Микробная колонизация полости рта

Микрофлора полости рта

Нормальная микрофлора сложилась эволюционным путем как результат взаимного действия множества факторов, связанных с взаимодействием внешней среды и состоянием макроорганизма, а также в зависимости от взаимоотношений разных видов микробов, входящих в биоценоз.

Полость рта представляет собой уникальную открытую экосистему для самых разнообразных микроорганизмов. С первых дней жизни ротовая полость обсеменяется микробами, численность и разнообразие которых определяется множеством факторов внутренней среды организма и внешнего окружения. Несмотря на это, существует индивидуальная и анатомическая специфичность состава микроорганизмов, населяющих конкретный биотип.

I. МИКРОФЛОРА ПОЛОСТИ РТА ЗДОРОВЫХ

ЛИЦ

В настоящее время описано несколько сотен видов микроорганизмов, входящих в нормальную микрофлору полости рта. Среди микробов полости рта встречаются аутохтонные и аллохтонные виды. Аутохтонная микрофлора подразделяется на облигатную, постоянно обитающая в полости рта и транзиторную или временную.

Таблица №1

Микробный пейзаж полости рта здоровых лиц.

МИКРООРГАНИЗМЫ	%	МИКРООРГАНИЗМЫ	%
Стрептококки		Нейссерии	7,9
Лактобактерии	90,3	Вейлонеллы	5,3
Стафилококки	40,7	Лептотрихии	4,5
Грибы рода Candida	25,7	Фузобактерии	3,5
Бактероиды	23,9	Микрококки	2,7
Коринебактерии	15,1

К облигатной флоре относится основная масса грамположительных кокков, которая представлена гетерогенной группой стрептококков. В эту группу входят Streptococcus salivarius, Str. sanquis, Str. mutans. Они отличаются друг от друга по способности ферментировать углеводы и образовывать перекись водорода. Сдвиг рН в кислую сторону приводит к декальцинации эмали. Важна также способность стрептококков синтезировать из сахарозы полисахариды. При этом глюкозная часть молекулы превращается в нерастворимый декстран, который способствует образованию зубных бляшек. Зеленящие стрептококки встречаются в полости рта в различных количественных соотношениях, которые зависят от диеты, гигиены полости рта, возраста и других факторов.

Грамотрицательные анаэробные кокки представлены родом Veilonella. Они достаточно хорошо разлагают лактат, пируват, ацетат и другие углеводы до углекислоты и воды. За счет катаболизма молочной кислоты, образуемой зеленящими стрептококками, вейлонеллы могут оказывать противокариозное действие.

Грамположительные палочки представлены в полости рта родом Lactobacillus. Они разлагают углеводы с образованием молочной кислоты, сохраняя жизнеспособность при низких значениях рН среды. Наиболее часто в полости рта здоровых лиц встречаются L. casei, L.acidophylius L.salivarius.

Грамотрицательные анаэробные и микроаэрофильные бактерии чаще всего относятся к семейству Bacteroidaceae. Они ферментируют сахара до газа, а пептоны - с образованием аминокислот. К данному семейству относятся три рода: Bacteroides, Fusobacterium, Leptotrichia. Наиболее часто встречаются B.melaninogenicus и B.gingivalis.. Они характеризуются низкой сахаролитической активностью, однако глюкозу разлагают с образованием смеси кислот, причем рН среды остается достаточно высоким. Данные виды являются постоянными обитателями десневых карманов. Наличие протеолитических ферментов у бактероидов имеет большое патогенетическое значение в развитии заболе­ваний пародонта.

Род Fusobacterium представлен палочками веретенообразной формы. Они образуют из пептона или глюкозы молочную кислоту. Фузобактерии обитают в десневых карманах в ассоциациях со спирохетами.

Представители рода Leptotrichia (L.buccalis) имеет вид попарно расположенных зернистых палочек, часто нитевидной формы. Они не образуют индол и сероводород, ферментируют глюкозу с образованием большого количества молочной кислоты, что приводит к понижению рН среды до 4,5. При заболеваниях пародонта количество этих бактерий возрастает. Семейство Propionibacteriaceae включает в себя анаэробные бактерии, которые при разложении глюкозы образуют пропионовую и уксусную кислоты.

Из семейства Actinomycetaceae полости рта чаще всего встречаются роды Actinomyces и Bifidobacterium. Первые ферментируют углеводы с образованием кислых продуктов без выделения газа. Конечными продуктами расщепления глюкозы являются уксусная, молочная, муравьиная и янтарная кислоты. Обладают слабой протеолитической активностью. Актиномицеты находятся на слизистой оболочке рта, составляют строму зубного камня и входят в состав зубного налета. Наряду с этим, они содержатся в кариозных полостях зубов, в патологических десневых карманах, в протоках слюнных желез.

В полости рта встречаются бактерии рода Corynebacterium. Характерной особенностью их является способность снижать окислительно-восстановительный потенциал, создавая тем самым условия для роста анаэробов. При заболеваниях пародонта они встречаются в ассоциациях с фузобактериями и спирохетами.

Спирохеты, обитающие в полости рта, относятся к трем родам: Трепонемы полости рта представлены видами T. macrodentium, T. denticola и T. orale Они отличаются друг от друга по образованию молочной, уксусной и других киолот и сбраживанию углеводов. Боррелии полости рта представлены B. buccalis, чаще встречающиеся в ассоциациях с фузиформными бактериями. Основным местом обитания боррелий являются десневые карманы.

В полости рта встречаются микоплазмы - М. rale и M. salivarius. Они гидролизуют аргинин, не ферментируют глюкозу и отличаются друг от друга по некоторым биохимическим признакам.

Постоянное сосуществование микроорганизмов самых различных видов предполагает различные формы взаимодействия микробов на метаболическом и генетическом уровнях. Бактерии могут угнетать рост других видов за счет более высокого биологического потенциала путем изменения рН среды, благодаря продукции молочной кислоты, спиртов, перекиси водорода и других веществ. Из всех факторов, определяющих природу и состояние флоры полости рта, решающим является слюна. Важнейшими в этом отношении факторами слюны являются интенсивность ее образования, вязкость, содержание минеральных компонентов, ионная потенция, буферные свойства, рН, основные метаболиты, присутствие или отсутствие слюнных газов, органический состав (особенно аминокислоты, полисахариды, витамины, пурины, пиримидины), антибактериальные свойства (лизоцим, секреторные антитела, лейкоциты).

В 1 мг. зубного налета, по данным разных авторов, содержится от 5 до 800 млн. микроорганизмов. Микроорганизмы зубного налета делят на две большие группы: 1 - бактерии ацидофильные, к которым относятся виды, способные развиваться в кислой среде; 2 -протеолитические микроорганизмы, вырабатывающие протеиназы.

В первую группу входят молочно - кислые стрептококки, лактобациллы, актиномицеты, лептотрихии и коринебактерии. Стрептококки, коринебактерии и

актиномицеты могут развиваться и в основной среде. В этом случае из-за своей способности синтезировать молочную кислоту они быстро нейтрализуют среду. Среди ацидофильных бактерий имеются ацидогенные, которые способны синтезировать из сахарозы большое количество молочной кислоты (иногда уксусной).

Все стрептококки зубного налета делятся на 4 группы: Str. salivarius, mitis, mutans. Str. salivarius легко определяются морфологически по форме колоний, образующихся на желатине, содержащим 5% сахарозы: крупные слизистые колонии, содержащие большое количество леванов. Эти стрептококки встречаются в зубном налете в малых количествах, но их достаточно много на слизистых оболочках и в слюне.

Str. mitis составляют основную массу стрептококков, выделенных из зубного налета. Они очень гетерогенны, относятся к группе зеленящих стрептококков и обладают слабой биохимической активностью. Всего лишь несколько штаммов Str. mitis способны синтезировать экстрацеллюлярные полисахариды.

Str. sanguis занимает второе место по количественному содержанию в зубном налете.

Наиболее интересным видом молочно - кислых стрептококков является Str. mutans в связи с его резко выраженными кариесогенными свойствами.

Среди ацидофильных бактерий зубной бляшки, 15% составляют нитевидные формы (актиномицеты, лактобациллы и лептотрихии). Актиномицеты образуют леваны; лактобациллы не образуют внеклеточных полисахаридов, за исключением Lactobacillus casei, которые могут образовывать некоторые капсульные полисахариды; лептотрихии вообще не вырабатывают полисахаридов; вторую группу бактерий зубного налета составляют анаэробы, которые используют пищевые протеины и аминокислоты. Количество анаэробов в зубном налете уменьшается при употреблении сахарозы и увеличивается при употреблении мальтозы.

В некариозной зубной бляшке большую часть составляют вейллонеллы, нейссерии и наименьшую -спирохеты. В кариозной зубной бляшке главными протеолитическими бактериями являются ристеллы.

Кроме упомянутой выше микрофлоры, в зубной бляшке обнаружены и другие виды микроорганизмов, в частности дрожжеподобные грибы, дифтероиды, стафилококки.

На всех этапах развития зубной бляшки в ней преобладают стрептококки.

Бактерии находятся в основном в трех зонах:

1) в зубных бляшках на коронках зубов, а в случае кариеса - в кариозной полости;

2) в гингивальных бороздах;

3) на спинке языка, особенно в задних ее отделах.

По данным разных авторов, количество бактерий в слюне колеблется от 43 млн. до 5,5 млрд. в 1 мл, т.е. в среднем 750 млн. в 1 мл. Микробная же концентрация в бляшках и десневой (гингивальной) борозде почти в 100 раз выше - примерно 200 млн. клеток на 1 г. Около половины резидентов является факультативными и облигатно анаэробными стрептококками, которые включают в свой состав Str. mutans, Str. mitis, Str. sanguis пептострептококки. R -гемолитические стрептококки не являются составной частью резидентной флоры. Различные виды стрептококков занимают определенную нишу, например наибольшее количество энтерококков было обнаружено на спинке языка и в гингивальной бороздке, Str. mutans обычно локализуются в бляшке на коронке.

Другая половина резидентной флоры состоит из вейллонелл (около 25%) и дифтероидов (около 25%). Стафилококки, лактобациллы, жгутиковые микроорганизмы, спирохеты, лептоспиры, фузобактерии, бактероиды, нейссерии, спиралевидные формы, дрожжи, другие грибы, простейшие находятся в полости рта в гораздо меньшем количестве. Хотя эти микроорганизмы постоянно присутствуют в полости рта, Они никогда не бывают так широко представлены, как стрептококки, вейллонеллы, дифтероиды. Эти данные свидетельствуют о том, что необходимо различать главных и второстепенных представителей резидентной микрофлоры.

МИКРОБНАЯ КОЛОНИЗАЦИЯ ПОЛОСТИ РТА

Для колонизации полости рта человека микроорганизмы должны прикрепиться к поверхности слизистой оболочки или зуба. Среди механизмов, обеспечивающих приживление микробов и формирование нормальной микрофлоры организма, большое значение принадлежит адгезии. Адгезия - это специфический процесс взаимодействия поверхностных структур клеток микро- и макроорганизма, следствием чего является фиксация микробной клетки на клетке макроорганизма. Первый этап адгезии эффективнее происходит у бактерии с повышенной гидрофобностью. Так, оральные стрептококки адсорбируются как на поверхности зубов, так и на эпителии слизистой оболочки. Значительную роль здесь играют фимбрии или пили. Особенности строения адгезинов во многом определяют локализацию микробов в полости рта. Так, Str. salivarius достаточно прочно фиксируется на поверхности эпителиальных клеток слизистой оболочки, а Str. sanguis- на поверхности зуба.

Прикрепление бактерии к поверхности зуба происходит очень быстро. Многие микробы сами не способны прикрепляться непосредственно к зубной эмали, но могут оседать на поверхности уже адгезировавшихся бактерий, образуя связь "клетка к клетке". Оседание кокков по периметру нитевидных бактерий приводит к образованию "кукурузных початков".

У лактобактерий имеется микрокапсула, которая принимает участие в процессе прикрепления клетки к субстрату. Наибольшей адгезивной активностью обладают штаммы L. salivarius и L. casei.

У стафилококков и стрептококков в механизме адгезии принимают участие тейхоевые кислоты. А процесс адгезии Str. mutans зависит от содержания лейкинов.

Возникновение микробных ассоциаций в разных биотопах ротовой полости определяется биологическими особенностями обитающих здесь видов, между которыми возникают как синергические, так и антагонистические отношения. Так, молочная кислота, образовавшаяся в результате метаболизма оральных стрептококков и лактобактерий, используется в качестве энергетического ресурса вейлонеллами, что приводит к повышению значения рН среды и может оказывать противокариозное действие. Коринебактерии образуют витамин К - фактор роста многих бактерий. Дрожжи синтезируют витамины, необходимые для роста лактобактерий. Лактобактерии в процессе метаболизма образуют молочную кислоту, которая, закисляя среду, препятствует адгезии и колонизации ДПГ Candida, что приводит к снижению количества витаминов и задержке роста многих микробов.

Оральные стрептококки являются антагонистами фузобактерий, коринебактерий и др. Этот антагонизм связан с образованием молочной кислоты, перекиси

водорода, бактериоцинов. Молочная кислота, образуемая оральными стрептококками, подавляет рост многих микроорганизмов, способствуя тем самым размножению лактобактерий. Коринебактерии, снижая значения окислительно-восстановительного потенциала, создают условия для роста факультативных и строгих анаэробов. В десневых карманах, складках слизистой оболочки, криптах уровень кислорода значительно снижен. Это создает благоприятные условия для развития строгих анаэробов -фузобактерий, бактероидов, лептотрихий, спирохет. В 1 мл слюны может содержаться до 1 млн. анаэробных микроорганизмов.

На количественный и качественный состав оральной микрофлоры во многом влияет состав пищи: повышенное количество сахарозы приводит к увеличению доли стрептококков и лактобактерий, в то время как глюкоза таким действием не обладает. Распад пищевых продуктов способствует накоплению в слюне и десневой жидкости углеводов, аминокислот, витаминов и других веществ, используемых микроорганизмами в качестве питательных субстратов. Однако микроорганизмы не исчезают из полости рта даже при кормлении человека через зонд. На состав микрофлоры полости рта других биотопов во многом влияет состояние иммунной, гормональной, нервной и других систем, которые нарушают стабильность микрофлоры. Определенную роль в изменении состава микробных ассоциаций играет гигиена полости рта. Микроорганизмы в полости рта могут обитать на зубах, слизистой оболочки, межзубных промежутках, в слюне. Микробный пейзаж различных отделов полости рта неодинаков. Бедна микроорганизмами гладкая поверхность станок ротовой полости, на спинке языка обнаруживается большое количество микробных видов. До нескольких сотен миллионов микробов высевается из 1 мг зубного налета.

С поверхности языка высеваются, главным образом аэробные виды. Доминирующим являются стафилококки, стрептококки Str. salivarius, Str. mitis, Str. sangius ) микрококки, пептококки, вейлонеллы, коринебактерии. Чаще, чем из других отделов полости рта, с языка высеваются энтеробактерии. На слизистой оболочке щек микроорганизмами немного. Это связано с тем, что глюкопротеины слюны тормозят прикрепление бактерий к эпителиальным клеткам. Микрофлора этой области представлена, в основном, стрептококками.

С поверхности десен, из физиологических карманов высеваются преимущественно стрептококки (Str. mitis)эпидермальные стафилококки, микрококки, лактобактерии, пептострептококки.

Поверхность зуба покрывает налет, который формируется из пролиферирующих микроорганизмов, эпителиальных клеток, лейкоцитов и макрофагов. Наибольшее число микробных видов регистрируется спустя сутки после образования зубного налета. Микрофлора зубного налета лиц с интактной полостью рта представлена ассоциациями лактобактерии со слюнными стрептококками, вейлонеллами, стафилококками, бактероидами, дифтероидами. В зрелой стадии развития зубной бляшки присутствуют разнообразные микробы: как аэробы, так и анаэробы: стрептококки, стафилококки, дрожжеподобные грибы, дифтероиды, пептострептококки, фузобактерии, вибрионы, вейлонеллы, нейссерии, спирохеты. Зубная бляшка может минерализоваться и трансформироваться в зубной камень. В этом случае уменьшается число аэробных представителей, исчезают лактобациллы.(см.Табл.№2,стр. 47)