины, то есть ее защитную активность на мышах: после 3-х кратной вакцинации животные заражаются 1 DLM исходного живого штамма. При высокой иммуногенности вакцина сохра­няет в живых не менее 2/3 из 30 особей;

- проверка пирогенности на кроликах 1-кратным внутривенным или подкожным введением вакцины с многократным ректальным замером температуры тела животного. Пирогенность должна быть не выше умеренной; (+37,5 С⁰);

- контроль реактогенности на здоровых людях должен быть либо отрицательным, либо местным умеренным.

Варианты убитых вакцин:

1. Стафилококковая

2. Гонококковая.

3. Холерная.

4. Тифозно-паратифозно-столбнячная.

5. Коклюшно- дифтерийно -столбнячная /АКДС/.

6. Дифтерийно-столбнячная /АДС/.

7. Дизентерийная.

8. Против клещевого энцефалита.

9. Лептоспирозная.