Качественные реакции на желчные кислоты

Задание 1. Провести качественные реакции на желчные кислоты.

А) Проба Гая.

Принцип. Желчные кислоты имеют свойство снижать поверхностное натяжение мочи.

Ход работы. В стаканчик прилить 20-30 мл мочи, затем на ее поверхность просеять через марлю тонко измельченный порошок серы. Если моча содержит желчные кислоты, то сера оседает на дно на протяжении 5 мин. При отсутствии желчных кислот в моче сера остается на поверхности даже при легком струшивании стаканчика. Проба становиться положительной при концентрации желчных кислот и их солей в моче выше, чем 0,01%.

Б) Реакция Петенкофера.

Принцип. При взаимодействии желчных кислот с оксиметилфур-фуролом образуются продукты их конденсации, которые имеют красно-фиолетовую окраску. Оксиметилфурфурол образуется из фруктозы (сахарозы) при взаимодействии с концентрированной серной кислотой.

Ход работы. На чашку Петри или стекло нанести 2-3 капли мочи, 2 капли раствора сахарозы и тщательно перемешать стеклянной палочкой. После этого прибавить 7 капель концентрированной серной кислоты и снова перемешать стеклянной палочкой. При наличии желчных кислот через несколько минут появляется красное окрашивание, которое постепенно переходит в красно-фиолетовое.

В) Проба с пептоном и салициловой кислотой.

Ход работы. 5-10 мл мочи фильтровать до полной прозрачности; если необходимо, подкислить уксусной кислотой и развести до относительной плотности ниже 1,008. Отмерить 2 мл отфильтрованной и разбавленной мочи и прибавить 5 мл реактива, который содержит пептон и салициловую кислоту. При наличии в моче желчных кислот появляется молочная муть.

Клинико-диагностическое значение. Желчные кислоты выполняют важную роль в переваривании и всасывании липидов - они обеспе-чивают эмульгирование жиров, активацию панкреатической липазы, образование смешанных мицелл. В норме желчные кислоты подвергаются энтеропечёночной циркуляции и выводятся из организма через кишечник. Нормальная моча, как правило, их не содержит. При механической желтухе они появляются в моче, и их количество увеличивается при длительной закупорке желчных протоков. Желчные кислоты в моче можно выявить и при паренхиматозной желтухе.

ЛИТЕРАТУРА

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 72-85, 396-398.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 94-109, 468-470, 478-480.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 348-363.

4. Вороніна Л.М. та ін. Біологічна хімія. – Харків: Основа, 2000. – С. 282-304.

5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 188-203, 363-370.

6. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 370-386.

7. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: ООО Медицинское информационное агентство, 1998. – С. 270-272, 279-281, 292-295.

8. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Кобилянська Л.І. /За ред. О.Я. Склярова. – К.:Здоров’я, 2002. – С. 119-145.

ЗАНЯТИЕ 8

Тема: Транспортные формы липидов. Обмен триацил-глицеролов и фосфолипидов. Количественное определение липопротеинов в сыворотке крови.

Актуальность. Так как липиды являются нерастворимыми в воде веществами, то в плазме крови они транспортируются только в комплексе с белками. Жирные кислоты транспортируются альбумином, а остальные липиды - в виде липопротеинов. Поскольку распределение фракций липопротеинов является фактором, который влияет на состояние сосудов, их содержание часто определяют в клинической практике. Кроме того, изучение содержания липопротеинов крови позволяет оценить функциональное состояние печени. Жировые депо организма содержат большое количество триацилглицеролов, которые подвергаются липолизу. Расщепление жиров происходит под действием клеточных липаз, которые активируются гормонами наорадреналином и адреналином. В клетке протекает как распад липидов с высвобождением энергии, так и их синтез (липогенез), который стимулируется инсулином. Фосфолипиды - это группа липидов, которые содержат фосфат и чаще всего азотистые основания. Ряд патологических состояний сопровождается нарушением обмена триацилглицеролов и фосфолипидов.

Цель. Выучить особенности строения, место синтеза, классификацию и роль липопротеинов крови, общие закономерности обмена триацилглицеролов и фосфолипидов и пути его регуляции. Ознакомиться с методом количественного определения липопротеинов в сыворотке крови и его клинико-диагностическим значением.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ

1. Липопротеины плазмы крови: классификация, химический состав, функции, метаболизм.

2. Катаболизм триацилглицеролов в адипоцитах жировой ткани (липолиз), последовательность реакций.

3. Нейрогуморальная регуляция липолиза адреналином, норадреналином, глюкагоном и инсулином.

4. Химизм и биологическая роль синтеза триацилглицеролов в энтероцитах кишечника, печени и жировой ткани.

5. Липолиз глицерофосфолипидов в клетке: локализация и особенности действия фосфолипазы А₁, А₂ и Д.

6. Биосинтез глицерофосфолипидов на примере фосфатидилхолина. Роль активной формы метионина в синтезе фосфатидилхолина.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1. Выберите вторичный посредник, который принимает участие в активации гормончувствительной триглицеридлипазы.

А. цГМФ.	С. Диацилглицерол.	Е. Инозитолтрифосфат.
В. цаМф.	D. Са2+.

2. Укажите липопротеины, которые обеспечивают транспорт холестерола в организме.

А. ЛППП. В. ЛПНП. С. Хиломикроны. D. ЛПОНП. Е. ЛПВП.

3. Укажите класс липопротеинов, содержащий наибольшее количество белка.

А. ЛППП. В. ЛПОНП. С. Хиломикроны. D. ЛПНП. Е. ЛПВП.

4. Назовите соединение, которое является предшественником в синтезе фосфатидилхолина.

А. Фосфатидилэтаноламин.	С. Фосфатидилинозитол.
В. Фосфатидилсерин.	D. Кардиолипин.

5. Выберите макроэргическое соединение, энергия которого используется в синтезе триацилглицеролов.

А. ЦТФ.

В. ГТФ.

С. АТФ.

D. УТФ.

Е. АДФ.

6. Выберите ферменты, которые расщепляют фосфолипиды.

А. Панкреатическая липаза.	D. Кишечная липаза.
В. Моноглицеридлипаза.	Е. Фосфолипазы А1, А2 и Д.
С. Лизофосфолипаза.

7. Укажите гормончувствительный регуляторный фермент липолиза в жировой ткани.

А. Триглицеридлипаза.	С. Моноглицеридлипаза.	Е. Холестеролэстераза.
В. Диглицеридлипаза.	D. Фосфолипаза.

8. Укажите липиды, транспорт которых, преимущественно обеспечивают хиломикроны крови.

А. Эндогенные триглицериды.	D. Фосфолипиды.
В. Экзогенные триглицериды.	Е. Холестерол и его эфиры.
С. Холестерол.

9. Укажите субстрат, из которого образуется глицерол-3-фосфат в процессе биосинтеза триацилглицеролов в жировой ткани.

А. Глицеральдегидфосфат.	D. Диоксиацетонфосфат.
В. Глицерин.	Е. Пировиноградная кислота.
С. Глицериновая кислота.

10. При алиментарной гиперлипидемии в крови увеличивается содержание:

А. Фосфолипидов.	С. Холестерола.	Е. Хиломикронов.
В. Триглицеридов.	D. Гликолипидов.

11. Какие из перечисленных веществ являются липотропными и предотвращают жировое перерождение печени?

А. Метионин.	С. Билирубин.	Е. Глюкоза.
В. Холестерол.	D. Глицин.

12. Какой гормон угнетает липолиз в жировой ткани?

А. Инсулин.	С. Глюкагон.	Е. Кортикотропин.
В. Адреналин.	D. Тироксин.

13. Что является атерогенными факторами, которые содержат много холестерола?

А. Хиломикроны.	С. ЛПНП.	Е. Альбумины.
В. ЛПВП.	D. ЛПОНП.

14. При жировой инфильтрации печени повышается синтез фосфолипидов. Какое вещество может усиливать процессы метилирования в их синтезе?

А. Метионин. В. Витамин С. С. Глюкоза. D. Глицерол. Е. Цитрат.

15. При обследовании больного выявлено повышенное содержание в сыворотке крови ЛПНП. Какое заболевание можно предположить?

А. Гастрит.	С. Острый панкреатит.	Е. Воспаление лёгких.
В. Поражение почек.	D. Атеросклероз.

16. В организме человека основным местом депонирования триацилглицеролов (ТАГ) является жировая ткань, вместе с тем их синтез происходит и в гепатоцитах. В виде какого вещества ТАГ транспортируются из печени в жировую ткань?

А. Хиломикронов.	С. ЛПНП.	Е. Комплекса с альбуминами.
В. ЛПОНП.	D. ЛПВП.

17. У мужчины, 35 лет, наблюдается феохромоцитома. В крови выявлен повышенный уровень адреналина и норадреналина, концентрация свободных жирных кислот повышена в 11 раз. Активация какого фермента в условиях действия адреналина ускоряет липолиз?

А. ТАГ-липазы.	С. Фосфолипазы А.	Е. Холестеролэстеразы.
В.Липопротеинлипазы	D. Фосфолипазы С.

18. В основе липолиза лежит ферментативный процесс гидролиза жира до жирных кислот и глицерола. Образованные жирные кислоты поступают в кровь и транспортируются в составе:

А. ЛПНП.	С. ЛПВП.	Е. Хиломикронов.
В. Глобулинов.	D. Альбуминов.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Количественное определение ЛПНП и ЛПОНП,